章欣欣
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
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- cPKCγ-14-3-3γ信号通路在小鼠脑缺血/低氧损伤中作用
- 目的:本实验室曾报道经典型蛋白激酶C(c PKC)γ参与小鼠脑低氧预适应(HPC)保护作用,且蛋白组学分析揭示c PKCγ可能与14-3-3γ存在着相互作用,但其具体机制尚不清楚。据此,本研究拟利用c PKCγ基因敲除(...
- 章欣欣杨璇朱弘倚于津泠韩松罗艳琳李俊发
- 关键词：基因敲除
- 文献传递
- 自噬在小鼠缺血性脑卒中损伤中作用及其cPKCγ分子机制
- 目的:观察小鼠缺血性卒中发展过程中自噬发生情况,探讨自噬脑在缺血性脑卒中损伤中作用和经典型蛋白激酶C(c PKC)γ参与自噬的可能分子机制。方法:利用脑中动脉栓塞(MCAO)1h/再灌注(R)1、3和7d,建立C56BL...
- 魏海萍章欣欣韩松张楠赵丽罗艳琳李俊发
- 关键词：缺血性脑卒中细胞自噬基因敲除神经功能损伤
- 文献传递
- 脑内源性cPKC gamma水平影响缺血性卒中小鼠脑梗死体积和神经功能损伤被引量：3
- 2013年
- 目的探讨脑内源性经典型蛋白激酶C（cPKC）γ表达水平对脑中动脉阻塞（MCAO）／再灌注（R）致缺血性脑卒中小鼠脑梗死体积和神经功能损伤程度的影响。方法利用cPKCγ基因野生型（WT）、杂合型（HET）和敲除型（KO）小鼠，建立小鼠1hMCAO／R24h和7d缺血性脑卒中模型，借助Westernblot蛋白印迹、2，3，5-氯化三苯基四唑（TTC）染色、神经行为学测试等技术方法，检测脑内源性cPKCγ蛋白表达水平、脑梗死体积和神经功能损伤情况。结果MCAO／R1h／24h和7d可使WT、HET和KO小鼠脑出现明显的梗死灶和神经功能损伤；具有双拷贝基因的wT小鼠脑内cPKCγ／蛋白表达量存在个体差异的同时，只有单拷贝基因的HET小鼠脑内cPKCγ蛋白表达水平约为wT型小鼠的30％～100％，而非简单的50％；脑内源性cPKCγ／蛋白表达量与卒中脑梗死体积大小呈明显的负相关性，且神经功能损伤程度随着脑内cPKCγ／蛋白表达水平的增高而明显减轻。结论脑内源性cPKCγ／蛋白表达水平可影响缺血性卒中小鼠脑梗死体积和神经功能损伤程度。
- 李洁霏章欣欣钟洁杨璇李筠韩松李俊发
- 关键词：脑梗死体积基因敲除小鼠
- 经典型蛋白激酶Cγ及其相互作用蛋白14-3-3γ在原代培养小鼠脑皮层神经元氧-糖剥夺缺血损伤中的作用被引量：1
- 2015年
- 目的探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)及其相互作用蛋白14-3-3γ在原代培养小鼠脑皮层神经元氧-糖剥夺(OGD)缺血损伤中的作用。方法利用cPKCγ基因敲除(cPKCγ-/-)小鼠和原代培养脑皮层神经元1hOGD/24h复糖复氧(R)模拟离体细胞缺血模型,给予14-3-3γ抑制剂R18干扰,采用免疫共沉淀(Co-IP)、蛋白免疫印迹(Westernblotting)和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,验证cPKCγ与14-3-3γ的相互作用及其对原代培养小鼠脑皮层神经元1hOGD/24hR缺血损伤的影响。