吴至芳
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金北京市重点学科建设基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 棉花脂肪酸脱氢酶FAD2能够实现转基因小鼠n-6脂肪酸的内源性生物合成被引量：1
- 2009年
- 脂肪酸脱氢酶FAD2(fatty acid desaturase-2)是一种将油酸(18:1)脱氢生成亚油酸(18:2n-6)的植物脱氢酶.在前期研究fad2转基因小鼠模型的基础上,本文新构建CMV promoter/fad2cDNA/SV40poly A真核表达载体,通过显微注射技术,生产出转基因小鼠.7只妊娠受体合计移植184枚受精卵,出生63只(34.2%)健康的成年小鼠.PCR和Southern blotting结果显示,有10只小鼠整合了外源基因,总的转基因效率是15.9%(10/63).随后,转基因小鼠与C57BL/6小鼠杂交选育,建立了10个转基因家系.最后,以6周龄的转基因后代同窝雌鼠作为样本(包括转基因阳性和阴性雌鼠),利用微量气相色谱方法,分析了腿部肌肉组织和肝脏组织的多种n-6脂肪酸的百分含量,结果显示,只有1个(10%)家系的转基因小鼠表达了外源基因,能够有效地改变目标脂肪酸的成分.其中肌肉组织中油酸百分含量(8.580±1.232)与野生型小鼠(10.812±1.244)没有区别(P≥0.05);但是,亚油酸的含量(15.653±0.557),明显(P<0.05)高于野生型小鼠(13.168±0.634),相对含量提高了19%;同时,下游的花生四烯酸(20:4n-6)的含量(12.850±1.479)也明显(P<0.01)高于野生型小鼠(6.871±0.665),相对含量更是提高了87%;转基因肝脏组织的亚油酸(15.962±0.552vs15.200±0.170)和花生四烯酸(12.607±0.623vs11.601±0.492)含量也明显高于野生型小鼠组织(P<0.05).本实验表明,植物fad2基因能够有效地促进转基因小鼠自身生物合成n-6脂肪酸.在国际上首次成功地建立了fad2转基因小鼠的表达模型,为相关疾病的研究奠定了基础.
- 陈青柳青吴至芳王宗义苟克勉
- 关键词：脂肪酸脱氢酶FAD2转基因小鼠油酸亚油酸花生四烯酸
