冷政伟
- 作品数：47 被引量：154H指数：7
- 供职机构：川北医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省自然科学基金四川省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于生物信息学方法对胰腺癌发生发展关键基因的筛选
- 2022年
- 目的采用生物信息学方法筛选胰腺癌发生发展的关键基因并进行验证。方法从基因表达数据库(GEO)中选择并下载胰腺癌及癌旁组织基因芯片GSE71989、GSE62165、GSE19650,通过GEO2R在线工具筛选基因芯片中胰腺癌与癌旁组织的差异表达基因,使用Venn图分析3个基因芯片共有的差异表达基因;使用STRING网站及Cytscape软件对差异表达基因进行蛋白—蛋白相互作用(PPI)网络分析,筛选出核心差异表达基因;将核心差异表达基因在基因表达谱数据动态分析网页工具(GEPIA)进行生存分析,筛选出与预后相关的差异表达基因;将与预后相关的差异表达基因用GEPIA网站进行表达量分析验证,筛选出胰腺癌发生发展的关键基因。结果从3个基因芯片中筛选出156个差异表达基因,其中上调差异表达基因62个,下调差异表达基因94个。对共3个基因芯片共有的差异表达基因进行STRING网站PPI绘制及Cytoscape软件核心网络分析后,筛选出19个核心差异表达基因。使用GEPIA在线网站对核心差异表达基因进行生存分析及表达验证,筛选出6个核心差异表达基因,即ANLN、CDK1、ECT2、NUSAP1、RRM2、TOP2A,这6个基因均与胰腺癌预后相关,且在胰腺癌组织中的表达均高于癌旁组织(P均<0.05)。结论使用生物信息学的方法发现6个基因可能是胰腺癌癌发生发展中的关键基因,可为胰腺癌的发生机制的研究以及诊断、治疗提供参考。
- 陈科洪潇冯彦超应伟李文菠李钊赵敬兵汪杰周国俊冷政伟
- 关键词：胰腺肿瘤生物信息学差异表达基因
- siRNA沉默Bmi-1表达对胰腺癌PANC-1细胞增殖的抑制作用
- 2011年
- 目的:探讨运用RNAi技术沉默Bmi-1基因对人胰腺癌细胞恶性行为的影响,为胰腺癌基因治疗提供新的靶点和思路.方法:构建反义Bmi-1真核表达载体转染人胰腺癌PANC-1细胞,运用荧光显微镜下观察、MTT、Western blot、流式细胞术检测转染效果及细胞周期、凋亡变化.结果:成功构建反义Bmi-1真核表达载体并且转染后细胞Bmi-1表达明显下降(175.39±1.76vs318.54±3.53,P<0.05),实验组细胞与对照组相比,增殖受到抑制,周期出现阻滞(G0/G1:60.480%±1.545%vs40.520%±2.865%;S:12.68%±2.654%vs35.740%±2.074%,均P<0.05),凋亡明显增加(21.670%±2.948%vs7.870%±0.900%,P<0.05).结论:Bmi-1的siRNA能明显抑制Bmi-1的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.Bmi-1可作为胰腺癌基因治疗的靶点.
- 冷政伟殷涛夏清华张万里王国斌陶凯雄
- 关键词：胰腺癌小干扰RNA流式细胞术
- 原发性肝细胞肝癌与大肠癌肝转移的发病机制与临床诊治研究
- 李敬东王小飞龚建平张广军赖星彭涛吴轲周彤游川冷政伟程蕾
- 原发性肝细胞癌是最常见的恶性肿瘤之一，近年来发病率呈增长趋势，其预后较差，超过80％的患者在诊断时即已失去治愈机会，其致死率高居全球癌症相关死亡的第三位。近年中国结直肠癌发病率的上升趋势十分明显，结直肠癌对人类健康最大的...
