刘清华
- 作品数：8 被引量：42H指数：4
- 供职机构：徐州医学院更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目国家自然科学基金江苏省高等教育教改立项研究课题更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 热休克蛋白70、cyclinD1、p21在胃癌组织芯片表达及临床病理联系被引量：9
- 2015年
- 目的通过检测热休克蛋白70(HSP70)、cyclin D1、p21在胃癌组织、癌旁正常组织的表达及其与临床病理参数之间的关系,探讨HSP70、cyclin D1、p21在胃癌发生、发展中的作用。方法应用高通量的组织芯片技术建立组织芯片,免疫组织化学SP法检测75例无术前放化疗史的胃癌手术标本和癌旁正常胃组织中HSP70、cyclin D1、p21蛋白的表达情况,并分析蛋白表达与临床病理参数之间的相互关系,并对随访患者进行生存分析。结果 HSP70蛋白在胃癌中阳性表达率为84%,在癌旁正常组织表达率为21.33%,差异有显著性。cyclin D1、p21蛋白在胃癌中阳性表达率为64.00%、34.67%,在癌旁正常组织表达率为5.33%、73.33%,在癌与癌旁组织的表达差异有显著性;HSP70蛋白表达与肿瘤TNM分期和淋巴结转移相关,cyclin D1、p21蛋白表达与肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移相关。HSP 70与cyclin D1之间呈正相关(r=0.506,P=0.000);cyclin D1与p21之间呈负相关(r=0.388,P=0.001)。HSP70(+)组生存率(17.8%)与HSP70(-)组(66.7%)相比,差异有显著性(χ2=4.052,P=0.044)。结论在胃癌的演变中,p21的失活和cyclin D1、HSP70等的过表达,可能引起细胞异常增殖和分化失控,最终导致肿瘤发生与发展。
- 朱祖安李祥佩胡风兰何秋瑜刘清华李凤朝刘莹
- 关键词：组织芯片胃癌热休克蛋白90CYCLINGP21
- 壳寡糖对S180肉瘤细胞凋亡、细胞周期以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响被引量：18
- 2006年
- 目的探讨壳寡糖对S180肉瘤细胞的生物学效应,为其治疗肿瘤提供新的理论基础。方法体外实验:用流式细胞仪测壳寡糖作用下S180肉瘤细胞周期、细胞凋亡情况。体内实验:建立S180肉瘤小鼠皮下移植瘤模型,给予壳寡糖后,测瘤体积,并用免疫组化法测瘤组织Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果体外实验:高浓度壳寡糖作用后S180肉瘤细胞阻滞于G0/G1期,同时S180肉瘤细胞凋亡增加。体内实验:壳寡糖对小鼠S180肉瘤有明显的抑制作用并能提高促凋亡基因Bax的表达,降低抑凋亡基因Bcl-2的表达。结论壳寡糖可抑制S180肉瘤细胞的生长,使S180细胞阻滞于G0/G1期并诱导其发生凋亡,其机制可能与Bcl-2蛋白下调而Bax蛋白上调有关。
- 刘清华孔庆兖柳红
- 关键词：壳寡糖S180肉瘤细胞周期凋亡
- P-cadherin和HSP27蛋白在胃癌组织的表达及临床意义被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨P钙黏蛋白(P-cadherin)与热休克蛋白27(HSP27)在胃癌组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系,进而探讨其作为预后指标的意义。方法:建立组织芯片,通过免疫组化SP法检测75例无术前放化疗史的胃癌手术标本和75例正常胃组织中P-cadherin、HSP27的表达情况,并对随访患者进行生存分析。结果 :在胃癌组织及正常胃组织中,Pcadherin、HSP27的表达率分别为40.0%、82.7%(P<0.001)和64.0%、30.7%(P<0.001)。P-cadherin低表达和HSP27高表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关(P<0.05),HSP27高表达还与肿瘤大小相关(P<0.05)。