杨敬慈
- 作品数：74 被引量：162H指数：7
- 供职机构：河北医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金河北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 慢性粒细胞性白血病中SHIP1基因的表达变化及机制探讨被引量：10
- 2008年
- 目的观察SHIP1基因在慢性粒细胞性白血病(CML)患者中的表达变化,并通过特异性小干扰RNA(siRNA)封闭K562细胞株BCR-ABL基因的表达,探讨BCR-ABL基因表达对SHIP1基因的影响。方法应用RQ-PCR方法检测CML患者骨髓、正常人外周血白细胞及白血病细胞株K562中SHIP1基因表达的差异。另取K562细胞分为3组:空白对照组(不加任何干扰成分);非特异性siRNA处理组(加非特异性siRNA);特异性siRNA处理组(加入特异性siRNA封闭BCR/ABL融合基因),应用RQ-PCR及Western blot方法分别检测3组中BCR/ABL、SHIP1基因的mRNA及其相应蛋白P210(BCR/ABL编码)、P145(SHIP1基因编码)的表达,并比较各组中表达水平的变化。结果CML患者骨髓白细胞和K562细胞中SHIP1基因的表达明显低于正常人的外周血白细胞。特异性siRNA处理组中BCR-ABL基因mRNA和P210蛋白的表达水平明显下降,SHIP1基因mRNA和P145蛋白表达水平随BCR-ABL表达下降而增加;非特异性siRNA处理组与空白组相比无明显差异。结论CML患者SHIP1基因的表达低于正常人;特异性siRNA能够抑制BCR-ABL基因的表达;BCR-ABL基因能抑制SHIP1基因及其蛋白表达。
- 刘小军罗建民杨琳温树鹏姚丽杜行严杨敬慈董作仁
- 关键词：BCR/ABL基因
- 吉兰-巴雷综合征患者免疫球蛋白治疗前后T淋巴细胞亚群的变化及其意义被引量：4
- 2008年
- 目的研究吉兰-巴雷综合征（GBS）患者应用静脉大剂量注射免疫球蛋白（IVIG）治疗前后T淋巴细胞亚群的变化，并进一步探讨IVIG治疗GBS的可能机制。方法选择31例临床确诊的GBS患者，以治疗前后作为自身对照，根据治疗效果评定为效优组和效劣组，应用流式细胞分析仪检测GBS患者外周血中T淋巴细胞亚群相对计数。结果①GBS患者急性期治疗后CD8^＊T细胞（28．77％±11．02％）和CD4^＋CD29^＋T细胞百分率（56．71％±12．44％）较治疗前（分别为31．84％±12．35％、62．40％±12．72％）显著降低（t=2．995、3．919，P〈0．05），CD；／CD8^＋值和CD；CD45RA^＋T细胞百分率较治疗前显著升高（t=2．368、3．860，P〈0．05），但治疗前后CD8^＋T细胞和CD4^＋T细胞百分率差异无统计学意义。②效优组CD8^＋T细胞和CD4^＋CD29^＋T细胞百分率较治疗前显著降低（t=2．144、3．343，P〈0．05），CD；／CD8^＋值和CD4^＋CD45^RA^＋T细胞百分率较治疗前显著升高（t=2．159、3．277，P〈0．05），效劣组T淋巴细胞亚群分布在治疗前后未发生明显变化。③在本组资料中，WIG治疗急性期GBS2周内的显效率为61．29％（19／31），无死亡病例。结论急性期GBS患者在IVIG治疗前后发生了不同程度T淋巴细胞亚群分布的改变，为探讨GBS的发病机制及IVIG治疗GBS的机制提供了免疫学基础；IVIG治疗效果好，能够有效抑制病情进展，促进神经功能恢复。
- 郭力侯慧清宋秀娟杨敬慈高长玉
- 关键词：格林-巴利综合征T淋巴细胞亚群
- JAK家族基因与细胞因子信号传导抑制因子家族基因在白血病细胞中的表达及意义
- 2008年
- 目的探讨SOCSs基因和JAKs基因在急性髓系白血病（AML）患者中的表达情况。方法RT-PCR方法检测AML患者和正常对照骨髓SOCS1～7、JAK1～3和TYK 2mRNA的表达。结果①AML患者SOCS1、4、5、7的表达明显低于缓解组和正常对照组（P〈0．01），SOCS3、6表达水平较缓解组和正常对照组高（P〈0．01），SOCS2在各组无明显差异；AML患者JAK2、JAK3、TYK2 mRNA平均表达水平较缓解组和正常对照组明显增高（P〈0．05）。初治AML患者JAKl mRNA表达水平较正常对照组略增高，但差异无统计学意义（P〉0．05），复发AML患者JAKl mRNA表达水平较正常对照组明显增高（P〈0．05）。结论AML患者的SOCS1、4、5、7基因表达缺失或降低，JAK家族基因表达明显增高，提示二者可能共同参与髓系白血病的发生。
- 杨琳牛志云潘玉夏刘小军温树鹏杜行研姚丽杨敬慈罗建民
