孟祥升
- 作品数：6 被引量：30H指数：3
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划国际科技合作与交流专项项目引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 抗牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的制备及双抗夹心ELISA检测方法的建立被引量：12
- 2012年
- 为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)双抗夹心ELISA检测方法,本研究将BVDV 890病毒株(BVDV-2)浓缩并纯化后免疫BALB/c小鼠,经常规技术进行细胞融合并筛选得到一株稳定分泌IgG的杂交瘤细胞株,命名为3F9。以BVDV单克隆抗体(MAb)IgM为捕获抗体,生物素标记的3F9为检测抗体,初步建立BVDV特异的双抗体夹心ELISA检测方法(BAS-ELISA)。采用建立的BAS-ELISA方法检测35份临床病牛血清样品,检出阳性样本13份;与RT-PCR的符合率达到94.29%;表明本研究所建立的BAS-ELISA方法可用于BVDV感染的临床诊断,为BVDV的免疫学研究奠定了基础。
- 蒋颖林燕清陶洁孟祥升段小丽王娟王银张信军王建业朱国强
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E2蛋白双抗体夹心ELISA
- 大肠杆菌0157:H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制
- 用E.coli O157：H7菌体免疫BALB/c鼠,，制备免疫脾细胞，与SP2/0骨髓瘤细胞融合，获得了16株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。其中，1D3、2E7和2H7三株为0157：H7特异单克隆抗体，Ig...
- 夏兴霞王永山孟祥升张雪寒何孔旺
- 关键词：大肠杆菌单克隆抗体胶体金试纸条
- 大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制被引量：9
- 2010年
- 用E.coliO157∶H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体（mAb）的杂交瘤细胞株。其中,1D3、2E7和2H7三株为O157∶H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106。用纯化的单克隆抗体2E7标记胶体金,制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜（NC）上;组装成双抗夹心法O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条。用该试纸条可特异检测O157∶H7,敏感度为106CFU/mL,与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的O157∶H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当,试纸条简便快速,在1~5 min内可得出检测结果,便于O157∶H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查。
- 夏兴霞王永山孟祥升朱国强张雪寒何孔旺
- 关键词：单克隆抗体胶体金人兽共患病
- 牛病毒性腹泻病毒基因2型代表株全基因组序列分析被引量：5
- 2011年
- 为了解我国牛病毒性腹泻(BVD)的分子流行病学情况,本研究对分离的3株牛病毒性腹泻病毒基因2型(BVDV-2)代表株全基因组进行序列分析,应用RT-PCR法分段扩增3株BVDV-2(XJ-04、SD-09和QH-09)的全基因组序列,共分为18个片段:A～Q以及5'-UTR和3'-UTR的部分序列。除5'-UTR和3'-UTR部分序列外,A～Q基因片段末端相互重叠。经序列拼接获得3株全基因组序列,全长均为12 284 bp。将测序结果与GenBank登录的瘟病毒科代表毒株序列、自我裂解酶(Npro)、结构蛋白(C、Erns、E1、E2)以及标准株BVDV-1 NADL和BVDV-2 890进行核苷酸以及氨基酸序列同源性分析。结果表明:XJ-04、SD-09和QH-09的全基因组序列同源性高于99.6%,3株BVDV-2分离株与890和NewYork93株亲缘关系最近,属于BVDV-2a亚型。在致细胞病变型的XJ-04、SD-09、QH-09株的NS2/3基因上无外源基因的插入。本研究分离的BVDV-2株为国内首次鉴定国内分离株全基因组序列,为我国BVD的分子流行病调查提供依据。
- 林燕清朱礼倩陶洁孙宏进孟祥升王建业朱国强
- 关键词：基因组测序系统进化分析
- 大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条在感染牛和小鼠排菌检测中的应用被引量：3
- 2012年
- 为了检验大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条在感染动物排菌中的应用效果,将牛和小鼠采用灌胃攻毒方式试验感染大肠杆菌O157∶H7,用大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条、细菌鉴别培养基培养计数以及PCR 3种方法检测感染动物粪便中O157∶H7的排菌量和持续时间。牛在感染大肠杆菌O157∶H7后的第2天开始从粪便排菌,第4天达到峰值,排菌时间可持续28d;小鼠在感染O157∶H7后的第4小时开始从粪便排菌,第6小时达到峰值,排菌时间可持续15d。大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条、细菌鉴别培养基培养计数以及PCR 3种方法的检测结果一致,但试纸条更简便、快捷、直观,1～5min可得出检测结果,便于现场检测样品中O157∶H7的快速筛查。
- 夏兴霞孟祥升王永山董晨红赵攀登张雪寒何孔旺
- 关键词：粪便
- 大肠杆菌O157:H7实验感染动物排菌动态检测被引量：3
- 2012年
- 目的检验大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析检测试纸条在感染动物排菌中的应用效果。方法将牛和小鼠采用灌胃攻毒方式实验感染大肠杆菌O157:H7,用大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析检测试纸条与细菌鉴别培养基分别培养检测感染动物粪便中的O157:H7的排菌量和持续时间。结果牛在感染大肠杆菌O157:H7后的第2天开始从粪便排菌,第4～6天达到峰值,排菌时间可持续28 d;小鼠在感染O157:H7后的第4小时开始从粪便排菌,第6小时达到峰值,排菌时间可持续15 d。结论大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析检测试纸条与细菌鉴别培养基培养计数的检测结果一致,试纸条更简便、快捷、直观,在1～5 min内可得出检测结果。
- 孙茂华孟祥升夏兴霞赵攀登张雪寒何孔旺王永山
- 关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7粪便