结果Co-IP结果证明,14-3-3γ与cPKCγ在小鼠脑皮层中确实存在相互作用;1hOGD/24hR处理使原代培养野生型(cPKCγ+/+)小鼠脑皮层神经元内cPKCγ蛋白水平明显降低,而14-3-3γ蛋白水平显著增加(P<0.05,每组n=6);对于原代培养cPKCγ-/-小鼠脑皮层神经元,尽管14-3-3γ表达水平明显高于cPKCγ+/+小鼠脑皮层神经元,但1hOGD/24hR处理却使14-3-3γ表达水平显著降低(P<0.05,每组n=6),提示cPKCγ可影响神经元内14-3-3γ的表达水平。此外,MTT结果表明,14-3-3γ抑制剂R18(100μmol/L)可显著加重1hOGD/24hR处理原代培养cPKCγ-/-和cPKCγ+/+小鼠脑皮层神经元的缺血损伤(P<0.05,每组n=6)。结论cPKCγ与14-3-3γ在小鼠脑皮层神经元内存在相互作用并影响14-3-3γ的蛋白表达水平,cPKCγ和14-3-3γ在原代培养小鼠脑皮层神经元缺血/低氧损伤中起保护作用。
- 章欣欣杨璇马维陈璐勔韩松李俊发
- 关键词：缺血损伤免疫印迹法小鼠
- 自噬在氧-糖剥夺诱导的原代培养小鼠脑皮层神经元缺血损伤中作用
- 目的:在离体细胞水平,探讨不同时程氧-糖剥夺(OGD)致原代培养小鼠脑皮层神经元缺血损伤中细胞自噬的变化情况和可能作用。方法:利用新出生24h内C57BL/6J乳鼠的脑皮层神经元,进行原代培养7天后,并将其分为常氧组、O...
- 陈璐勔马维章欣欣罗艳琳赵丽韩松李俊发
- 关键词：原代培养神经元缺血性损伤
- 文献传递
- 转化生长因子-β在激光诱导脉络膜新生血管形成中的作用被引量：3
- 2014年
- 目的 观察转化生长因子-β（TGF-β）在激光诱导脉络膜新生血管形成（CNV）中的作用.方法 6-8周龄雄性C57BL/6J小鼠80只随机分为正常对照组、光凝模型组、光凝加磷酸盐缓冲液（PBS）对照组（PBS对照组）、光凝加TGF-β受体抑制剂组（TGF-β受体抑制剂组）,每组20只.光凝模型组、PBS对照组及TGF-β受体抑制剂组小鼠均采用激光光凝诱导CNV形成.激光光凝后1、2、3、4周,对正常对照组及光凝模型组小鼠行荧光素眼底血管造影（FFA）检查,动态观察小鼠模型CNV的形成情况;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测正常对照组及光凝模型组小鼠视网膜内TGF-β的蛋白表达以及正常对照组、PBS对照组、TGF-β受体抑制剂组小鼠视网膜内VEGF和TNF-α的蛋白表达.激光光凝后2周,作视网膜色素上皮细胞/脉络膜组织铺片,采用荧光染色计算各组CNV面积.结果 FFA检查结果显示,正常对照组小鼠视网膜血管以视盘为中心呈放射状走行,脉络膜血管呈网状分布;激光光凝后1周,光凝模型组小鼠光凝区可见荧光素渗漏呈盘状强荧光团.Western blot检测结果显示,光凝模型组小鼠视网膜内TGF-β蛋白表达随激光光凝时间延长而逐渐升高.光凝模型组与正常对照组小鼠视网膜内TGF-β蛋白表达比较,差异有统计学意义（F=13.042,P＜0.05）.激光光凝后1、2、3、4周,PBS对照组、TGF-β受体抑制剂组小鼠视网膜内TNF-α（F=14.721、17.509）、VEGF（F=18.890、11.251）蛋白表达均较正常对照组明显增加,差异均有统计学意义（P＜0.05）.与PBS对照组比较,TGF-β受体抑制剂组小鼠视网膜内TNF-α、VEGF蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义（F=21.321、16.160,P＜0.05）.激光光凝后2周,TGF-β受体抑制剂组小鼠脉络膜内CNV面积明显小于PBS对照组及光凝模型组,差异均有统计学意义（F=4.482,P＜0.05）.结论 TGF-β可能通过上调TNF-α和VEGF蛋白表达水�
- 马维汪晓磊章欣欣陈璐勔韩松李俊发
- 关键词：血管内皮生长因子类
