张玉明
- 作品数：10 被引量：30H指数：3
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- p38介导β-羟丁酸对原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响被引量：1
- 2013年
- 本试验旨在探讨β-羟丁酸(BHBA)对体外原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响以及p38MAPK在其中的调控作用。选择培养72h的肝细胞,添加不同浓度的BHBA(0、0.6、1.2、2.4mmol/L),培养9h,每个浓度3个重复。另外选取细胞,p38MAPK抑制剂SB203580(10μmol/L)预处理1h后,添加BHBA,使其终浓度为2.4mmol/L;PI/Annexin V-FITC双染,运用荧光显微镜观察肝细胞凋亡情况;ELISA法检测p38的活性;实时荧光定量PCR方法检测p38、Caspase-3、Caspase-9、bcl-2基因的mRNA表达水平。结果表明,与对照组相比,1.2和2.4mmol/L BHBA组的肝细胞凋亡明显增加;p38酶活性明显升高;p38、caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平均显著增加(P<0.01),bcl-2基因mRNA表达水平显著降低(P<0.05);添加p38抑制剂后,caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平显著降低(P<0.01),bcl-2基因mRNA表达水平显著增加(P<0.05)。高浓度的BHBA可以诱导体外原代培养犊牛肝细胞凋亡,p38在BHBA诱导的细胞凋亡中发挥重要作用。
- 宋玉祥李玉李心慰史晓霞丁红研韩盈盈李娜张仁和张玉明王婷婷殷立恒郭立辉李小兵王哲刘国文
- 关键词：P38凋亡基因肝细胞犊牛
- NEFA对体外培养奶牛中性粒细胞TLR2/4介导的炎症信号通路的影响被引量：2
- 2015年
- 分离培养奶牛中性粒细胞(PMN),添加不同浓度的非酯化脂肪酸(NFEA),作用浓度分别为0.125、0.25、0.5、1和2mmol/L。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测炎性通路相关分子基因表达水平,采用ELISA检测炎性因子含量。结果显示,与对照组相比,Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)和核转录因子NF-κBp65的mRNA表达水平逐渐增加,且0.5、1和2mmol/L NEFA处理组显著高于对照组(P<0.05,P<0.01);炎性细胞因子白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量也随着NEFA作用浓度的增加而增加,并且0.5、1和2mmol/L NEFA处理组显著高于对照组(P<0.05,P<0.01)。这些结果表明高浓度NEFA(≥0.5mmol/L)可以激活中性粒细胞TLR2/4介导的炎症信号通路,显著增加IL-1β、IL-6和TNF-α的合成和释放,造成中性粒细胞的炎性损伤,进而影响奶牛免疫机能。
- 张玉明雷林蒋兴华杜希良高文文邓清华王哲李心慰刘国文
- 关键词：中性粒细胞炎性因子
- 催乳素对奶牛脂肪细胞脂代谢关键基因的作用被引量：2
- 2015年
