彭梅芳
- 作品数:9 被引量:21H指数:3
- 供职机构:西南大学更多>>
- 发文基金:重庆市自然科学基金国家自然科学基金重庆市良种创新工程专项资助项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 同一压蔓处多品系/种甘薯结薯的空中甘薯培育方法
- 本发明提供一种同一压蔓处多品系/种甘薯结薯的空中甘薯培育方法。方法依次实施嫁接、压蔓、管护操作;嫁接时采用组合嫁接并保证在砧木茎上各接穗的嫁接接头位置尽量靠近,组合嫁接是将先将任一品系/种A结薯甘薯的接穗嫁接至砧木上形成...
- 李明彭梅芳傅玉凡张聪冯俊彦蒲志刚王璐璐黄雨
- 文献传递
- PMT和H6H双基因共转化颠茄发根的植株再生被引量:2
- 2007年
- 目的获得1,4-丁二胺-氮-甲基转移酶(putrescine N-methyltransferase,PMT)和莨菪碱-6β-羟化酶(hyoscyamine6β-hydroxylase,H6H)双基因共转化的颠茄发根的再生植株。方法选用PMT和H6H双基因共转化的东莨菪碱高产发根单克隆T4,用1/2MS+1.0mg/LNAA固体培养基培养1、5、10d后,转入1/2MS固体培养基中诱导不定芽和不定根,培养条件均为(25±1)℃,55μmol/(m2.s),12h/d。采用PCR扩增检测再生植株的PMT、H6H和NPT-。结果发根在1/2MS+1.0mg/LNAA固体培养基上培养5d后,转入1/2MS固体培养基上培养,60%的外植体能自发长出不定芽,1/2MS+0.1mg/LIBA固体培养基中诱导生根较1/2MS固体培养基强,15d产生的条数平均为9条,形成了完整的再生植株。PCR检测表明所有再生植株均为颠茄的转基因再生植株。结论建立了颠茄转化发根再生体系,为实现颠茄托品烷类生物碱的代谢工程及开展分子育种奠定了基础。
- 杨春贤周启贵陈敏彭梅芳张婷婷张磊廖志华
- 关键词:发根
- 青蒿素代谢途径中两个关键酶基因的克隆及黄花蒿遗传转化研究
- 青蒿素是从黄花蒿(ArtemisiaannuaL.)中提取的一种含有过氧桥基团结构的倍半萜内酯,是治疗疟疾的特效药物。但天然药源植物黄花蒿中青蒿素含量较低(0.01%~0.6%,DW),大大限制了商业化的生产,青蒿素的产...
- 彭梅芳
- 关键词:青蒿素倍半萜内酯代谢途径酶基因克隆黄花蒿生物信息学
- 文献传递
- 基于甘薯毛状根的外源多基因表达系统的建立
- 2008年
- 用携带植物高效表达载体pCAMBIA1304+的"解除武装"的重组C58C1工程菌转化甘薯新品种"渝苏303"无菌苗的真叶,50个外植体中的36个长出了毛状根,诱导率达72%.PCR检测证实发根型质粒pRiA4和表达型质粒pCAMBIA1304+均能整合到甘薯毛状根基因组内,共转化率达36%.建立了基于发根农杆菌介导的甘薯毛状根的高效外源基因表达系统,为利用甘薯毛状根快速验证基因功能和将多个外源基因导入甘薯,实现其代谢工程及开展分子育种奠定了基础.
