凡任芝
- 作品数：12 被引量：31H指数：4
- 供职机构：安徽省立医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省人才开发资金资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 毛细管电泳免疫-激光诱导荧光检测技术测定氨甲蝶呤对映体耐药A549细胞株中叶酰聚谷氨酸合成酶
- 背景：氨甲蝶呤(Methotrexate,MTX)是许多叶酸途径抗肿瘤药物的前体，存在L-(+)-MTX和D-(-)-MTX 2种形式的对映体，广泛应用于淋巴瘤、急性白血病和肺癌等多种肿瘤的治疗，作为MTX代谢途径中的关...
- 凡任芝
- 关键词：氨甲蝶呤
- 文献传递
- 荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床意义
- 2004年
- 目的:探讨血清免疫标志物模式与HBVDNA之间关系。方法:对780例临床血清标本分别进行荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对比检测。结果:在780例临床标本中,HBsAg(+)、HBeAg(+)和HBcAb(+)模式345例,HBVDNA阳性335例,阳性率为97.1%(335/345),血清病毒载量对数值的均值为7.84±1.20;HBsAg(+)、HBeAb(+)和HBcAb(+)模式294例,HBVDNA阳性167例,阳性率为56.8%(167/294),载量对数值的均值为5.02±1.19;HBsAg(+)和HBcAb(+)模式141例,HBVDNA阳性49例,阳性率为34.8%(49/141),载量对数值的均值为4.89±1.07。结论:HBeAg是反映HBVDNA复制的重要指标,定量测定HBVDNA能真实反映HBV复制状况,为乙型肝炎的诊断、治疗及预后判断提供指导意义。
- 陈学民凡任芝
- 关键词：荧光定量聚合酶链反应乙型肝炎病毒
- 氨甲蝶呤对映体获得性耐药A549细胞株二氢叶酸还原酶基因表达分析被引量：5
- 2011年
- 目的研究氨甲蝶呤(MTX)对映体[L-(+)-MTX和D-(-)-MTX]耐药与二氢叶酸还原酶(DHFR)基因表达的关系。方法用浓度递增结合低剂量持续诱导法获得A549细胞对不同构型及不同浓度的MTX对映体的耐药细胞株,荧光定量PCR检测耐药细胞株中DHFR基因的相对含量。结果对两种不同对映体的获得性耐药存在差异,D型耐药细胞耐药指数高于L型;对映体各浓度耐药细胞间耐药指数也有差异。15μmol/L L型、D型MTX首次诱导耐药细胞的DHFR相对含量低于亲本细胞,对该浓度对映体耐药的各细胞组间没有差别(P>0.05)。35～45μmol/L浓度耐药细胞的DHFR相对含量增加,45μmol/L D型耐药细胞DHFR相对含量高于对应浓度L型耐药细胞,差异有显著性(P<0.05)。结论首次诱导MTX耐药以抑制DHFR基因为主。DHFR基因表达具有手性差异。DHFR基因的检测有望作为肿瘤治疗监测的指标。
- 李道静何晓东孙余婕凡任芝许维东孙利张永娟张白银沈佐君
- 关键词：二氢叶酸还原酶氨甲蝶呤对映体耐药
- 血浆EB病毒DNA浓度检测在初诊鼻咽癌患者分期中的应用被引量：4
- 2017年
- 目的探讨血浆EBV DNA浓度检测在初诊鼻咽癌患者诊断分型中的应用价值。方法按肿瘤淋巴结转移(Tumor Node Metastasis,TNM)进行临床分期,对57例初诊鼻咽癌患者用荧光定量PCR技术检测血浆内EBVDNA浓度。结果EBV DNA阳性率与患者的性别及年龄段均无相关性;TNM分期中Ⅲ期和Ⅳ期的EBV DNA浓度检测结果的差异有统计学意义(P<0.05),且Ⅳ期较高;随T分期的发展,各期EBV DNA阳性检出率增高,T_2和T_4期EBV DNA浓度检测结果的差异有统计学意义(P<0.05),且T_4期较高;M和N分期患者的差异无统计学意义。结论血浆EBV DNA浓度水平变化与鼻咽癌患者的临床分期呈正相关,可以作为一种初诊鼻咽癌患者的辅助诊断手段。
