刘婧
- 作品数：14 被引量：20H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国际科技合作与交流专项项目云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IPV皮内免疫有效性评价用动物模型的建立方法
- 本发明提供一种IPV皮内免疫有效性评价用动物模型的建立方法，选择猪龄为3-5个月、体重为10-20kg的属于华南型猪种的云南版纳小耳猪，随机分组，分别进行第一次无针皮内注射IPV疫苗免疫，免疫后30天采血，分离血清，再分...
- 廖国阳孙明波马磊寸怡娜蔡玮周健杨卉娟刘婧张新文戴忠祥代小虎胡文柱姜述德
- 文献传递
- 一种检测Poly A尾长度的方法及其应用
- 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种检测Poly A尾长度的方法及其应用。双端修饰的核酸接头，其5’端为磷酸基团修饰，3’端为间臂类修饰的一种。使用本发明的核酸接头，能够检测到不同长度和结构的mRNA的Poly A...
- 解云李明阳柳梦媛刘婧吴雅楠宋绍辉钏鸿云马雪峰廖国阳
- Wistar大鼠皮内免疫Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗的免疫持久性及加强免疫效果研究被引量：2
- 2019年
- 脊髓灰质炎野毒株消灭后,口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(Oral polio vaccine,OPV)将被停止使用,脊髓灰质炎灭活疫苗(Inactivated poliovirus vaccine,IPV)将全面替代OPV,但IPV成本过高,难以满足全球需要。皮内免疫可以降低Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Inactivated poliovirus vaccine derived from Sabin strain,sIPV)的免疫剂量,本研究将观察sIPV疫苗皮内免疫大鼠后的免疫持久性及加强免疫效果。本研究采用sIPV,设皮内免疫组、全剂量肌肉免疫组和皮内免疫阴性对照组,接种Wistar大鼠,于3剂基础免疫程序完成后第1个月、12个月采血;第12个月采血后加强免疫1剂,并于加强免疫1个月后采血。中和试验检测各血清抗脊灰病毒中和抗体效价,评价皮内免疫sIPV的免疫持久性及加强免疫效果。Wistar大鼠3剂基础免疫后1个月,1/5、1/3剂量皮内免疫组与全剂量肌肉免疫组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗体阳转率均达到了100%,各型别中和抗体几何平均滴度(Geometric mean titer,GMT)均远高于1∶8保护水平。基础免疫后12个月,sIPV全剂量组各型阳转率均维持在80%以上,1/10剂量皮内免疫组在50%以上,1/5剂量皮内免疫组维持在70%以上,1/3剂量皮内免疫组维持在80%以上,除1/10剂量组Ⅱ型外其余各组各型别GMT均维持在1∶8以上。加强免疫后1个月,1/5剂量皮内免疫组、1/3剂量皮内免疫组及全剂量组的Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型各组中和抗体阳转率均达到100%,并能够诱导产生远高于1∶8的抗体水平。本研究结果显示sIPV疫苗皮内免疫具有良好的免疫持久性及加强免疫效果。
- 马磊寸怡娜苏敏宋绍辉蔡玮周健欧阳圣洁刘婧胡文著李卫东廖国阳
- 关键词：免疫持久性加强免疫WISTAR大鼠
- 二乙烯亚胺灭活流感病毒的效果观察被引量：7
- 2008年
- 目的观察二乙烯亚胺(BEI)对流感病毒的灭活效果。方法分别使用甲醛和BEI对流感病毒进行灭活试验,通过血凝试验检测二者灭活效果,并确定各自最佳灭活时间。用灭活的病毒液免疫小鼠,检测其抗原性,并用RT-PCR方法分析灭活病毒基因组的完整性。以裂解剂TritonX-100裂解病毒后,分别加入甲醛和BEI灭活,采用单向免疫扩散法检测灭活不同时间病毒液的HA含量。结果BEI灭活36h可将病毒完全灭活;BEI灭活的病毒免疫小鼠较甲醛灭活病毒产生较高的血凝抑制抗体;BEI灭活病毒液经RT-PCR,不能扩增出病毒基因;BEI灭活病毒的HA平均含量比甲醛灭活病毒的HA平均含量略高。结论BEI在灭活流感病毒感染性的同时,能够灭活病毒基因,并较好地保持病毒的抗原性。
- 魏晓露刘婧高菁霞张新文陈俊英黄秋香何香莲张云昆余磊姜述德廖国阳李映波
- 关键词：流感病毒灭活抗原性
- SARS-CoV-2 S蛋白单克隆抗体的制备及其双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2022年
