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携带IL-10基因的双歧杆菌对溃疡性结肠炎模型小鼠血浆及结肠组织NO和VEGF-A表达影响被引量：6: 2016年; 目的观察携带IL-10基因的双歧杆菌对溃疡性结肠炎(UC)小鼠血浆及结肠组织一氧化氮(NO)与血管内皮生长因子A(VEGF-A)表达的影响,进一步探讨携带IL-10基因的双歧杆菌治疗UC的相关机制。方法筛选出能稳定表达具有生物活性hIL-10蛋白的BL-hIL-10菌株。用5%DSS诱导UC小鼠模型,50只小鼠分为正常对照组、UC模型组、BL治疗组、BL0治疗组和BL-hIL-10治疗组,每组10只。计算小鼠DAI、HE染色评估结肠组织病理学变化;ELISA法测小鼠血浆及结肠组织IL-13、VEGF-A和NO的含量。结果 (1)BL-hIL-10可以降低UC小鼠DAI,减轻UC小鼠结肠组织炎症程度。(2)BL-hIL-10能降低UC小鼠血浆和结肠组织NO、VEGF-A和IL-13水平。结论口服BL-hIL-10对UC小鼠的治疗作用可能与抑制NO产生及下调VEGF-A表达有关。; 黄云辉张定国杨根华姚君李迎雪; 关键词：溃疡性结肠炎双歧杆菌白介素13

改良乒乓球法固定三腔二囊管在食管胃底静脉曲张破裂出血中的应用被引量：11: 2012年; 目的探讨改良乒乓球法固定三腔二囊管在食管胃底静脉曲张破裂出血中的应用价值。方法将113例食管胃底静脉曲张破裂出血的患者分为传统组(55例)和改良组(58例)。传统组采用沙氏导丝法插入三腔二囊管后用250 g重物悬吊牵引固定;改良组置管方法同传统组,用改良乒乓球法固定。比较两组止血效果及并发症发生率。结果两组止血效果相似,止血成功率分别为90.9%和93.1%,差异无统计学意义(P>0.05);但改良组并发症发生率较传统组低,胸闷、胸痛程度较传统组减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。结论改良乒乓球法固定三腔二囊管具有止血效果确切、并发症少、患者耐受性好、简单易行的优点,值得推广。; 宋洋徐正磊徐正磊严健芬; 关键词：三腔二囊管食管胃底静脉曲张破裂出血

重组人白介素10对低氧条件下人单核细胞凋亡变化规律的影响被引量：6: 2011年; 目的研究低氧条件下,重组人白介素10(rhIL-10)对人单核细胞白细胞(THP-1)凋亡和caspase-3活性变化规律的影响。方法悬浮培养THP-1细胞株,分为正常对照组(常规培养);低氧(5%O2,5%CO2,90%N2)培养THP-1,rhIL-10以10、50、100 ng/mL的浓度干预,分为低氧对照组,rhIL-10低、中、高剂量干预组;培养12、24、48、72 h,离心收集细胞,化学比色法检测细胞核内caspase-3活性,48 h核荧光染色荧光显微镜观察,分析荧光强度,行统计学分析。结果凋亡蛋白caspse-3相对活性,12 h各组差异无统计学意义(P>0.05);24 h低氧对照组及低、中剂量rhIL-10干预组与正常对照组比较升高(P<0.05),高剂量rhIL-10干预组与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),rhIL-10干预各组与低氧对照组比较降低(P<0.05);48 h低氧对照组和rhIL-10干预低、中、高剂量组与正常对照组比较升高(P<0.05),低、中、高剂量rhIL-10干预组与低氧对照组比较明显降低(P<0.05);72 h低氧对照组、低剂量rhIL-10干预组与正常组比较升高(P<0.05),其余各组差异无统计学意义(P>0.05);缺氧凋亡峰值见于48 h。取48 h行各组凋亡细胞核Hoechst荧光染色,灰度值分析低氧对照组和低、中、高剂量rhIL-10干预组与正常对照组比较升高(P<0.05);低、中、高剂量rhIL-10干预组与低氧对照组比较降低(P<0.05)。结论缺氧可促进单核细胞凋亡,rhIL-10可一定程度地抑制人单核细胞凋亡,这些变化可能与各器官急性缺氧性疾病有密切相关性。; 姚君王立生王建尧李迎雪朱惠明师瑞月张茹莫镜张利国; 关键词：低氧凋亡人单核细胞 CASPASE-3