- 黄元射彭梅芳李明梁媛媛冷晋川张启堂
- 关键词:甘薯外源基因毛状根代谢工程
- 银杏IspF基因的克隆与功能分析被引量:4
- 2008年
- 采用RACE技术,从银杏中获得MEP途径中的第5个酶2-C-甲基-D-赤藓醇-2,4-环焦磷酸合成酶(IspF)基因的全长cDNA,命名为GbIspF(GenBank登录号:EF062579)。该基因cDNA全长为897bp,包含720bp的开放阅读框,编码239个氨基酸残基的蛋白,在GbIspF的N-端有一个长为59个氨基酸残基的质体转运肽;序列多重比对表明GbIspF与其他植物IspF同源。利用半定量RT-PCR对GbIspF进行组织表达谱分析,结果表明GbIspF在银杏根、茎、叶、果中均有表达,但表达量差异较大,在叶中表达量最高,在根中表达量最低。功能互补分析表明GbIspF能推动工程菌XL1-Blue+pTrcGbIspF+pAC-BETA超量表达β-胡萝卜素,在颜色互补平板上呈现β-胡萝卜素特有的橘黄色,证实GbIspF具有典型的IspF基因功能。
- 彭梅芳阳义健杨春贤陈敏廖志华
- 关键词:银杏基因克隆生物信息学分析
- 黄花蒿HDS基因的克隆与功能分析被引量:9
- 2012年
- 目的克隆获得黄花蒿MEP途径中必需关键酶——羟甲基丁烯基-4-磷酸合成酶基因(HDS),并进行生物信息学分析和功能互补分析研究。方法对已知的其他种子植物HDS基因的核苷酸序列进行多重序列比对,选取保守区域设计简并引物,利用同源扩增和cDNA末端快速扩增技术从黄花蒿中获得目的基因;利用BLAST进行序列比对,ORF Finder寻找开放阅读框,并用MEGA3.0中的临位相联法构建进化树。结果得到1条长2 324 bp的HDS cDNA序列,其ORF框长1 854 bp,编码617个氨基酸残基的蛋白;生物信息学分析显示,黄花蒿HDS基因AaHDS与其他种子植物来源的HDS高度同源;功能互补分析表明,AaHDS能互补突变菌株Escherichia coli MG1655 ara<>HDS中缺失的HDS功能,使突变菌株恢复生长,证明AaHDS具有典型的HDS基因功能。结论首次克隆获得黄花蒿HDS基因,为青蒿素的代谢工程研究提供相应的基础。
- 张祖荣廖志华彭梅芳
- 关键词:黄花蒿基因克隆生物信息学分析青蒿素
- 颠茄发根培养系统的建立(英文)被引量:6
- 2006年
- 用种子萌发获得颠茄无菌苗,用发根农杆菌A4侵染颠茄无菌苗真叶,所有感染了的叶片都从伤口处产生发根.在无激素培养基中,发根表现出高频侧向分支、生长迅速、失去向地性的典型形态特征.PCR检测表明rolB、rolC确实整合到颠茄发根基因组中,用MS液体培养基发酵培养35 d,3个发根单克隆中发根生物量最大增长率达7.5倍,T6单克隆莨菪碱含量最高(5.61 mg/g),与种植在田间的颠茄植株的根相比,提高7倍;T2单克隆东莨菪碱含量最高,提高9倍多(2.35 mg/ g).本研究揭示了rol基因足以诱导获得生长迅速和次生代谢产物积累的发根.表明颠茄转基因发根的发酵培养不失为生产托品烷类生物碱的一条好途径.
- 杨春贤阳义健彭梅芳陈敏兰小中廖志华
- 关键词:发根农杆菌发根莨菪碱
- 同一压蔓处多品系/种甘薯结薯的空中甘薯培育方法
- 本发明提供一种同一压蔓处多品系/种甘薯结薯的空中甘薯培育方法。方法依次实施嫁接、压蔓、管护操作;嫁接时采用组合嫁接并保证在砧木茎上各接穗的嫁接接头位置尽量靠近,组合嫁接是将先将任一品系/种A结薯甘薯的接穗嫁接至砧木上形成...
- 李明彭梅芳傅玉凡张聪冯俊彦蒲志刚王璐璐黄雨
- 萝芙木萜类吲哚生物碱合成途径中色氨酸脱羧酶基因的克隆与功能分析
- 萝芙木(Rauvolfia verticillata)是夹竹桃科(Apocynaceae)萝芙木属的一种重要的药用植物,为中国所特有。它的根中含有利血平(reserpine)、阿吗碱(ajmalicine)和利血胺(re...
- 彭梅芳张婷婷谌容任肃霞陈敏廖志华
- 关键词:基因克隆重组蛋白表达HPLC
- 文献传递