- 催乳素(prolactin,PRL)是启动和维持泌乳的重要激素,在泌乳期间能调节机体将营养物质和能量优先流向乳腺,用于乳脂和乳蛋白的合成。本试验采用体外分离培养奶牛前脂肪细胞,诱导分化为成熟脂肪细胞,加入PRL探讨其对脂肪细胞脂代谢相关基因的作用。结果显示,奶牛白色脂肪细胞存在催乳素受体(prolactin receptor,PRLR),且在PRL质量浓度为75μg/L,作用时间为9h时,PRLR表达量达到最高,此时调节脂合成的核转录因子SREBPE-1c及下游控制脂合成的基因FAS和LPL均显著降低,75μg/L组与对照组相比差异极显著(P<0.01);控制脂分解的基因HSL显著升高,75μg/L组与对照组相比差异显著(P<0.05);细胞培养上清液中的甘油含量显著升高,75μg/L组与对照组相比差异显著(P<0.05)。结果表明,PRL能直接作用于奶牛白色脂肪细胞,降低脂合成作用并促进脂分解作用。
- 殷立恒杜希良雷林邓清华张玉明王婷婷郭立辉张仁和李心慰刘国文
- 关键词：催乳素奶牛脂肪细胞
- 脂联素对酮病奶牛中性粒细胞自噬相关基因mRNA表达的影响被引量：4
- 2017年
- 通过模拟向高BHBA的中性粒细胞培养液中添加不同质量浓度的脂联素(ADPN),运用荧光定量PCR技术,分别检测中性粒细胞自噬相关基因mRNA的表达水平。结果显示:添加高BHBA(4.8mol/L)的中性粒细胞培养6h后,与对照组相比,自噬相关基因LC3B、Beclin、ULK1的mRNA表达水平显著升高(P<0.01),SQSTM1(p62)、mTOR的mRNA表达水平显著下降(P<0.01);添加不同质量浓度的ADPN(25,50,100μg/L)后,相对于高BHBA组,中性粒细胞自噬相关基因LC3B、Beclin、ULK1的mRNA表达水平显著下调,且在ADPN 50μg/L时,具有极显著差异性(P<0.01);此外SQSTM1、mTOR的mRNA表达水平显著升高。结果表明:BHBA可增加中性粒细胞自噬相关基因的表达,ADPN可抑制高BHBA引起的中性粒细胞细胞程序性死亡,进一步说明ADPN对调控酮病奶牛中性粒细胞免疫抑制具有重要的价值意义。
- 赵志波彭志成张玉明崔媛旭张强张昆坡李心慰李小兵刘国文王哲
- 关键词：自噬相关基因
- 非酯化脂肪酸对体外培养犊牛原代肝细胞中炎性因子表达及其活性的影响被引量：7
- 2014年
- 在建立犊牛原代肝细胞体外培养模型的基础上,通过培养液中添加不同浓度的非酯化脂肪酸(Nonesterified fatty acids,NEFAs),运用实时荧光定量PCR和ELISA方法,测定NEFAs对肝细胞中炎性因子TNFα、IL-6和IL-1β的mRNA表达及其活性的影响。结果显示,NEFAs作用肝细胞9h后,与对照组相比,高浓度NEFAs(1.8mmol/L)组肝细胞中TNFα、IL-1β的mRNA表达水平显著增加(P<0.05),IL-6的mRNA表达水平在2.4mmol/L时极显著增加(P<0.01),低浓度NEFAs(0.6、1.2mmol/L)组肝细胞中TNFα、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平无显著差异(P>0.05);并且TNFα、IL-1β的活性在NEFAs浓度达到1.8、2.4mmol/L显著高于对照组(P<0.01),且呈剂量依赖性作用,IL-6的活性在在NEFAs浓度达到1.8mmol/L显著高于对照组(P<0.01),在2.4mmol/L也高于对照组,但差异不显著。结果表明,高浓度NEFAs在一定程度上能引起或加剧奶牛肝细胞炎性反应,可能是导致产后奶牛肝功能炎性损伤主要因素。
- 史晓霞王建国李玉宋玉祥丁红研韩盈盈张玉明殷立恒王婷婷张仁和郭立辉邓清华李心慰李小兵刘国文王哲
- 关键词：肝细胞炎性因子
- NEFAs和BHBA对奶牛中性粒细胞TLR2/4-NF-κB信号通路的影响
- 奶牛酮病以血液中高浓度的非酯化脂肪酸（non-esterified fatty acids，NEFAs）和β-羟丁酸（β-hydroxybutyrate，BHBA）为临床病理学特征。高NEFA和BHBA血症参与奶牛中性粒...
