李文杰 作品数:17 被引量:43 H指数:4 供职机构: 长春中医药大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 吉林省重大科技攻关项目 吉林省科技发展计划基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 经济管理 生物学 更多>>
基于网络药理学和实验验证的三黄膏治疗痔疮的作用机制研究 2024年 目的 基于网络药理学对三黄膏治疗痔疮的核心成分、靶点及信号通路进行预测,并借助分子对接和实验验证,对其作用机制进行初步探讨。方法 经过文献研究和数据库筛选,得到三黄膏活性成分、靶点及痔疮相关靶点,通过Cytoscape软件构建关联网络并筛选核心基因,然后对基因进行功能分析和通路富集分析。使用Autodock Vina进行分子对接验证,并通过酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组化验证三黄膏对核心靶点的调控作用。结果 收集到三黄膏治疗痔疮活性成分77个及其潜在靶点61个,KEGG显示三黄膏可调控钙信号通路、神经活性配体-受体相互作用、cGMP-PKG信号通路等,影响CGRP、NK-1R、TRPV1、VEGF、IL-6和TNF-α 6个核心靶点,分子对接显示三黄膏与靶点蛋白间有较好的亲和性,动物实验验证了三黄膏可抑制IL-6、CGRP、P物质等的表达,促进VEGF的表达。结论 三黄膏可能作用于CGRP、NK-1R等靶点,通过调控钙信号通路及PI3K-Akt等通路,发挥镇痛抗炎、活血化瘀作用来治疗痔疮。 李文杰 于倩 郑怡 杨亦柳 张馨月 李光哲 严铭铭关键词:三黄膏 痔疮 网络药理学 分子对接 牛粪中链霉菌的分离鉴定及其抗菌活性 被引量:4 2018年 目的分离鉴定牛粪中的链霉菌,观察其抗菌活性。方法采用稀释涂布法从牛粪中分离菌株,通过固定琼脂块法以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌为指示菌筛选抗菌活性较强的菌株,并对菌种进行生理生化鉴定及16S r DNA序列测定;采用纸片扩散法测定活性菌株发酵液抗菌活性,菌株发酵液抗菌活性物质进行水饱和正丁醇萃取,并通过Molish反应、双缩脲反应及茚三酮反应进行抗菌活性物质定性鉴别。结果从牛粪中分离出8株菌株,并筛选出1株抗菌活性较强菌株B5-2,鉴定为链霉菌。活性菌株发酵液对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、费氏柠檬酸杆菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌均具有较强抑菌作用。抑菌结果显示,菌株B5-2抑菌活性物质均为水溶性物质。Molish反应、双缩脲反应及茚三酮反应结果显示,菌株B5-2的抑菌活性物质均初步鉴定为糖类和蛋白质类。结论筛选分离的链霉菌对临床致病菌有较强的抑制作用。 尹逊哲 郭焱 李文杰 姜爽 于秀明 金宁一关键词:链霉菌 牛粪 抗菌活性 用于活体成像裸鼠肺癌肿瘤模型的建立 被引量:3 2018年 本研究构建1株能够稳定表达荧光素酶的人肺癌细胞,并进行生物学特性鉴定及体内成瘤情况验证。