吴欣伟
- 作品数：9 被引量：17H指数：3
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- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金海南省科学事业费项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- CD163基因的克隆及其真核表达质粒的构建
- CD163是PRRSV感染易感细胞的受体之一。本丈从Marc-145细胞克隆出CD163基因并测序，再根据得到的序列，应用Primer5.0软件设计引物，成功地扩增出带酶切位点的CD163 ORF基因，通过Hind Ⅲ和...
- 曹宗喜焦培荣于俊勇吴欣伟张桂红
- 关键词：猪免疫基因克隆基因表达
- 文献传递
- 2株猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因序列分析被引量：4
- 2012年
- 利用RT-PCR分段扩增的方法,扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中山分离株(ZS-GD株)、珠海分离株(ZH-GD株)覆盖全长基因组的10个片段,分别克隆入pMD18-T载体进行序列测定,获得了PRRSV ZS-GD株和ZH-GD株基因组全长15320bp的核苷酸序列。利用生物信息学软件对PRRSV ZS-GD株和ZH-GD株全基因组序列进行了遗传进化分析,结果显示PRRSV ZS-GD株和ZH-GD株与美洲型参考株的核苷酸序列相似性分别为88.1%～97.8%和88.4%～98.0%;与欧洲型参考株(Lelystad)的核苷酸序列相似性分别为60.6%和60.4%,且在2株毒的Nsp2蛋白上有30个aa的缺失,表明PRRSV ZS-GD株和ZH-GD株均为美洲型分离株的缺失变异株。
- 张民泽闫明菲谢杰雄黄震曹宗喜吴欣伟郭泗虎张桂红
- 关键词：PRRSV基因组
- 两株猪繁殖与呼吸征病毒的分离鉴定及遗传变异分析被引量：2
- 2012年
- 从广东省发病猪场采集的组织和血清中分离到两株PRRSV,病料经RT-PCR检测为阳性,通过Marc-145细胞进行传代,可产生明显细胞病变,通过间接免疫荧光可检测到荧光信号,两株病毒分别命名为ZH-GD株和ZS-GD株。对两株病毒的ORF5和Nsp2高变区进行序列测定和分析,结果表明,PRRSV ZH-GD株和ZS-GD株的核苷酸序列与欧洲型代表株LV株间的相似性相对较远,与美洲株经典毒株VR-2332间的相似性分别为88.6%和88.1%,与中国经典美洲毒株CH-1a间的相似性分别为94.4%和93.0%。在Nsp2上有30个氨基酸的缺失,与JXA1、XH-GD等高致病性变异株的Nsp2缺失位置一致。分离的两株PRRSV均属于美洲型的变异株PRRSV。
- 张超轶吴欣伟闫明菲张亮权郭泗虎黄昌力黄震张民泽赵付荣张桂红
- 关键词：PRRSV
- PRRSV全基因序列分析及缺失型全长cDNA和病毒样颗粒载体的构建
- 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病。其病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。...
- 吴欣伟
- 关键词：全基因序列分析反向遗传操作杆状病毒表达系统
- 广东地区猪源戊型肝炎病毒的检测和核苷酸序列分析被引量：2
- 2011年
- 为了检测广东地区部分猪场猪群中的猪源戊型肝炎病毒(HEV)RNA,试验利用反转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)并应用生物学软件将经扩增和测序得到的猪源HEV核苷酸序列与GenBank上的各个基因型HEV进行相似性比较分析。结果表明:5个样品中检测到HEV RNA,它们的相似性为85.1%～96.3%,与GenBank上基因Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型HEV序列的相似性分别为76.1%～80.5%、76.5%～79.4%、76.4%～80.2%、82.1%～97.7%。说明广东地区存在的猪源HEV可能属于在国内猪群中流行的基因Ⅳ型。
- 刘志刚曹宗喜张得玉秦宏阳张亮权孔维立吴欣伟于俊勇王文华于淼张桂红
- 关键词：基因亚型
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒广州株的分离鉴定与全基因序列分析被引量：3
- 2011年
- 为了给研制基因工程疫苗选取毒株奠定基础,研究在2008年采集广东省某猪场疑似猪高热症病料1份,通过RT-PCR检测、Marc-145细胞传代,证实分离到1株猪繁殖与呼吸综合征病毒,命名为PRRSV-GZ株,经过扩增基因序列并测序,绘制遗传进化树,结果表明:PRRSV-GZ株属于美洲缺失型毒株。
- 王文华秦宏阳曹宗喜于俊勇吴欣伟于淼孔维力刘志刚张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- Marc-145细胞CD163基因克隆及其真核表达质粒构建被引量：3
- 2013年
- 猪繁殖与呼吸综合征是危害养猪业重要传染病之一,CD163是猪繁殖与呼吸综合征感染易感细胞受体之一。从Marc-145细胞克隆出CD163基因并测序,再根据得到序列,应用Primer5.0软件设计引物,成功地扩增出带酶切位点CD163 ORF基因,通过HindⅢ和XhoⅠ双酶切位点将CD163基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1-myc-His中,获得重组质粒pcDNA3.1-CD163,并将重组质粒pcDNA3.1-CD163在BHK细胞上进行表达鉴定。结果表明,Marc-145细胞CD163蛋白在BHK细胞中得到了表达。这为进一步研究CD163受体在PRRSV感染Marc-145细胞过程中作用以及与其他受体之间相互作用提供试验数据。
- 曹宗喜焦培荣林哲敏于俊勇吴欣伟张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒MARC-145细胞克隆
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒XH株感染性克隆的构建被引量：4
- 2011年
- 为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)反向遗传操作系统,本实验采用RT-PCR方法将PRRSV-XH株的基因组序列分为6个片段进行扩增,连接至低拷贝载体pOKQ中,获得全长cDNA克隆。将该克隆体外转录,经脂质体转染Marc-145细胞,观察细胞病变。经RT-PCR、间接免疫荧光和western blot等试验验证,表明构建了具有感染性的PRRSV-XH株全长cDNA克隆。本实验为在分子水平上研究PRRSV的复制、致病机理和基因产物的功能等方面提供技术支持,并为构建新型病毒载体和开发安全有效的活病毒疫苗奠定基础。
- 吴欣伟熊永忠秦宏阳曹宗喜于俊勇闫明菲郭泗虎张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒全长CDNA
- 广东地区猪源戊型肝炎病毒的检测和核苷酸序列分析
- 本研究利用反转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测了广东地区部分猪场猪群中的猪源戊型肝炎病毒(HEV)RNA,并应用生物学软件将经扩增和测序得到的猪源HEV核苷酸序列与GenBank上的各个基因型HEV进行相似性比...
- 刘志刚曹宗喜张得玉秦宏阳张亮权孔维立吴欣伟于俊勇王文华于淼张桂红
- 关键词：基因亚型
- 文献传递
