尚毅 作品数:7 被引量:15 H指数:2 供职机构: 华南农业大学兽医学院 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 广东省兽医公共卫生公共实验室开放基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
基因VIb亚型半番鸭源新城疫病毒基因组测序及分析 2012年 根据GenBank上发布的新城疫病毒基因组序列,设计了9对引物,对从福建福州地区发病半番鸭场分离的新城疫病毒FJ-SMD-03株进行了基因组cDNA扩增测序和分析.结果表明:FJ-SMD-03的基因组序列由15 192 nt组成,在NP基因非编码区比Lasota株多了6个核苷酸ACACTC;基因组由6个ORF组成,即3'-NP-P-M-F-HN-L-5'序列.BLAST结果显示:FJ-SMD-03基因组核苷酸与1.3、carrier-pigeon/Guangdong/2008、pigeon/Italy/1166/00、AV324/96和dove/Italy/2736/00相似性最高,达94.9%~98.5%;与疫苗株Lasota、Mukteswar和B1的相似性最低,为80.7%~83.3%;与我国标准强毒株F48E8及2002年从福建番鸭中分离到的基因VIId亚型强毒株Muscovy duck/China(Fujian)/FP1/02相似性较低,分别为82.5%和87.1%.F蛋白裂解位点的氨基酸序列为112 R-R-Q-K-R-F117,具有强毒株序列特征,进化树分析发现,FJ-SMD-03属于ClassⅡ类基因VIb亚型,证明鸭群中有VIb亚型NDV强毒株;FJ-SMD-03株NDV与1.3、carrier-pigeon/Guangdong/2008和pigeon/Italy/1166/00亲缘关系较近,与carrier-pi-geon/Guangdong/2008形成一个小的进化分支,推测FJ-SMD-03株与carrier-pigeon/Guangdong/2008和pigeon/Italy/1166/00株来源于共同的祖代毒株,可能与鸽携带的病毒有关. 黄秋芳 孙敏华 陈少莺 吕殿红 董嘉文 尚毅 吴玄光 胡奇林关键词:新城疫病毒 基因组 鹅细小病毒LAMP快速检测方法的建立 被引量:9 2011年 根据GenBank中登录的鹅细小病毒(GPV)VP3基因序列,利用PrimerExplorer V3软件在序列保守区域设计1套特异识别VP3基因序列中6个不同区段的环介导恒等温扩增(LAMP)引物,并以此套引物建立一种基于LAMP技术的GPV检测方法.结果表明,该方法灵敏度是普通PCR方法的100倍,只能特异性扩增GPVDNA,其引物对于其他常见禽DNA病毒均无特异性扩增.在反应体系中加入SYBR GREEN I染料后,可通过肉眼观察有无荧光直接判定结果.该方法特异性强、灵敏度高,重复性好,为快速检测鹅细小病毒提供了新方法和新思路. 尚毅 董嘉文 孙敏华 黄秋芳 吴玄光 胡奇林关键词:鹅细小病毒 环介导等温扩增 鹅细小病毒LAMP快速检测方法的建立 根据GenBank中登录的鹅细小病毒(GPV)VP3基因序列,利用PrimerExplorer V3软件在序列保守区域设计1套特异识别VP3基因序列中6个不同区段的环介导恒等温扩增(LAMP)引物,并以此套引物建立一种基... 尚毅 董嘉文 孙敏华 黄秋芳 吴玄光 胡奇林关键词:鹅细小病毒 环介导等温扩增 文献传递 犬结膜炎的诊断与治疗 2009年 1结膜炎的诊断1.1临床诊断眼分泌物增多和结膜充血是结膜炎的最基本的症状。不同性质结膜炎的共同症状有患眼异物感、灼热感、痒感及眼睑热涨感,一般对视力无损害。机械性或化学性所致的结膜炎,可通过病史及临床检查诊断;细菌性结膜炎最初多为一眼发病,数天后可波及另一眼,有浆液黏液性或脓性分泌物;病毒性结膜炎常见犬瘟热病毒感染,一般双眼同时发病,并伴有鼻炎和气管、支气管炎; 尚毅 廖新权 吴玄光关键词:脓性分泌物 结膜充血 继发细菌感染 结膜囊 黏液性 分泌物涂片 禽呼肠孤病毒RT-LAMP快速检测方法的建立 被引量:6 2011年 根据GenBank中登录的禽呼肠孤病毒(Aviem reovirus,ARV)S1基因序列设计了特异对应靶序列中的6个基因区段的4条引物,以此建立了一种快速、准确的ARV逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法,并对此方法的反应条件进行了优化。结果表明,该方法能够特异地扩增ARV,而对其他常见的禽类病毒均无扩增作用,特异性强、重复性好;检测ARV的灵敏度为4ELD50,是RT-PCR方法的10倍;在反应产物中添加SYBR GREENⅠ染料后,可通过肉眼观察有无荧光直接判定结果。 董嘉文 孙敏华 尚毅 胡奇林关键词:禽呼肠孤病毒 鹅细小病毒LAMP快速检测方法的建立 GenBank中登录的鹅细小病毒(GPV)VP3基因序列,利用PrimerExplorer V3软件在序列保守区域设计1套特异识别VP3基因序列中6个不同区段的环介导恒等温扩增(LAMP)引物,并以此套引物建立一种基于L... 尚毅 董嘉文 孙敏华 黄秋芳 吴玄光 胡奇林鹅细小病毒的分离鉴定及LAMP快速检测方法的建立 鹅细小病毒病(Goose parvovirus infection)又称小鹅瘟(Gosling plague),是由鹅细小病毒(GPV)引起的雏鹅及雏番鸭的高致病性、高死亡率的烈性传染病,以消化道,尤其是小肠部位典型性纤... 尚毅关键词:鹅细小病毒 环介导等温扩增