刘孝珍
- 作品数：10 被引量：135H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金哈尔滨市科技攻关计划项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸡传染性支气管炎病毒ck/CH/LHB/100801株的分离鉴定及分子特征研究被引量：4
- 2011年
- 本研究于2010年8月从河北省某鸡场鸡群中分离一株病毒,通过对分离株进行电子显微镜观察、鸡胚致病性试验、血凝特性试验等生物学特性及鸡传染性支气管炎病毒(IBV)核蛋白基因RT-PCR方法鉴定,结果表明分离株为IBV,命名为ck/CH/LHB/100801。根据GenBank中登录的IBV基因组序列,设计扩增病毒全基因组的19对引物,并扩增病毒基因组,采用3`-RACE和5`-RACE技术,扩增得到该病毒全部基因组序列。通过与已发表的参考病毒株全基因组序列比较表明,该分离株基因组全长为27675bp,共有10个开放阅读框,其基因排序为:5'-cap-Replicase-S-3a-3b-3c-M-5a-5b-N-poly(A)-3',纤突蛋白裂解位点为534RRFRR538。序列分析表明ck/CH/LHB/100801与台湾分离株TW2296/95的结构蛋白序列相似性高达99.8%,进化亲缘关系最近,推测两分离株间可能具有相同的进化来源。
- 马会杰刘孝珍韩宗玺邵昱昊孔宪刚刘胜旺
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒全基因序列遗传进化分析
- 猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响被引量：5
- 2013年
- 为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与宿主细胞相互作用,本研究根据前期已经鉴定的PEDV N蛋白核仁定位信号序列,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增出核仁定位信号序列缺失的PEDV N基因(dN),并将其与真核表达载体pAc-GFP-C1连接,构建重组质粒pAc-GFP-dN。将pAc-GFP-dN转染于Vero E6细胞中,利用激光共聚焦显微镜分析重组质粒pAc-GFP-dN表达蛋白的定位情况,并利用流式细胞仪检测转染细胞的周期变化。实验结果表明:与完整的N蛋白相比,缺失核仁定位信号的N蛋白不能定位于细胞核仁,同时丧失了使宿主细胞周期在G2/M期停滞的能力,从而揭示了N蛋白核仁定位信号对宿主细胞具有重要的影响。
- 刘随新石达陈建飞张鑫时洪艳刘孝珍张莎王璐冯力
- 关键词：猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白流式细胞术
- 2011年猪流行性腹泻病毒的遗传变异分析被引量：94
- 2012年
- 为分析猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本研究设计合成2对扩增S1基因的引物,利用套式RT-PCR方法,对2011年分离的17个PEDV S1基因进行扩增、克隆和序列测定;并将其进行比对和遗传演化分析。结果表明:17个PEDV S1基因序列与参考病毒株S1基因核苷酸序列同源性为90.54%～99.96%,与经典病毒株CV777相比,其中有6个S1基因在453 bp～454 bp处存在3个核苷酸的缺失;一个在453 bp～454 bp处缺失6个核苷酸;其它10个S1基因在173 bp～186 bp之间存在12个核苷酸的插入,413 bp～417 bp之间有3个核苷酸的插入,467 bp～468 bp处缺失6个核苷酸,插入和缺失位点与韩国病毒株KNU-0901、KNU-0905、KNU-0801相似。S1基因系统进化树分析表明,PEDV S1基因分为3群,其中7个S1基因属于PEDVⅠ群,另外10个属于PEDVⅢ群。
- 刘孝珍陈建飞时洪艳张鑫石达刘胜旺冯力
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S1基因
- 猪流行性腹泻病毒检测与遗传演化分析
- 陈建飞刘孝珍石达时洪艳史楠冯力
- 2012年猪嵴病毒流行病学调查及3D基因的遗传变异分析被引量：11
- 2013年
- 为了解猪嵴病毒(PKV)的流行及变异情况,本研究根据PKV的3D基因保守区域核苷酸序列设计一对特异性引物,并利用RT-PCR方法对2012年来自24个省市84个猪场的病料样品共计236份进行3D基因的检测。结果显示:在236份病料中,共有63份为PKV阳性,阳性率为36.69%;而在检测的84个猪场中,共有36个猪场显示PKV阳性,猪场阳性率为42.85%。此外,对2012年分离的9个PKV部分3D基因进行测序分析,并与GenBank中登录的人、牛、猪以及鼠等嵴病毒株相关序列进行遗传变异分析。结果表明9个PKV 3D基因与国内外其他PKV株无论是在核苷酸水平上还是在氨基端水平上均具有较高的同源性,表明PKV的3D基因具有较高的保守性,可以作为病原检测的靶基因。
- 张莎石达陈建飞时红艳张鑫刘孝珍刘随新王璐陈洪岩冯力
- 关键词：流行病学调查3D基因
- 2010—2011年仔猪腹泻的病因分析和防控措施被引量：23
- 2011年
- 自2010年12月起，我国主要养猪省份相继出现了以哺乳仔猪腹泻和高死亡率为特征的猪病，给我国的养猪业造成了很大的经济损失，导致我国猪肉价格不断上涨。对于该次哺乳仔猪腹泻的病因众说纷纭，使广大猪场管理人员感到迷惑和恐慌。笔者多次和现地养猪场的管理人员、技术人员及哈尔滨维科生物技术开发公司的业务员进行交流，了解现地猪场的疫情，归纳总结了2011年哺乳仔猪腹泻病的特征。
- 陈建飞刘孝珍时洪艳仇华吉刘长明冯力
- 关键词：哺乳仔猪腹泻病因分析防控措施养猪场技术人员
- PEDV N蛋白亚细胞定位信号的鉴定
- 石达陈建飞时红艳张莎王璐刘随新刘孝珍冯力
- 2010-2011年仔猪腹泻的病因分析和防控措施
- 本文介绍了2010-2011年仔猪腹泻的疫情特征，分析了该疫情的病因及危害和对猪肉价格波动的影响，并提出了相应防控措施。
- 陈建飞刘孝珍时洪艳仇华吉刘长明冯力
- 关键词：仔猪腹泻病因分析防控措施
- Vero细胞nucleolin和fibrillarin基因的克隆及序列分析
- 2012年
- 为克隆及分析Vero细胞的nucleolin和fibrillarin基因,本研究根据人类的相关基因设计两对引物,从Vero E6细胞中扩增nucleolin和fibrillarin基因。测序结果显示nucleolin基因序列长度为2 139 bp,编码712个氨基酸;fibrillarin基因序列长度为969 bp,编码322个氨基酸。与GenBank中登录的人类相应序列相似性高达97%,处于同一进化分支,表明该基因具有种属特异性并且保守性很高;同时利用软件对nucleolin和fibrillarin预测蛋白进行了生物信息学分析,从而为研究冠状病毒核蛋白与核仁蛋白相互作用奠定了基础。
- 石达陈建飞时红艳王洪峰张鑫刘孝珍张莎刘随心王璐冯力
- 关键词：核仁素纤维蛋白克隆
- 2011年中国猪流行性腹泻病毒分子流行病学初步调查
- 猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea，PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemicdiarrhea virus，PEDV)引起的，是猪的一种高度接触性肠道传染病，其主要特征为...
- 刘孝珍
- 关键词：生猪养殖流行性腹泻