双歧杆菌DNA对小鼠巨噬细胞中PKC和NF-κB的影响被引量：5: 2007年; 目的:探讨青春型双歧杆菌的DNA对巨噬细胞中6种PKC和NF-κB的影响。方法:通过激光共聚焦显微镜观察小鼠腹腔巨噬细胞中PKCα、PKCβI、PKCβII、PKCγ、PKCε和PKCζ的荧光强度,以免疫细胞化学染色法检测巨噬细胞中NF-κB+细胞的密度。结果:双歧杆菌DNA注射组小鼠腹腔巨噬细胞中,PKCα和PKCβII的平均荧光强度明显高于对照组(P<0.01);而PKCβI、PKCγ、PKCε和PKCζ的平均荧光强度在两组间则无统计学意义(P>0.05)。双歧杆菌DNA注射组巨噬细胞中,NF-κB+细胞的密度显著高于对照组(P<0.01)。结论:青春型双歧杆菌的DNA可通过活化PKCα、PKCβII和NF-κB来激活巨噬细胞。; 王立生李迎雪朱惠明朱忠生马晓冬; 关键词：双歧杆菌DNA 巨噬细胞蛋白激酶C 核因子-ΚB

白藜芦醇对溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜细胞因子表达的影响被引量：16: 2010年; 目的探讨白藜芦醇(Resveratro)l对溃疡性结肠炎(UC)治疗的可能机制。方法采用葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate Sodium,DSS)制作UC小鼠模型,小鼠随机分4成组:正常对照(NC)组、模型(MD)组、低剂量(RLD)、高剂量(RHD)白藜芦醇治疗组。造模7d同时给予干预治疗,停用造模药物并后续治疗7d。记录分析疾病活动指数(DAI),14d后处死小鼠,取结肠行HE染色;利用实时荧光定量RT-PCR法检测IL-10、TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA的表达,ELISA法测小鼠肠黏膜IL-10、TNF-α、IL-6和IL-1β蛋白水平。结果低、高剂量白藜芦醇治疗组小鼠第5～14天DAI明显低于模型组(P<0.05);模型组IL-10表达明显低于正常组(P<0.05),其TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA和蛋白表达则高于正常组(P<0.05);低、高剂量白藜芦醇治疗组结肠IL-10mR-NA表达和蛋白水平明显高于模型组(P<0.05),其TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA和蛋白水平则低于模型组(P<0.05);高剂量白藜芦醇治疗组IL-10mRNA表达和蛋白水平明显高于低剂量组(P<0.05),其TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA和蛋白水平则低于低剂量组(P<0.05)。结论白藜芦醇可以提高抗炎细胞因子IL-10的水平并降低致炎细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平,通过抗炎和降低肠道过度的免疫反应,对UC发挥治疗作用。; 姚君王立生王建尧李迎雪荀安营魏晓霞冯聚玲; 关键词：白藜芦醇 IL-10 IL-1Β

双歧杆菌对溃疡性结肠炎小鼠外周血和肠系膜淋巴结CD4^+ CD25^+ Foxp3^+调节T细胞表达的影响被引量：9: 2011年; 目的探讨双歧杆菌治疗溃疡性结肠炎与CD4+ CD25+ Foxp3+调节T细胞的相关可能机制。方法采用DSS制作UC小鼠结肠炎模型,随机分成3组:正常对照(NC)组,模型(MD)组,双歧杆菌治疗(BbT)组。造模7 d后,给予双歧杆菌后续治疗7 d。评估小鼠疾病活动指数(DAI),结肠行HE染色及病理学评分(HDS);流式细胞仪检测外周血和肠系膜淋巴细胞中表达CD4+ CD25+ Foxp3+的Treg细胞的百分比率。结果 BbT组的DAI明显低于模型组(P<0.05);MD组HDS明显高于正常组(P<0.05);BbT组的HDS明显低于模型组(P<0.05);模型组外周血和肠系膜淋巴细胞CD4+ CD25+ Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率明显低于正常组(P<0.05);BbT组结肠外周血和肠系膜淋巴细胞CD4+ CD25+ Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率明显高于模型组(P<0.05)。结论双歧杆菌可以提高CD4+ CD25+ Foxp3+Treg数量,调节机体和肠道免疫功能,对UC发挥了一定的治疗作用。; 姚君王立生师瑞月王建尧李迎雪张茹莫镜; 关键词：溃疡性结肠炎双歧杆菌 CD25+

双歧杆菌质粒聚合酶基因对质粒载体稳定性的影响被引量：1: 2009年; 目的探讨双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因(Bifidobacterium plasmid polymerase,BPP)对人工构建的大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭质粒载体(shuttle vector)在长双歧杆菌中稳定性的影响。方法首先电转化质粒pBADs-A和pBADs-BPP至长双歧杆菌,培养鉴定后,接种含质粒pBADs-A和pBADs-BPP的双歧杆菌于AMP-和AMP+的MRS培养液中。厌氧培养后,将样品涂布于AMP+的MRS固体培养板上计数菌落数。结果相同条件下质粒pBADs-BPP组菌落数高于质粒pBADs-A组(P<0.05)。结论BPP可以增加质粒载体的稳定性。; 荀安营王立生李娜朱忠生李迎雪龙若庭曾位森朱惠明; 关键词：双歧杆菌质粒载体稳定性