- 凡任芝
- 关键词：实时荧光定量PCR鼻咽癌EB病毒
- 叶酰聚谷氨酸合成酶基因在甲氨蝶呤对映体获得性耐药A549细胞株中的表达差异被引量：3
- 2011年
- 目的研究不同甲氨蝶呤（MTX）对映体耐药与叶酰聚谷氨酸合成酶（FPGS）基因水平表达的关系。方法用大剂量冲击递增结合低剂量持续诱导法诱导获得两组含不同构型15～55μmoL／L浓度的MTX对映体[L-（＋）-MTX和D-（-）-MTX]耐药的细胞系，细胞为人源非小细胞性肺癌A549细胞，用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各细胞系的耐药指数；用实时荧光定量聚合酶链反应（RFQ—PCR）方法检测这两组各细胞系中胞质型FPGS（cFPGS）和线粒体型FPGS（mFPGS）基因的相对含量。结果D-（-）-MTX耐药细胞组耐药指数高于L-（＋）-MTX耐药细胞组（32．7±9．3比11．54-2．9，P〈0．05），L-（＋）-MTX／A549细胞系耐药指数均在5～15之间，为中度耐药，而D-（-）-MTX／A549细胞系耐药指数均〉15，为高度耐药。在D-（-）-MTX和L-（＋）-MTX两组耐药细胞系中，mFPGS表达水平仅在MTX为15μmol／L时差异无统计学意义，在MTX其他各浓度点两组间差异均有统计学意义（25μmol／L：2．3±0．9比1．3±0．7，35μmoL／L：2．6±0．3比1．1±0．9，45μmol／L：1．4±0．8比1．0±1．0，55μmoL／L；1．0±0．2比0．2±0．1均P〈0．05）；cFPGS表达水平在MTX为15μmol／L时两组间差异也同样无统计学意义，在25～55μmol／L浓度区间内D-（-）-MTX／A549细胞系的cFPGS表达与耐药指数呈现高度负相关（r=-0．95，P〈0．05）。结论在A549细胞中MTX对映体初次剂量15μmol／L冲击法诱导获得的对映体耐药与再次接受更大剂量（t〉25μmol／L）MTX诱导获得耐药的机制不同，D-（-）-MTX／A549耐药细胞系表现为更高的耐药性，提示临床使用MTX时应考虑该药物存在手性对映体问题。
- 周红艳何晓东孙余婕凡任芝孙利沈佐君
- 关键词：甲氨蝶呤对映体
- 安徽省部分医院室间质量评价样品现场检测结果分析被引量：2
- 2019年
- 目的考核市级医院、县级医院及民营医院的临床常规化学、凝血试验、乙丙肝抗原抗体检测三个大常规专业项目的现场检测能力。方法利用安徽省临床检验中心2016年和2017年室间质评活动的同批次样本,设计各专业考核样本盘,开展现场监督检测,结果上传系统网络平台,以同批次全省分组大数据的允许范围为判定标准,按照国际通用的评价方案,分别考核各项目中各类医院的检测能力。结果临床常规化学、凝血试验、乙丙肝抗原抗体检测三个专业中,市级医院的平均PT得分为95.63、99.63、92.50,及格率情况分别为100%、100%、87.5%;县级医院平均PT得分94.46、99.50、82.66,及格率分别为96.97%、100%、68.75%;民营医院平均PT得分89.50、90.81、82.50,及格率分别为93.75%、93.75%、56.25%。结论三个常规专业的平均得分都在80分以上,按照评价标准,说明整体检测能力合格,其中市级医院高于县级,县级医院高于民营;三类医院中,临床常规化学、乙丙肝抗原抗体检测专业的检测能力较好,凝血试验检测能力有待进一步加强。
- 董辉军凡任芝周红艳陈学民吴赟沈佐君
- 关键词：质量管理检验科
- 安徽省临床基因扩增技术标准化推广与应用
- 沈佐君董辉军何晓东王保龙周红艳凡任芝倪虹陈学民吴赟孙余婕
- 基因扩增(又称PCR)是近20年来发展的一种新的分子诊断技术，能在短时间内将微量靶核酸特异性地扩增数亿倍，大大地提高对目的核酸的分析能力。该技术在医学领域可用于遗传性疾病、感染性疾病和肿瘤等的诊断，是一种快速、特异的检验...
