杨璇
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
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- 脑内源性cPKC gamma水平影响缺血性卒中小鼠脑梗死体积和神经功能损伤被引量：3
- 2013年
- 目的探讨脑内源性经典型蛋白激酶C（cPKC）γ表达水平对脑中动脉阻塞（MCAO）／再灌注（R）致缺血性脑卒中小鼠脑梗死体积和神经功能损伤程度的影响。方法利用cPKCγ基因野生型（WT）、杂合型（HET）和敲除型（KO）小鼠，建立小鼠1hMCAO／R24h和7d缺血性脑卒中模型，借助Westernblot蛋白印迹、2，3，5-氯化三苯基四唑（TTC）染色、神经行为学测试等技术方法，检测脑内源性cPKCγ蛋白表达水平、脑梗死体积和神经功能损伤情况。结果MCAO／R1h／24h和7d可使WT、HET和KO小鼠脑出现明显的梗死灶和神经功能损伤；具有双拷贝基因的wT小鼠脑内cPKCγ／蛋白表达量存在个体差异的同时，只有单拷贝基因的HET小鼠脑内cPKCγ蛋白表达水平约为wT型小鼠的30％～100％，而非简单的50％；脑内源性cPKCγ／蛋白表达量与卒中脑梗死体积大小呈明显的负相关性，且神经功能损伤程度随着脑内cPKCγ／蛋白表达水平的增高而明显减轻。结论脑内源性cPKCγ／蛋白表达水平可影响缺血性卒中小鼠脑梗死体积和神经功能损伤程度。
- 李洁霏章欣欣钟洁杨璇李筠韩松李俊发
- 关键词：脑梗死体积基因敲除小鼠
- 经典型蛋白激酶Cγ及其相互作用蛋白14-3-3γ在原代培养小鼠脑皮层神经元氧-糖剥夺缺血损伤中的作用被引量：1
- 2015年
- 目的探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)及其相互作用蛋白14-3-3γ在原代培养小鼠脑皮层神经元氧-糖剥夺(OGD)缺血损伤中的作用。方法利用cPKCγ基因敲除(cPKCγ-/-)小鼠和原代培养脑皮层神经元1hOGD/24h复糖复氧(R)模拟离体细胞缺血模型,给予14-3-3γ抑制剂R18干扰,采用免疫共沉淀(Co-IP)、蛋白免疫印迹(Westernblotting)和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,验证cPKCγ与14-3-3γ的相互作用及其对原代培养小鼠脑皮层神经元1hOGD/24hR缺血损伤的影响。结果Co-IP结果证明,14-3-3γ与cPKCγ在小鼠脑皮层中确实存在相互作用;1hOGD/24hR处理使原代培养野生型(cPKCγ+/+)小鼠脑皮层神经元内cPKCγ蛋白水平明显降低,而14-3-3γ蛋白水平显著增加(P<0.05,每组n=6);对于原代培养cPKCγ-/-小鼠脑皮层神经元,尽管14-3-3γ表达水平明显高于cPKCγ+/+小鼠脑皮层神经元,但1hOGD/24hR处理却使14-3-3γ表达水平显著降低(P<0.05,每组n=6),提示cPKCγ可影响神经元内14-3-3γ的表达水平。此外,MTT结果表明,14-3-3γ抑制剂R18(100μmol/L)可显著加重1hOGD/24hR处理原代培养cPKCγ-/-和cPKCγ+/+小鼠脑皮层神经元的缺血损伤(P<0.05,每组n=6)。结论cPKCγ与14-3-3γ在小鼠脑皮层神经元内存在相互作用并影响14-3-3γ的蛋白表达水平,cPKCγ和14-3-3γ在原代培养小鼠脑皮层神经元缺血/低氧损伤中起保护作用。
- 章欣欣杨璇马维陈璐勔韩松李俊发
- 关键词：缺血损伤免疫印迹法小鼠
- cPKCγ参与低氧预适应对小鼠脑缺血皮质内CRMP2水解和磷酸化的调节被引量：3
- 2012年
- 目的探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)在低氧预适应(HPC)调节小鼠脑缺血皮质内脑衰反应蛋白-2(CRMP2)水解和磷酸化中作用。方法利用雄性BALB/c小鼠(18～22 g)HPC和大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,借助蛋白印迹、免疫共沉淀和免疫组化等生物化学技术,观察cPKCγ激活对小鼠缺血脑皮质内CRMP2蛋白水解程度(BDP)和磷酸化水平(p-CRMP2)、cPKCγ-CRMP2相互作用和皮质缺血半影区内p-CRMP2阳性细胞数的影响。结果 HPC显著提高缺血脑皮质半影区内p-CRMP2水平,降低BDP产物形成(P<0.05),而侧脑室注射cPKCγ抑制剂Go6983(6nmol/L)可明显解除HPC对半影区内CRMP2蛋白水解和磷酸化的调节作用(P<0.05);免疫共沉淀结果提示,cPKCγ激活程度参与HPC对缺血脑皮质半影区内cPKCγ-CRMP2相互作用的调节;同时,cPKCγ激活与HPC提高脑缺血半影区内p-CRMP2阳性细胞数有关(P<0.05)。结论 cPKCγ参与HPC对小鼠缺血脑皮质内CRMP2水解与磷酸化的调节。
- 刘燕燕杨璇韩松苏吉儿罗宏李俊发
- 关键词：大脑中动脉阻塞
- cPKCγ-14-3-3γ信号通路在小鼠脑缺血/低氧损伤中作用
- 目的:本实验室曾报道经典型蛋白激酶C(c PKC)γ参与小鼠脑低氧预适应(HPC)保护作用,且蛋白组学分析揭示c PKCγ可能与14-3-3γ存在着相互作用,但其具体机制尚不清楚。据此,本研究拟利用c PKCγ基因敲除(...
- 章欣欣杨璇朱弘倚于津泠韩松罗艳琳李俊发
- 关键词：基因敲除
- 文献传递