- 关键词：白血病
- SHIP基因突变对白血病细胞系K562细胞迁移及侵袭的影响被引量：2
- 2012年
- 目的 研究含SH2结构域的肌醇磷酸酶（SHIP）基因碳末端PxxP结构域点突变对细胞体外迁移及侵袭能力的影响及其机制.方法 采用基因转染技术将携带野生型（wt）和突变型（mu）SHIP基因的慢病毒载体感染人白血病细胞系K562细胞；采用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）和Western blot法分别在mRNA和蛋白水平检测转染后各组SHIP基因表达水平；采用Transwell小室比较K562/wtSHIP、K562/muSHIP转染后K562细胞跨膜及侵袭能力有无差别；Westem blot法比较各组细胞基质金属蛋白酶（ MMP）-2、MMP-9和磷酸化灶性黏着斑激酶（p-FAK）的表达情况,并检测各组细胞NF-KB活性改变.结果 感染慢病毒48 h后FQ-PCR和Westemblot法检测结果显示SHIP基因在K562细胞中表达明显升高；K562/wtSHIP组细胞迁移指数为（15.8±1.4）％,明显低于K562/muSHIP组[（54.3±2.4）％]和转染空载体的细胞对照组[K562/猫免疫缺陷病（pFIV）组,（50.3±3.8）％]（P＜0.01）；K562/muSHIP组与K562/pFIV组差异无统计学意义（P＞0.05）；侵袭实验显示K562/wtSHIP组迁移到碳酸脂膜的细胞[（32±6）/视野]较K562/pFIV细胞[（78±13）/视野]和K562/muSHIP细胞[（83±16）/视野]明显减低.而K562/pFIV细胞与K562/muSHIP细胞比较,在侵袭能力上差异无统计学意义（P＞0.05）.K562/muSHIP细胞p-FAK和NF-KB表达明显高于K562/wtSHIP细胞.结论 SHIP基因碳末端PxxP结构域对于SHIP基因负调节功能有重要作用.此位点发生突变通过影响FAK蛋白磷酸化、NF-KB活化以及MMP-9的表达影响K562细胞的体外迁移和侵袭能力；SH IP基因碳末端PxxP结构域点突变可能为致病性突变,可能是白血病细胞中SHIP功能异常的原因之一.
- 刘小军杨琳温树鹏姚丽杨敬慈罗建民
- 关键词：白血病基因SHIPK562细胞突变慢病毒感染
- 重组变构人TNF相关促凋亡配体联合三氧化二砷诱导白血病耐药细胞株凋亡被引量：2
- 2008年
- 本研究探讨重组变构人TNF相关促凋亡配体(recombinant mutant human TNF-related apoptosis-inducing ligand,rmhTRAIL)联合三氧化二砷(As2O3)对阿霉素诱导的人慢性髓系白血病红白血病变耐药细胞株K562/AO2(mdr-1+)的促凋亡作用。以亲本阿霉素敏感细胞株K562(mdr-1-)为对照,观察rmhTRAIL作用后细胞形态变化,采用MTT法测定rmhTRAIL、As2O3单药及联合作用后细胞增殖抑制率;碘化丙锭染色的流式细胞术(FACSCalibur)定量检测rmhTRAILL、As2O3单药及联合作用后sub-G1峰占检测细胞的百分比(sub-G1%)。结果表明:rmhTRAIL联合As2O3对K562/AO2和K562增殖的抑制作用优于单药,采用国内金(正均)氏公式判断rmhTRAIL和As2O3联合作用具有协同作用;流式细胞术定量检测sub-G1%显示,rmhTRAIL2 000ng/ml与As2O32μmol/L单独作用下K562/AO2组与K562组凋亡率分别为(34.93±0.10)%、(10.53±0.16)%(p<0.01);(5.95±0.07)%、(3.50±0.01)%(p<0.05),联合作用下细胞凋亡率分别为(50.95±0.91)%、(20.75±0.95)%(p<0.05),K562/AO2组凋亡效应强于K562组。结论:rmhTRAIL可诱导K562、K562/AO2细胞凋亡;rmhTRAIL联合凋亡诱导剂As2O3对白血病耐药细胞株K562/AO2和K562细胞株的凋亡具有协同作用;rmhTRAIL、As2O3对K562/AO2的促凋亡作用优于其亲本K562细胞。
- 王雅茹温树鹏王福旭温丽杨渤彦杨敬慈张学军杨世方
- 关键词：多药耐药基因-1K562CELLK562/AO2CELL三氧化二砷
- 抗CD44单抗对HL-60白血病细胞增殖及化的影响
- 目的:CD44是粘附分子家族的Ⅰ型跨膜糖蛋白,广泛存在于大多数脊椎动物的细胞表面,介导细胞与细胞或细胞与细胞外基质之间粘附作用。CD44分子表达于大多数骨髓CD34细胞及系别限制性造血祖细胞上,参与髓系正常分化。CD44...
