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细粒棘球绦虫TPx基因的克隆及序列分析被引量：7: 2008年; 从自然感染病羊肝内收集细粒棘球绦虫(Eg)原头蚴,分别提取总RNA和基因组DNA。根据GenBank数据库中的细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(EgTPx)基因序列设计1对引物,以总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出EgTPx基因片段,同时以基因组DNA为模板扩增出对应的基因组序列。PCR产物经纯化后连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后,进行序列测定和生物信息学分析。结果表明,成功扩增到中国青海株细粒棘球绦虫EgTPx基因片段,其开放阅读框为582 bp,编码193个氨基酸,与已知的EgTPx基因核苷酸序列及其编码蛋白氨基酸序列的同源性均为99%,有3个碱基发生变异,分别在245,306,318位由C变为T;引起1个氨基酸变异,由Ala82变为Val82。EgTPx具有典型的2-Cys型过氧化物氧还蛋白催化性位点Cys48和Cys169,以及周围保守的FVCP和VCPA序列。EgTPx基因的开放阅读框对应的基因组序列包含2个外显子和1个69 bp的内含子。; 李航李文卉苟惠天李永光王艳华张德林贾万忠史大中付宝权; 关键词：细粒棘球绦虫基因克隆

一种非共线反铁磁Mn3Al单晶材料及其外延制备方法: 本发明涉及一种非共线反铁磁Mn3Al单晶材料及其外延制备方法，属于凝聚态物理技术领域。单晶材料由下到上依次包括单晶Si(111)基片、单晶Cu缓冲层和单晶Mn3Al薄膜，材料的...; 高存绪吕兵李航闫中杰

乡村振兴战略背景下精神扶贫策略优化研究--基于认知失调理论的视角: 《乡村振兴战略规划(2018-2022年)》把“打好精准脱贫攻坚战”作为优先任务，提出了“逐步消除精神贫困”的目标。因此在乡村振兴战略的背景下研究精神贫困以及精神扶贫问题具有很强的理论与现实意义。　　首先，研究以认知失调...; 李航; 关键词：精神贫困; 文献传递

细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶编码基因的克隆、表达及抗原性研究: 目的：构建细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(EgTPx)重组表达质粒，在原核系统进行表达和纯化，初步鉴定重组蛋白的抗原性。方法：根据GenBank数据库的细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(EgTPx)基因序列...; 李航; 关键词：细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物包虫病免疫诊断; 文献传递

刚地弓形虫GJS株微线体蛋白基因MIC3的克隆与原核表达被引量：4: 2008年; 根据Genbank中编码MIC3的已知基因序列设计并合成一对引物,应用PCR技术对刚地弓形虫GJS株微线体蛋白基因MIC3进行克隆、表达及鉴定.结果表明:克隆的MIC3基因的开放阅读框与Genbank收录的MIC3基因在核菌酸和氨基酸水平上高度一致,说明弓形虫MIC3蛋白的高度保守性;构建的原核细胞表达质粒PET-MIC3表达产物分子量为46 ku,且经Western-blot显示可被猪抗弓形虫免疫血清识别.; 苟惠天王艳华李文卉李航付宝权张德林; 关键词：刚地弓形虫克隆

细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的表达及抗原性分析被引量：5: 2008年; 目的在原核系统表达并初步鉴定细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(EgTPx)基因重组蛋白的抗原性。方法对已构建的重组质粒pMD-18T-EgTPx进行限制性酶切,获取目的基因片段后连接到表达质粒载体pET30a,构建重组表达质粒pET30a-EgTPx,转化大肠杆菌DH5α。筛选阳性克隆,经限制性酶切分析、PCR及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物,对表达产物纯化后用Western-blot方法和ELISA鉴定重组EgTPx蛋白的抗原性。结果构建的重组表达质粒pET30a-EgTPx阳性克隆经PCR与双酶切鉴定,与预期结果一致,测序鉴定无基因突变,开放阅读框正确;含有pET30a-EgTPx重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)诱导后得到了高效表达,SDS-PAGE显示表达产物分子量约为27 kDa,而且主要以包涵体形式存在;Western-blot和ELISA结果表明EgTPx重组抗原可以被棘球蚴感染羊阳性血清特异性识别。结论成功构建了pET30a-EgTPx表达质粒,EgTPx重组蛋白得到了高效表达,表达产物具有良好的抗原性。; 李航李文卉李永光苟惠天王艳华张德林贾万忠史大中付宝权; 关键词：细粒棘球绦虫基因表达抗原性

多头带绦虫TPx基因片段的克隆及原核表达被引量：4: 2009年; 从自然感染的病羊脑内采集多头蚴原头节,提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TmTPx)基因片段,PCR产物连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后测序,发现克隆到的TmTPx基因片段开放阅读框为453 bp,编码150个氨基酸。对TmTPx基因片段进行限制性酶切后连接到表达载体pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-TmTPx,转化大肠杆菌DH5α后筛选阳性克隆,经限制性酶切分析、PCR及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21,以IPTG进行诱导表达,用SDS-PAGE分析表达产物。结果显示,成功表达了大小约为43 ku的融合蛋白。对表达产物纯化后免疫家兔,采集血清用ELISA测定抗体效价,发现兔抗TmTPx重组蛋白的抗体能够与多头蚴原头节抗原发生特异性反应,说明该重组蛋白具有较好的免疫原性。; 李永光李文卉李航盖文燕王鸿盛姚菊霞王艳华张德林贾万忠Radu Blaga付宝权; 关键词：多头蚴重组蛋白免疫原性

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李航