将携带有萤火虫荧光素酶基因的pGL4.50质粒转入A549细胞中,利用G418一直加压筛选出能够表达荧光素酶的阳性细胞克隆,并对阳性细胞克隆进行稳定性和体外活体成像检测。测定A549-luc细胞和A549细胞的生长曲线、迁移、侵袭及细胞周期,确定转染前后细胞生物学特性变化。为检测A549-luc细胞在体内成瘤和发光情况,建立裸鼠皮下荷瘤模型并应用小动物活体成像系统观察。结果表明,通过G418一直加压筛选和荧光素酶活性检测,筛选出2株荧光素酶活性高的克隆Clone20和Clone28,并连续传至40代,每5代检测1次荧光素酶活性,最终保留荧光素酶活性和稳定性最高的Clone28,Clone28通过体外活体成像检测显示生物发光值与细胞数目呈正相关的线性关系(R^2=0.9948)。A549-luc细胞和A549细胞具有相似的生长特性、迁移和侵袭能力以及细胞周期。成功建立了裸鼠皮下荷瘤模型,其发光强度与肿瘤体积呈正相关的线性关系(R^2=0.9715)。本研究稳定表达荧光素酶的人肺癌细胞的构建并成功建立裸鼠皮下荷瘤模型,可通过活体生物成像系统动态监测肿瘤的变化。 范园园 李铁 陈爽 李一权 荣凤君 李文杰 尹逊哲 韩继成 李善智 李敏 崔传信 李霄 金宁一关键词:A549细胞 荧光素酶 活体成像 裸鼠 重组溶瘤腺病毒对肺癌干细胞的抑制作用 被引量:2 2021年 本研究利用重组溶瘤腺病毒作用于肺癌干细胞,探讨其对肺癌干细胞的抑制作用。试验将表达Apoptin蛋白的重组溶瘤腺病毒Ad-VT作用于肺癌干细胞后,采用CCK-8法检测肺癌干细胞的存活率,AnnexinⅤ-FITC/PI和JC-1染色检测重组溶瘤腺病毒诱导肺癌干细胞凋亡的作用,Transwell迁移试验及Biocoat侵袭试验检测肺癌干细胞迁移侵袭情况。结果表明,Ad-VT能降低肺癌干细胞的存活率和细胞线粒体膜电位,诱导肺癌干细胞发生凋亡,并且能够抑制肺癌干细胞的迁移侵袭能力,提示Ad-VT对肺癌干细胞具有抑制作用。 李文杰 李文杰 王茂鹏 李一权 尚超 肖朋朋 孙文超 孙文超 金宁一关键词:肺癌干细胞 凋亡 携带Apoptin及hTERT启动子的双重特异性重组腺病毒的构建及鉴定 2018年 从质粒pMT-E1a和pIRES-neo中获得目的基因E1a和PolyA并连接入质粒pKS-hTERTp,用Xh0I和SpeI双酶切后连接入线性化的pAd—Apoptin,获得穿梭载体pAd—apoptin-PolyA—hTERTp—Ela。穿梭载体pAd—Apoptin-PolyA—hTERTp—Ela和腺病毒骨架质粒(pAd5)共转染HEK293细胞,获得重组腺病毒Ad—Apoptin-hTERTp—Ela,采用RT—PCR和Westernblot对重组腺病毒进行鉴定,MTs法检测病毒对A549细胞的抑制作用;绘制重组腺病毒生长曲线,监测重组腺病毒在细胞内的复制能力。结果显示:构建出的重组腺病毒中包含有了目的基因Apoptin和E1a,并且目的基因在细胞中正确的表达;MTs结果显示重组腺病毒对A549具有抑制作用,且抑制作用具有一定的时效及剂效关系;重组腺病毒具有在A549细胞中正常复制的能力。结果表明:成功的构建出了具有特异性杀伤和特异性复制能力的双重特异性重组腺病毒Ad—Apoptin-hTERTp—E1a。 艾迪 李文杰 李一权 陈爽 陈爽 崔英丽 朱羿龙 崔传信 李敏 崔传信 马艺珍 李霄 金宁一关键词:重组腺病毒 凋亡素 携鸡贫血蛋白VP3基因重组腺病毒对癌细胞的体内外作用研究 引言鸡传染性再生障碍性贫血是由鸡贫血病毒(CIA)(1)引起。