- 郝洪岭董作仁罗建民李小红王福绪刘泽林杨敬慈潘凌
- 文献传递
- 血小板活化标志物CD62P,CD63与血清胱抑素C 联合检测在糖尿病肾病早期诊断的临床研究被引量：5
- 2013年
- 目的 观察糖尿病肾病（DN）患者血小板活化标志物CD62P,CD63表达及血清胱抑素C的变化及其相关性,探讨两者在DN早期的作用.方法 选择单纯糖尿病（DM）28例,早期糖尿病肾病30例,健康对照组26例.采用流式细胞仪（FCM）检测各组CD62P,CD63的表达水平,采用胶乳增强免疫透射比浊法检测血清胱抑素C.结果 ①单纯糖尿病组的CD62P（5.56±2.31）%和CD63（7.60±2.18）%的表达水平较正常对照组（1.60±0.56）%高（P〈0.01）,早期糖尿病肾病组CD62P（8.60±2.43）%,CD63（15.67±3.35）%的表达水平较单纯糖尿病组高（P〈0.01）;早期糖尿病肾病组Cys-C（0.64±0.28mg/L）结果较单纯糖尿病组（0.91±0.12mg/L）高（P〈0.01）;②早期糖尿病肾病组CD62P,CD63与Cys-C呈正相关（r1=0.394,r2=0.592,P〈0.05）.结论 血小板活化标志物CD62P,CD63的表达水平与血清胱抑素C浓度在糖尿病早期肾损害中有着重要的临床意义,二者联合检测可作为糖尿病肾病早期诊断指标.
- 李云婷赵建宏付洁杨敬慈
- 关键词：糖尿病肾病CD62PCD63
- 抗CD44单抗对HL-60白血病细胞增殖及分化的影响
- CD44是粘附分子家族的I型跨膜糖蛋白,广泛存在于大多数脊椎动物的细胞表面,介导细胞与细胞或细胞与细胞外基质之间粘附作用.CD44分子表达于大多数骨髓CD34+细胞及系别限制性造血祖细胞上,参与髓系正常分化.CD44的功...
- 郝洪岭董作仁罗建民李小红王福绪刘泽林杨敬慈潘凌
- 关键词：白血病细胞增殖HL-60细胞诱导分化治疗细胞分化
- 文献传递
- 髓系白血病患者中血管生成素及受体酪氨酸激酶的表达及其意义
- 2008年
- 目的:探讨血管生成素及受体酪氨酸激酶(Angs及Tie-2)与髓系白血病的关系,以及与血管内皮生长因子(VEGF)的相互关系。方法:应用半定量RT-PCR检测80例急性髓系白血病(AML)、10例慢性髓系白血病(CML)和10例正常人骨髓单个核细胞(BMNCs)中Ang-1、Ang-2、Tie-2和VEGF mRNA的表达。用流式细胞术检测白血病细胞增殖指数(PI)。结果:与正常对照相比,除Ang-1外,Ang-2、Tie-2和VEGF mRNA在初治的髓系白血病中表达均增高,缓解后降低。在Ang-2与VEGF双阳性白血病组,髓外浸润率明显增高(P<0.05);Ang-2/Tie-2双阳性组缓解率低(P<0.05)、PI增高(P<0.05)并与CML的发展阶段有关。结论:髓系白血病患者高表达Angs/Tie-2,同时其与VEGF之间相互作用,与白血病的发展阶段相关。
- 成志勇潘崚杨琳薛芳杨敬慈姚丽董作仁
- 关键词：髓系白血病血管生成素受体酪氨酸激酶血管内皮生长因子
- 人骨髓间充质干细胞抑制T淋巴细胞增殖及对IL-10,IFN-γ,LFA-1m RNA表达的影响
- ＜正＞目的研究人骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）对T淋巴细胞增殖抑制及对IL-10,IFN-γ,LFA-1 mRNA表达的影响。方法采用密度梯度离心法分离人BM-MSCs和外周血T淋巴细胞,利用
- 张硕张学军侯十前潘崚王福旭杨敬慈姚丽尚银涛
- 关键词：间充质干细胞T淋巴细胞IFN-ΓIL-10LFA-1
- 文献传递
