李贺
- 作品数：13 被引量：27H指数：4
- 供职机构：新疆农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划农业部农业结构调整重大技术研究专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- H5N1亚型禽流感病毒M2基因的原核表达及纯化被引量：1
- 2007年
- 将含缺失跨膜区M2蛋白重组质粒pGEXsM2的大肠杆菌,用终浓度为0.6 mmol/L IPTG在37℃下诱导表达,获得可溶性表达的融合蛋白;在Western blot试验中,M2特异性单克隆抗体14C2与目的蛋白发生反应,在35 kD处有一条特异性条带,表明表达的重组M2蛋白具有免疫学活性;表达产物使用GST亲和吸附柱进行纯化,获得了大量的目的蛋白及微量的GST蛋白,使用分光光度仪确定纯化后M2蛋白的浓度约为5.6 mg/mL。本实验为进一步研究M2生物学特性、建立M2特异性抗体的间接ELISA检测方法及研制M2亚单位疫苗奠定了基础。
- 王文娟孟庆文李贺冉多良刘光亮肖一红吴东来
- 关键词：禽流感病毒纯化
- 表达H7亚型禽流感HA基因杆状病毒转移载体的构建及重组病毒的鉴定
- 2009年
- 经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/PFV/Restock/1/34(H7N1)1.7kbHA基因的cDNA克隆到pMD18-T中并测序。在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后,亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHis4.5,筛选到重组质粒命名为rpBacHisH7HA。测序正确后,在脂质体介导下,与线性化的杆状病毒DNA(Bac-N-BlueTMDNA)共转染Sf9昆虫细胞,挑取蓝色蚀斑,经三轮蚀斑纯化,获得数株重组杆状病毒rBacHisH7HA。提取重组病毒DNA经PCR证明目的基因片段已插入杆状病毒基因组。
- 李贺马保华孟庆文
- 关键词：禽流感HA基因杆状病毒
- 禽流感病毒A/PFV/Restock/34(H7N1)HA基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达被引量：9
- 2006年
- 经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/PFV/Restock/1/34(H7N1)1.7kbHA基因的cDNA,将其克隆到pMD18-T中并测序。在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后,亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHis,筛选到重组质粒命名为pBlueBacHisH7HA,测序正确后与线性化的杆状病毒DNA(Bac-N-BlueTMDNA)共转染Sf9昆虫细胞,挑取蓝色蚀斑,经三轮蚀斑纯化,获得数株重组杆状病毒rpBlueHisH7HA。提取重组病毒DNA,经PCR证明目的基因片段已插入到杆状病毒基因组中,血凝实验、SDS-PAGE和Westernblot实验结果表明HA基因在重组杆状病毒感染的HFive细胞中获得了表达。
- 李贺孟庆文冉多良于康震陈化兰李永强吴东来
- 关键词：血凝素基因重组杆状病毒
- 禽流感病毒A/PFV/Restock/34(H7N1)HA基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达
- 经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/PFV/Restock/1/34(H7N1)1.7kb HA基因的cDNA,将其克隆到pMD18-T中并测序。在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后,亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBac...
- 李贺孟庆文于康震陈化兰李永强吴东来
- 关键词：血凝素基因重组杆状病毒
- 文献传递
- H7亚型禽流感基因工程亚单位疫苗的研究
- 应用RT-PCR方法扩增A/PFV/Restock/34(H7N1)HA1.7kb的HA基因，然后克隆到pMD-18T载体中，筛选到阳性重组子pMDH7HA，经酶切和PCR鉴定正确后，亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueB...
- 李贺
- 关键词：禽流感血凝素蛋白亚单位疫苗免疫效力
- 文献传递
- 禽流感病毒A/PFV/Restock/34(H7N1)HA基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达
- 本文经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/PFV/Restock/1/34(H7N1)1.7kbHA基因的eDNA,将其克隆到pMD18-T中并测序.在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后,亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBa...
- 孟庆文李贺冉多良于康震陈化兰吴东来
- 关键词：血凝素基因重组杆状病毒
- 文献传递
- 表达带His-tag的禽流感病毒HA基因杆状病毒转移载体的构建及重组病毒的鉴定被引量：4
- 2005年
- 经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)1.7kb HA基因的cDNA将其克隆到pMD18-T中并测序。在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后,亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHis4.5,筛选到重组质粒命名为rpBacHisH5HA。测序正确后,在脂质体介导下,与线性化的杆状病毒DNA(Bac-N-BlueTMDNA)共转染Sf9昆虫细胞,挑取蓝色蚀斑,经3轮蚀斑纯化,获得数株重组杆状病毒rBacHisH5HA。提取重组病毒DNA经PCR证明目的基因片段已插入杆状病毒基因组。
- 李永强孟庆文冉多良于康震陈化兰李贺吴东来
- 关键词：禽流感HA基因杆状病毒
- 禽流感病毒A/PFV/Restock/34(H7N1)HA基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达
- 经 RT-PCR 扩增了禽流感病毒 A/PFV/Restock/1/34（H7N1）1．7kb HA 基因的 cDNA,将其克隆到 pMD18-T 中并测序。亚克隆到杆状病毒转移载体 pBlueBacHis,筛选到重组转...
- 李贺孟庆文于康震陈化兰李永强吴东来
- 关键词：血凝素基因重组杆状病毒
- 文献传递
- 表达H7亚型禽流感HA基因杆状病毒转移载体的构建及重组病毒的鉴定
- H5、H7亚型禽流感病毒引起的高致病性禽流感(HPAI),给世界养禽业造成严重的经济损失。目前为止,所有导致禽流感大暴发的病原均为H5和H7亚型禽流感病毒。澳大利亚和欧洲曾多次暴发H7亚型禽流感,2003年荷兰暴发HTN...
- 李贺孟庆文
- 关键词：禽流感HA基因杆状病毒
- 文献传递
- 不同农艺措施对黑麦草、地肤、遏蓝菜修复Cd污染土壤的影响
- 土壤重金属的污染防治对策已成为当今世界备受关注的话题,其中植物修复被认为是最有前景的修复手段。本文通过室内模拟试验,研究了不同农艺措施(间作玉米,添加蚯蚓、添加牛粪、添加秸秆、添加尿素等)条件下黑麦草、地肤、遏蓝菜三种C...
- 李贺
- 关键词：农田土壤重金属污染
- 文献传递