Pearson相关分析显示,P-cadherin与HSP27在胃癌中的表达呈负相关(P<0.05)。单因素Kaplan-Meier回归分析显示P-cadherin和HSP27与预后相关(P<0.05)。Cox单因素回归分析显示P-cadherin、HSP27、临床分期、肿瘤大小、有无淋巴结转移与患者预后相关(P<0.05);Cox多因素回归模型分析显示HSP27、临床分期与患者预后相关(P<0.05)。结论:在胃癌中,P-cadherin低表达、HSP27高表达与胃癌临床病理特征和生物学行为密切相关。P-cadherin与HSP27的表达在胃癌组织中呈负相关。P-cadherin和HSP27可作为判断患者预后的候选指标。
- 胡风兰何秋瑜李祥佩刘清华刘莹朱祖安
- 关键词：组织芯片热休克蛋白27
- HIF-1α在RAD001联合DDP下调胃癌SGC7901/DDP细胞株VEGF分泌中的作用
- 2014年
- 目的 研究缺氧诱导因子（HIF-1α）在mTOR特异性抑制剂RAD001联合DDP下调胃癌细胞株SGC7901/DDP VEGF表达中的作用,并探讨其相关作用机制.方法 体外培养胃癌SGC7901/DDP细胞株,分别给予RAD001、DDP及RAD001＋DDP干预48 h后,免疫细胞化学染色及Western-blot法检测HIF-1α、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达情况,RT-PCR法检测HIF-1α mRNA、VEGF mRNA的合成情况.结果 RAD001单独作用于SGC7901/DDP细胞48 h后,HIF-1α、VEGF蛋白的表达和HIF-1α 、VEGF mRNA的合成下降,且呈剂量依赖性.联合用药组比单独用药组作用增强,差异有统计学意义（P〈0.05）.VEGF和HIF-1α蛋白呈正相关（r=0.993,P〈0.01）,HIF-1α mRNA和VEGF mRNA呈正相关（r=0.994,P〈0.01）.结论 RAD001能够抑制细胞体外VEGF、HIF-1α的蛋白表达及mRNA的合成,RAD001联合DDP作用后,效果增强,其机制可能与mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路有关.
- 何秋瑜杜兰兰刘清华李凤朝崔涛蔡红星刘莹
- 关键词：胃癌SGC7901RAD001缺氧诱导因子1Α
- 病理学案例教学模式的探索被引量：4
- 2012年
- 为了提高病理学教学质量,激发学生的学习热情,提高学生综合分析的能力,本文探讨了案例教学在病理教学中运用的必要性和案例教学的应用原则,及教师在病理学案例教学中发挥的重要作用。
- 刘清华刘莹崔涛张迎春周士东柳红
- 关键词：病理学案例教学
- HSV1-TK/GCV自杀基因系统治疗卵巢癌的体内杀伤作用被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨Ⅰ型单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpessimplexvirustypeⅠthymidinekinase,HSV1TK)/丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)自杀基因系统对卵巢癌的体内治疗效果。方法:用携带TK基因的重组逆转录病毒转染人卵巢癌细胞系SKOV3,用G418筛选抗性克隆(命名为SKOV3/TK)。PCR方法检测TK基因整合情况。将SKOV3和SKOV3/TK细胞按不同比例混合培养,给与10mg/LGCV治疗,观察体外旁观者效应。再分别用含有不同SKOV3/TK浓度的细胞建立荷瘤鼠模型作为3个TK基因转染组,并以接种单纯SKOV3细胞的动物模型作为对照组。TK基因转染组均行GCV20mg/(kg·d)腹腔注射共9d,对照组给等体积生理盐水腹腔注射。绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率,并取瘤细胞做病理学检查。