- 目的 制备严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)棘突蛋白(spike protein,S)单克隆抗体(简称单抗),建立S蛋白抗原含量双抗体夹心ELISA检测方法,并进行验证。方法 通过杂交瘤细胞融合技术制备单克隆抗体,并对单抗进行鉴定。用该单抗作为包被抗体,HRP标记的兔抗S蛋白多克隆抗体作为酶标抗体,建立双抗体夹心ELISA方法,检测SARS-CoV-2 S蛋白抗原含量。对方法的包被抗体浓度(10、5、2.5、1.25μg/mL)、酶标抗体浓度(4、2、1μg/mL)以及封闭液种类(未封闭、PBS稀释的1%BSA、2%BSA、1%BSA+1%蔗糖、2%BSA+2%蔗糖)进行优化,并对方法的线性范围及灵敏度、特异性和准确性进行验证。用建立的方法对10份疫苗生产工艺不同阶段已知S蛋白抗原含量的样本进行检测,计算该方法与中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所新冠疫苗定量方法检测结果的符合率。结果 筛选出18株S蛋白特异性单克隆抗体,7B10A2细胞株制备的腹水抗体纯化后浓度为4.487 mg/mL,纯度大于90%,可特异性结合新冠病毒S蛋白上S1亚基;抗体亚型为IgG2b型,抗体效价为1︰128 000,效应浓度为0.137μg/mL。建立的双抗体夹心ELISA方法最适包被抗体和酶标抗体浓度分别为5和4μg/m L,最适封闭液为2%BSA+2%蔗糖;在2.5~160 U范围内,相关系数(R2)大于0.99,检测灵敏度为1.25 U;该方法特异性良好,与核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,N)、BSA、PBS及流感病毒等不发生反应;准确性验证的回收率在92.10%~111.58%之间。用建立的方法检测已知含量样本符合率在94.2%~109%之间。结论 制备了SARS-CoV-2 S蛋白特异性单抗,并建立了适用于SARS-CoV-2 S蛋白抗原含量检测的双抗体夹心ELISA方法,可用于疫苗产品及其工艺阶段样品和其他样本中S蛋白含量的检测。
- 李妮龙柏霖朱文勇钏鸿云宋绍辉刘婧吴雅楠廖国阳
- 关键词：单克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 用无血清适应的Vero细胞培养H5N1型流感病毒条件的优化被引量：5
- 2015年
- 目的优化无血清适应的Vero细胞(SFM-Vero细胞)培养H5N1型流感病毒的条件。方法将H5N1型流感病毒接种于SFM-Vero细胞,于免疫荧光显微镜下观察病毒感染情况。对病毒无血清培养条件MOI(0.05、0.10、0.15、0.20)、细胞培养时间(12、24、36、48 h)、培养液基础培养基(DMEM/F12、M199、RPMI1640及MEM:DMEM/F12混合液)、培养温度(33、33.5、34、34.5、35和37℃)、收获时间(24、36、48、60和72 h)、培养液p H值(6.8、7.1、7.4、7.7、8.0和8.3)和TPCK胰酶浓度(0.5、1.0、1.5μg/ml)进行优化,并检测最佳条件无血清培养的H5N1型流感病毒的血凝效价及形态。结果 H5N1型流感病毒对SFM-Vero细胞具有感染性。最佳无血清培养条件为:MOI=0.1和0.15,细胞培养时间36 h,以DMEM/F12为基础培养基,病毒培养温度33.5和34.5℃,病毒收获时间60 h,培养液p H 7.7,TPCK胰酶浓度为1.0μg/ml。最佳条件无血清培养的H5N1型流感病毒的血凝效价为1∶512,电镜下观察病毒形态完整。结论确定了H5N1型流感病毒对SFM-Vero细胞具有感染性,并优化了SFMVero细胞培养流感病毒的适宜条件,为更具有生物安全性流感疫苗的研发奠定了基础。
- 马磊耿兴良苏杨起杨家方常亚军段男邹俊如刘圆圆刘婧戴宗祥李卫东廖国阳
- 关键词：无血清培养VERO细胞
- 成人剂量型流行性感冒病毒裂解疫苗的稳定性研究被引量：3
- 2013年
- 目的了解疫苗在不同温度和不同时间存放的质量变化,为研制安全有效的流感疫苗提供依据。方法将流感疫苗放置在4℃和37℃进行长期稳定性和加速稳定性试验,不同存放时间点测定流感病毒血凝素(HA)含量及各项质量指标。结果疫苗经4℃保存18个月和37℃保存2周,HA含量和其他质量指标都符合药典要求。结论成品流感疫苗在1年有效期内均合格。
- 周健高菁霞马磊刘婧廖国阳戴宗祥
- 关键词：流行性感冒病毒裂解疫苗血凝素稳定性
- 一种降低副产物dsRNA产量的体外转录体系
- 本发明属于生物技术领域，涉及一种降低副产物dsRNA产量的体外转录体系。采用本发明的体外转录缓冲液及体外转录体系，能够逆转体外转录效率与Mg<Sup>2+</Sup>离子的正相关性，使得在较低Mg<Sup>2+</Sup...
- 刘婧李明阳柳梦媛解云吴雅楠宋绍辉钏鸿云马雪峰廖国阳
- 一种检测Poly A尾长度的方法及其应用
- 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种检测Poly A尾长度的方法及其应用。双端修饰的核酸接头，其5’端为磷酸基团修饰，3’端为间臂类修饰的一种。使用本发明的核酸接头，能够检测到不同长度和结构的mRNA的Poly A...
- 解云李明阳柳梦媛刘婧吴雅楠宋绍辉钏鸿云马雪峰廖国阳
- Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗
- 廖国阳孙明波李琦涵姜述德褚嘉祐谢忠平杨净思蔡玮衡燮周健杨卉娟车艳春杨晓蕾陈洪波李卫东易力洪超张新文俞詠霆姜莉宋霞张丽旌
- 脊髓灰质炎(以下简称脊灰)是由脊灰病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型引起肢体松弛性麻痹的急性传染病，常引起终身残疾，给患者及其家庭造成严重摧残。脊灰灭活疫苗(IPV)和口服脊灰减毒活疫苗(OPV)在全球广泛的使用，脊灰得到有效控制。198...
- 关键词：
- 关键词：脊髓灰质炎灭活疫苗传染病