- 关键词：
- 关键词：疾病诊断
- 利用EP5-A2文件的方法评价实时荧光定量PCR检测HBV DNA的精密度
- 2015年
- 目的评价本实验室荧光定量PCR方法(Real-time PCR)测定HBV DNA结果的精密度。方法按照美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP5-A2文件C1附录要求,对浓度约为107(copies/ml)(S7)、105(copies/ml)(S5)和103(copies/ml)(S3)样本,评价其精密度。结果 S7、S5、S3的批内精密度CV值分别为2.022%、3.682%、4.469%,总精密度的CV值分别为4.037%、4.452%、7.090%。结论本检测系统的精密度情况符合试剂厂商声明要求,可以满足临床需求。
- 凡任芝沈佐君
- 关键词：精密度实时荧光定量PCR
- 毛细管电泳免疫-激光诱导荧光术测定甲氨蝶呤对映体耐药A549细胞株中叶酰聚谷氨酸合成酶被引量：3
- 2008年
- 目的为观察甲氨蝶呤（MTX）对映体诱导肺癌A549细胞株耐药后叶酰聚谷氨酸合成酶（folylpolyglutamate synthetase，FPGS）含量变化，建立一种用毛细管电泳免疫-激光诱导荧光术（CEIA-LIF）测定F＇PGS的方法，以便为深入探讨肿瘤耐药机制提供新的实验手段。方法实验分别选用耐药浓度为25μmol／L的L-（＋）-MTX和D-（-）-MTX肺癌A549耐药细胞株，以MTX敏感的细胞株作对照，培养获取上述3株细胞，并粗提取FPGS做CEIA-LIF和免疫印迹（WB）实验；用异硫氰酸荧光素（FITC）标记FPGS抗体，与提取的FPGS进行免疫反应；然后采用CEIA-LIF，根据不同分子量蛋白具有不同的迁移时间，分离检测标记蛋白，检测L-（＋）-MTX和D-（-）-MTX作用耐药前后3株肺癌A549细胞株中FPGS表达含量；同时用WB作对照，以评价CEIA-LIF的特异性和FPGS定量的准确性。结果CEIA-LIF分离标记FPGs抗体与免疫复合物的分离时间分别为7.1、8．9min，分离度（R）=4．5，在10min内即完成蛋白的分离和检测。经WB鉴定3株细胞液氮冻融裂解后离心提取液中组分与FIGS抗体无非特异性条带出现。CEIA-LIF测定敏感细胞株的检测下限为0．68mg／山细胞；而其检测25μmol／LL-（＋）-MTX和25μmol／LD-（-）-MTX诱导耐药细胞中FPGS的表达含量分别为对照组敏感细胞的46．59％和48．36％。结论本研究建立的CEIA-LIF检测FPGS法具有高效快速的特点，且具与WB类似的特异性；同时提高了检测的敏感度。L-（＋）-MTX和D-（-）-MTX诱导耐药后细胞株中FPGS表达含量较敏感细胞株明显减少，证明MTX耐药细胞株FPGS表达含量受损。
- 凡任芝何晓东朱园园李明陶绍能董林沈佐君
- 关键词：甲氨蝶呤
- 定量PCR法检测HBV DNA与HBV血清标志物的相关性被引量：9
- 2005年
- 目的 探讨血清HBV DNA水平与HBV血清标志物 ( HBVM)的相关性。方法 对 1 2 48例临床血清标本采用荧光定量 PCR法进行 HBV DNA检测 ,同时采用 ELISA法进行乙肝免疫学对比检测。结果 血清 HBV DNA水平与 HBV血清标志物的表现模式有关。以 HBs Ag( +)、HBe Ag( +)、HBc Ab( +)模式患者的 HBV DNA阳性检出率最高 ,为 97.3 %( 4 99/5 1 3 ) ,DNA平均拷贝数为 8.41× 1 0 7/ml;其次为HBs Ag( +)、HBe Ab( +)、HBc Ab( +)模式 ,HBV DNA阳性检出率为49.4% ( 1 3 3 /2 69) ,平均拷贝数为 2 .3 3× 1 0 5/ml,均显著高于其他 HBVM模式的患者。结论 HBe Ag和 HBV DNA有明显的相关性。定量检测 HBV DNA能真实反映 HBV复制情况 ,为乙型肝炎的诊断及疗效评价提供客观依据。
- 陈学民凡任芝
- 关键词：乙型肝炎病毒定量PCR血清标志物