结果:体外混合培养细胞显示明显BSE,当SKOV3/TK细胞数占混合细胞数20%时,10mg/LGCV就可将约50%的混合细胞杀死。体内实验显示,20%、40%和100%TK基因转染组肿瘤体积与对照组比较,抑瘤率分别为38%、61%和99%,各组间两两比较差异有统计学意义,P<0.01(除20%TK基因转染组和40%TK基因转染组P值为0.001外,其余各组间P值均<0.001)。病理结果显示,TK基因转染组出现不同程度点、片状坏死,以100%TK基因转染组最重,残存的肿瘤均为坏死组织。结论:HSV1TK/GCV自杀基因系统对荷人卵巢癌皮下瘤裸鼠模型的肿瘤具有杀伤作用,同时存在BSE。这种杀瘤作用随着TK基因转染率的提高而增强。
- 徐梅吴强孙志华袁红花朱孝荣刘清华
- 关键词：基因疗法肿瘤细胞转染
- RUNX3参与抑制人前列腺癌迁移和血管发生被引量：6
- 2014年
- 目的研究RUNX3基因对前列腺癌的发生与迁移的影响，并探讨其分子作用机制。方法运用肿瘤组织芯片（tissue microarray，TMA）技术评估RUNX3在前列腺癌发生过程中的作用；分别用RUNX3的真核表达载体pFlag—RUNX3和对照载体pFlag—control转染人前列腺癌细胞系PC3和DU145细胞；细胞迁移实验、细胞侵袭实验和微血管形成实验分别检测RUNX3基因高表达对2种前列腺癌细胞迁移、侵袭和促血管生成能力的影响；利用RT—PCR和Western blot检测RUNX3基因表达后对2种前列腺癌细胞中基质金属蛋白酶抑制因子-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2，TIMP-2）和基质金属蛋白酶-2（metalloproteinase-2，MMP-2）mRNA和蛋白表达的影响；明胶酶谱实验和ELISA实验检测RUNX3基因表达后对2种前列腺癌细胞分泌活性MMP-2和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的影响。结果相较于癌旁组织，RUNX3在前列腺癌组织中异常低表达，且与肿瘤分级有关。过表达RUNX3会上调TIMP-2、抑制MMP-2的表达与激活，从而抑制前列腺肿瘤细胞的迁移与侵袭。在前列腺细胞中抑制RUNX3表达会破坏TIMP-2和MMP-2之间的平衡，沉默TIMP-2会抑制MMP-2的表达。恢复RUNX3表达会降低VEGF的分泌，从而抑制内皮细胞生长和血管生成。结论RUNX3通过TIMP-2和VEGF通路对前列腺癌产生抑制作用。
- 陆峥陈菲菲王猛白津刘清华郑骏年
- 关键词：RUNX3前列腺癌血管发生
- HSP27和P53蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义被引量：3
- 2014年
- 目的：分析热休克蛋白27（ HSP27）及P53蛋白在胃癌组织及癌旁组织中的表达及其与临床病理参数之间的关系，探讨其作为预后指标的意义。方法建立组织芯片，通过免疫组化SP法检测75例无术前放化疗史的胃癌手术标本和52例癌旁组织中HSP27及P53蛋白的表达情况，并对随访患者进行生存分析。结果 HSP27阳性表达率在胃癌组织中为64．0％，在癌旁组织中为30．8％，2组差异有统计学意义（ P＜0．01）；HSP27表达与肿瘤TNM分期、分化程度、肿瘤大小和淋巴结转移有关（ P＜0．05）。 P53蛋白阳性表达率在胃癌组织中为68．0％，在癌旁组织中为7．7％，2组差异有统计学意义（P＜0．01）；P53蛋白表达与肿瘤TNM分期和分化程度有关（P＜0．05）。 Pearson相关分析显示，在胃癌中，HSP27与P53表达呈正相关（r＝0．319，P＜0．01）。 Kaplan -Meier生存分析结果显示，HSP27高表达与胃癌预后不良有关（χ2＝13．109，P＝0．000）。经Cox比例风险回归模型分析显示，肿瘤的分期、大小、有无淋巴结转移以及HSP27的表达与患者预后有关（ P＜0．05）。结论 HSP27高表达与胃癌有关，提示HSP27可能在胃癌的发生、发展中起重要作用。 HSP27与P53表达呈正相关，提示两者在肿瘤的发生、发展中可能具有协同作用。
- 朱祖安李祥佩胡风兰何秋瑜刘清华李凤朝刘莹
- 关键词：胃癌热休克蛋白27P53蛋白临床病理参数