阿魏酸钠对溃疡性结肠炎小鼠肠道NF-kB表达和活性的影响被引量：3: 2015年; 目的：探讨阿魏酸钠（sodium ferulate, SF）对溃疡性结肠炎治疗的可能相关机制。方法：小鼠随机分4成组空白对照（NC）组、模型（MD）组、低剂量（SFLD）、高剂量（SFHD）阿魏酸钠治疗组，NC组采用正常饮用水饲养，采用5%葡聚糖硫酸钠（Dextran sulfate Sodium, DSS）制作UC小鼠模型，造模7 d成模后分为MD组、SFLD组和SFHD组，予药物干预治疗后续7 d。记录分析疾病活动指数（DAI）及脾脏指数（Spleen Index SI），取结肠组织行HE染色；Western blot检测结肠NF-KB表达水平；ELISA法测小鼠肠粘膜NF-kB活性。结果：SFLD组、SFHD组小鼠第8～14 d DAI明显低于MD组（P＜0.05）；SFLD组、SFHD组小鼠第14 d SI明显低于MD组（P＜0.05）；MD组SI明显高于NC组（P＜0.05）；SFLD组、SFHD组结肠NF-kB表达和活性明显低于MD组；MD组结肠NF-kB表达和活性明显高于NC组（P＜0.05）；MD组NF-kB表达和活性明显高于NC组（P＜0.05）。结论：阿魏酸钠可以通过降低结肠NF-kB表达及活性；抑制脾脏代偿性增大，从而减轻肠道的炎症反应及抑制脾脏的免疫反应，改善UC全身炎症状态及免疫应答，对UC发挥治疗作用。; 姚君王建尧王建尧王立生李迎雪张茹; 关键词：溃疡性结肠炎阿魏酸钠 NF-KB

表达IL-24蛋白的重组双歧杆菌抑制结肠癌NF-κB信号通路的研究: 2016年; 目的目前结肠癌的治疗仍无突破性进展。本研究观察表达IL-24蛋白的重组双歧杆菌对大肠癌细胞NF-κB P65信号通路的抑制作用。方法采用分子克隆技术,先改建好在双歧杆菌高效表达的分泌型原核表达载体pBBADs,然后将人IL-24基因克隆到表达载体上,采用电穿孔法转化长双歧杆菌,获得携带IL-24基因的的重组双歧杆菌(BL-IL-24)。对BL-IL-24进行RT-PCR法行IL-24基因鉴定。结果 BL-IL-24的IL-24基因鉴定为621kb。鉴定最佳诱导表达时间为24h,BL-IL-24蛋白表达为21kb。BL-IL-24组和BL0组分别与PBS组,NF-κB p65、IL-6表达水平明显降低(P<0.05)。BL-IL-24与BL0组对比,NF-κB P65及IL-6表达水平降低(P<0.05)。结论 BL-IL-24的重组双歧杆菌结合了双歧杆菌及IL-24的双重治疗优势,通过抑制大肠癌细胞NF-κB P65及IL-6表达水平,从而,大肠癌有明显的治疗作用,为大肠癌的治疗提供新的治疗方法。; 姚君王建尧王立生宋洋李迎雪; 关键词：双歧杆菌基因鉴定肠癌细胞结肠癌 IL-24 蛋白

双歧杆菌的完整肽聚糖对大鼠腹腔巨噬细胞ERK的影响被引量：6: 2007年; 目的探索分叉双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)对大鼠腹腔巨噬细胞ERK1/2的调控作用。方法以WPG刺激大鼠腹腔巨噬细胞或以PKC抑制剂Chelerythrine预先孵育巨噬细胞,再用WPG刺激巨噬细胞,最后用Western blot检测巨噬细胞ERK1/2的表达水平。结果未受WPG刺激的正常大鼠腹腔巨噬细胞ERK1/2处于低活性状态,给予WPG刺激巨噬细胞,其磷酸化ERK1/2的蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.01)。但经Chelerythrine预先孵育巨噬细胞后,其磷酸化ERK1/2的蛋白表达水平明显低于WPG刺激组(P<0.01)。结论分叉双歧杆菌的WPG可通过PKC激活巨噬细胞的ERK1/2。; 王立生杨林李迎雪朱忠生荀安营朱惠明; 关键词：双歧杆菌完整肽聚糖巨噬细胞

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李迎雪

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