- 张玉明
- 关键词：酮病中性粒细胞炎性损伤NF-ΚB信号通路
- 文献传递
- 低pH环境对体外原代培养犊牛瘤胃上皮细胞炎性通路的影响被引量：1
- 2015年
- 本试验旨在研究低p H环境对瘤胃上皮细胞(REC)炎性因子表达的影响。建立犊牛原代REC体外培养模型,在不同p H(5.5和7.2)的培养环境下,采用VFA和NF-κB p65抑制剂PDTC处理。运用Western blot和RT-PCR技术,检测NF-κB p65和IκB蛋白的表达与细胞炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α和NF-κB p65 m RNA表达。结果显示,在低p H环境(p H 5.5)处理组,NF-κB p65和IκB蛋白的表达显著升高;IL-1β、IL-6、TNF-α和NF-κB p65的m RNA表达水平均显著或极显著高于对照组(P<0.05/P<0.01)。组内差异不显著(P>0.05)。
- 郭立辉王婷婷赵晨旭王亚洲黄伟坤邓清华张玉明殷立恒张仁和李心慰李小兵刘国文王哲
- 关键词：低PH
- 组胺对体外培养犊牛原代瘤胃上皮细胞炎性因子的影响被引量：3
- 2016年
- 体外培养奶牛瘤胃上皮细胞，在不同pH的培养液（5．5和7．2）中添加不同浓度的组胺（0、0．5、2．5、12．5和62．5μmol／L）。运用实时荧光定量PCR和ELISA方法，检测组胺对瘤胃上皮细胞炎性因子白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）mRNA表达及其含量的影响。结果显示，PH5．5的培养液组，与对照组相比，TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平均显著或极显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01）；TNF-α、IL-6和IL-1β的含量在2．5、12．5和62．5μmol／L组胺处理组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01）。pH7．2的培养液组，TNF—α和IL-6mRNA表达水平在2．5和12．5μmol／L组胺处理组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01），IL-1βmRNA表达水平在2．5、12．5和到62．5μmol／L组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01）；而TNF-α含量在62．5μmol／L组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01），IL-6在2．5、12．5和62．5μmol／L组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01），IL-1β在12．5和62．5μmol／L组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01）。在组胺各浓度组，TNF-α、IL-6和IL-1β1TIRNA表达水平在pH5．5条件下均显著高于pH7．2，但含量差异不显著。结果表明，低pH条件下，高浓度组胺增加奶牛瘤胃上皮细胞炎性反应，促进奶牛亚急性瘤胃酸中毒的发展。
- 王婷婷郭立辉赵晨旭王亚洲邓清华张玉明殷立恒张仁和李心慰李小兵刘国文王哲
- 关键词：组胺炎性因子
- 小尾寒羊皱胃左方变位动物模型皱胃超声影像学特征
- 2015年
- 比较分析了手术致小尾寒羊皱胃左方变位动物模型造模前后皱胃B超声像图的变化情况,旨在为B超诊断反刍动物皱胃左方变位提供依据。将6只体型相近的成年雌性小尾寒羊,随机分为Ⅰ、Ⅱ组,每组3只羊,用配备5.0MHz线型探头的B超仪对2组羊皱胃进行探查,记录皱胃可探查区域及声像图特征,随后通过手术对Ⅰ组羊进行轻度皱胃左方移位,Ⅱ组羊进行重度皱胃左方移位,术后每2d对实验羊的皱胃位置进行1次B超探测,持续15d,记录各次探查结果。结果显示,手术前各实验羊均可在剑状突后腹中线及近腹中线区域探测到皱胃,声像图中皱胃壁较难分辨,但皱胃内可明显看到其内容物产生的不均一回声点或回声块,不时可看到产弱回声的皱胃皱襞;术后,2组羊在皱胃固定点附近区域都可探查到皱胃嵌于腹壁与瘤胃之间的声像图,皱胃可与周围器官明显区别开,Ⅱ组羊还可在腹腔左侧壁探查到幽门;15d的观察期内除Ⅱ组中一羊皱胃自发复位外,2组羊皱胃位置在固定点附近无太大变化,Ⅰ组羊皱胃声像图没变化,Ⅱ组羊嵌留于瘤胃与腹壁之间的皱胃厚度增加。结果表明,在B超探查中小尾寒羊皱胃声像图特征明显,在皱胃变位后能与相邻组织器官区别,B超仪具有诊断反刍动物皱胃变位疾病的潜力。
- 张仁和杨威张玉明郭立辉苑学田宇张敏李心慰刘国文王哲李小兵
- 关键词：皱胃左方变位动物模型声像图
- β-羟丁酸通过GPR109A-mTOR信号通路调节奶牛NETs的机制
- 嗜中性粒细胞抵抗入侵微生物途径之一是通过嗜中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)介导完成的。NETs是新近发现的一种先天性免疫细胞胞外防御机制,存在于大多数免疫细胞...
- 张玉明
- 关键词：中性粒细胞ROS
- 文献传递