此圆环病毒基因编码三种蛋白,分别为VP1、VP2、VP3,其中VP3(apoptin)蛋白可以特异性的引起转化的或肿瘤细胞凋亡,而对正常的二倍体细胞无明显影响... 陈爽 兰添 李一权 范园园 李文杰 李霄溶瘤腺病毒ATV联合顺铂协同抑制A 549细胞的研究 被引量:3 2017年 目的探讨双特异性溶瘤腺病毒ATV与化疗药物顺铂联用对人肺癌细胞A 549治疗的增效减毒作用。方法将构建的溶瘤腺病毒ATV感染A 549细胞后进行Annexin V检测,分析ATV对肿瘤细胞的抑制方式;单用ATV、顺铂以及两者联合作用于人肺癌A 549细胞,采用MTS法检测细胞体外增殖情况,采用划痕试验、Transwell迁移试验和Transwell侵袭试验检测细胞的迁移侵袭情况;构建A 549皮下移植瘤裸鼠模型,单独注射重组腺病毒、顺铂以及重组腺病毒和顺铂联合使用,观察监测肿瘤生长情况,评价溶瘤腺病毒联合顺铂对肿瘤的体内抑制作用。结果双特异性重组腺病毒ATV主要通过诱导A 549细胞凋亡达到对细胞的杀伤;ATV联合顺铂体外杀伤A 549细胞具有一定的剂效和时效关系,且其抑制作用显著强于ATV及顺铂单独使用;ATV联合顺铂作用下,可使A 549细胞迁移侵袭能力降低,且能显著抑制小鼠皮下移植瘤生长,延长模型小鼠生存期。结论 ATV可诱导肿瘤细胞凋亡,ATV与化疗药物顺铂联用可增强对A549细胞生长及迁移侵袭能力的抑制作用,即具有抑制肺癌细胞A 549的增效减毒作用。 李文杰 陈智飞 郭丽娇 李霄 姜爽 李一权 陈爽 李敏 崔传信 范园园 艾迪 郭焱 金宁一关键词:溶瘤腺病毒 顺铂 增效减毒 中药灵芝多糖调控细胞毒性T细胞抗肿瘤机制研究 被引量:14 2013年 目的通过研究中药灵芝多糖对S180荷瘤小鼠细胞毒性T细胞活性的影响,探讨中药灵芝多糖抗肿瘤机制。方法小鼠胃饲灵芝多糖,流式细胞术检测荷瘤小鼠T细胞亚群变化,3H-TdR掺入法检测荷瘤小鼠CTL细胞毒活性。结果胃饲灵芝多糖使荷瘤小鼠的CD8+T淋巴细胞数量、CTL细胞毒活性均明显提高(P<0.01)。结论中药灵芝多糖可增强荷瘤小鼠细胞毒性T细胞免疫活性,从而达到抗肿瘤效果。 郭焱 崔健丽 李超英 李春莉 吴泽民 张艳芳 李文杰关键词:细胞毒性T细胞 抗肿瘤 双特异性溶瘤腺病毒ATV对肺癌的抑制作用研究 引言近年来,肺癌的发病率和死亡率在全球范围内呈明显上升的趋势,已经成为全球死亡率居首的恶性肿瘤。目前,传统的肺癌治疗方法,以手术、放疗和化疗等为主,但放化疗不仅杀伤癌细胞,同时也对正常细胞产生毒性作用。随着分子生物学、细... 范园园 陈爽 李一权 陈智飞 李文杰 胡宁宁 李霄 金宁一品牌动漫IP形象的功能及设计路径探讨 被引量:4 2021年 随着互联网、多媒体深入发展,动漫IP形象在品牌营销乃至我国整个文化产业中备受关注。三只松鼠、天猫、江小白等知名品牌IP形象的运营成功,品牌动漫IP形象设计成功与否逐渐成为行业竞争焦点。本文以吉林省农产品品牌建设为例,从动漫IP形象的叙事功能与价值功能研究、动漫IP形象对农产品品牌推广的重要意义研究出发,从四个维度,即把好产品质量关、价值定位、地域文化融合、营销空间规划,对吉林农产品品牌动漫IP形象设计路径提出合理化的建议。 李文杰