周楠
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 嘌呤霉素敏感的氨肽酶对Tau^(P301L)诱导细胞凋亡的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨嘌呤霉素敏感的氨肽酶(PSA)对TauP301L诱导的细胞凋亡的影响。方法将TauP301L表达载体转入SH-SY5Y和PC12细胞24、48和72 h后,采用MTT法检测两种细胞增殖率的变化,Hoechst33342染色检测细胞核形态学的变化,确定TauP301L的最佳作用时间;在PC12细胞中转染TauP301L和PSA载体,在SH-SY5Y细胞中转染TauP301L和PSA-siRNA载体,Western blotting法检测Caspase-3的表达,酶标仪检测Caspase-3的活性变化,流式细胞法检测细胞凋亡率。结果 TauP301L诱导细胞凋亡具有时间依赖性。TauP301L转染细胞48 h后,PC12细胞、SH-SY5Y细胞存活率明显下降(P<0.01),细胞核出现凋亡的形态学变化;流式检测细胞凋亡率增加(P<0.01)。在PC12细胞中,与TauP301L组相比,PSA和TauP301L共同作用组Caspase-3的活性形式表达量及酶活性明显下降(P<0.01),细胞凋亡率显著下降(P<0.01);而在SH-SY5Y细胞中,与TauP301L组相比,TauP301L和PSA-siRNA共同作用组的细胞凋亡率显著升高(P<0.05),Caspase-3的活性形式表达量和活性均升高(P<0.01)。结论 TauP301L能够诱导细胞凋亡,而PSA能够下调TauP301L所诱导的这种凋亡,对神经细胞起到保护作用。
- 王苗苗刁雪芹庄云龙许刚周楠贾阳磊李萌萌任桂杰
- 关键词：神经细胞细胞凋亡CASPASE-3
- 嘌呤霉素敏感的氨肽酶对β-淀粉样蛋白诱导的细胞凋亡的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨嘌呤霉素敏感的氨肽酶（PSA）对p一淀粉样蛋白（A1325-35）诱导的SH—SY5Y细胞、PCI2细胞凋亡的影响。方法采用MTT法检测AB。3，对SH．SY5Y、PCI2细胞生长的影响；Hoechst染色检测A对SH．SY5Y、PCI2细胞核形态的影响；进一步采用脂质体转染法在SH．SY5Y细胞中瞬时转染PSA—siRNA，在PCI2细胞中瞬时转染PSA重组质粒，加入A125-35作用24h后收集细胞．进行流式细胞术检测细胞凋亡率；Westemblotting检测PSA、caspase一3蛋白的表达变化；酶标仪检测caspase．3活性。结果A[325。，抑制SH．SY5Y、PCI2细胞增殖，细胞核发生凋亡的形态学改变．流式检测细胞凋亡率增加；在SH．SY5Y细胞中，沉默PSA表达能使A132，诱导的细胞凋亡率升高，促进caspase-3酶原激活，caspase-3活性升高。反之，PCI2细胞中过表达的PSA能使A132；诱导的细胞凋亡率下降，抑制caspase-3酶原激活，caspase-3活性降低。结论A。能抑制神经细胞生长，引起神经细胞凋亡；PSA能抑制A，诱导的神经细胞凋亡，对神经元具有保护作用，其机制可能与抑制caspase-3通路的激活有关。
- 刁雪芹王苗苗庄云龙田克立徐霞褚倩倩周楠任桂杰
- 关键词：细胞凋亡半胱氨酸蛋白酶-3