- 关键词：
- 关键词：肝癌大肠癌肝转移
- 结肠癌肿瘤干细胞富集方案的比较被引量：1
- 2018年
- 目的比较3种富集结肠癌HCT116细胞肿瘤干细胞（CSC）培养方案的效率。方法含不同浓度生长因子的杜尔伯科改良伊格尔（DMEM）/F12无血清培养基（分为G1、G2、G3组）悬浮培养HCT116细胞14 d获得细胞球，其中G1组方案：10 ng/ml上皮生长因子（EGF）＋10 ng/ml成纤维细胞生长因子（bFGF）；G2组：20 ng/ml EGF＋10 ng/ml bFGF；G3组：20 ng/ml EGF＋20 ng/ml bFGF。流式细胞术（FCM）检测细胞球中CD133^＋CD44^＋、CD133^＋、CD44^＋比例变化及细胞周期变化；实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测细胞球中CSC基因（CD133、CD44、CD166、CD66c） mRNA表达变化；Sphere-forming assay检测细胞球自我更新能力变化；平板克隆形成实验检测细胞体外成瘤能力变化；CCK-8检测细胞增殖能力变化。结果FCM检测3组细胞中CD133^＋细胞比例分别为0.167±0.025、0.233±0.031和0.030±0.010，差异有统计学意义（F=58.020，P=0.000）；3组细胞中CD133^＋CD44细胞比例分别为0.033±0.006、0.097±0.031和0.023±0.006，差异有统计学意义（F=14.233，P=0.005）；FCM检测细胞周期结果：3组细胞G0/G1期比例分别为52.533±0.929，66.893±1.057和57.377±1.256，差异有统计学意义（F=134.945，P=0.000）；3组细胞S期比例分别为35.770±0.799、32.443±1.110和34.463±0.396，差异有统计学意义（F=12.471，P=0.007）；3组细胞G2/M期比例分别为11.697±0.527、0.533±0.117和8.163±0.872，差异有统计学意义（F=278.685，P=0.000）。Real-time PCR检测结果：3组CSC基因CD133、CD44、CD166、CD66c分别为G1组：2.222±0.830、26.858±3.084、22.556±2.493和14.737±2.105，G2组：6.034±0.978、66.149±2.643、64.514±5.823和54.670±2.052，G3组：2.208±0.898、23.591±4.995、23.377±1.821和6.877±0.449；各组上述基因表达比较，差异有统计学意义（F=17.851、121.788、119.265、668.579）。Sphere-forming assay检测结果：3组细胞形成细胞球分别为175.000±22.9
- 李伟男李勇李利发周何杨刚钟晓蓉冷政伟李敬东
- 关键词：结肠癌肿瘤干细胞
- Bmi-1通过抑制INK4A-ARF靶点促进胰腺癌发生的实验研究
- 目的:探讨运用RNAi技术沉默Bmi-1基因对人胰腺癌细胞恶性行为的影响,为胰腺癌基因治疗提供新的靶点和思路。 方法:构建反义Bmi-1真核表达载体转染人胰腺癌PANC-1细胞,运用MTT、荧光显微镜下观察、Wester...
- 冷政伟
- 关键词：胰腺癌BMI-1P16INK4A甲基化流式细胞术
- 文献传递
- 腹腔镜肝切除术中出血的预防及处理被引量：13
- 2016年
- 目的：探讨腹腔镜肝切除术中出血的预防及处理措施。方法：回顾分析2012年9月至2015年9月由同一术者施行的64例腹腔镜肝切除术患者的临床资料,其中原发性肝癌41例,肝胆管结石病17例,肝血管瘤6例。统计分析手术时间、术中出血量、围手术期输血率、术后胃肠道排气时间、住院时间、术后并发症情况。结果：64例中,11例行右半肝切除术,21例行左半肝切除术,8例行肝脏Ⅱ、Ⅲ段切除术,6例行肝脏Ⅶ段切除术,5例行肝脏Ⅷ段切除术,7例行肝脏Ⅵ段切除术,6例行局部不规则性切除。5例因出血中转开腹,其中2例行右半肝切除术、2例行左半肝切除术、1例行肝脏Ⅷ段切除术。手术时间88~362 min,平均（227±102）min;术中出血量90~850 ml,平均（373±210）ml;围手术期输血率为9.4%（6/64）;术后胃肠道功能恢复时间2~5 d,平均（3.0±0.5）d;术后住院5~12 d,平均（7.0±3.0）d。无围手术期死亡病例,7例术后发生并发症,经治疗后康复出院。结论：腹腔镜肝切除术作为肝脏疾病的微创治疗手段安全、可行,有效的预防及控制出血是腹腔镜肝切除术成功的关键因素。
- 杨刚李勇李伟男冷政伟李敬东
- 关键词：肝切除术腹腔镜检查出血
- 术后经肝动脉化疗栓塞治疗肝细胞癌疗效的Meta分析被引量：5
- 2017年
- 目的评价术后经肝动脉化疗栓塞（TACE）对可切除原发性肝细胞癌患者的疗效。方法计算机检索中文数据库中国生物医学文献数据库、中国知网、维普、万方数据库以及外文数据库PubMed、OVID、Embase、Cochranelibrary的相关文献，所有文献均截止于2016年1月。使用改良后的Jadad及Newcastle—OttawaScale文献质量评分表进行质量评估。对符合纳入标准的研究采用Stata12．0软件进行统计分析。结果本Meta分析共纳入随机对照研究（RCT）1篇、病例对照研究14篇，共2184例患者（肝切除术联合术后TACE组1097例，单独肝切除术1087例）。分析显示：术后行TACE组1年总体生存率提高（RR=1．13，95％CI：1．03，1．24，P〈0．05），3年总体生存率提高（RR=1．33，95％CI：1．15，1．53，P〈0．05），5年总体生存率差异无统计学意义（RR=1．21，95％CI：0．95，1．15，P〉0．05）。根据术中所示肿瘤直径（〉5cm）以及有无多发结节、血管侵犯进行亚组分析，结果显示TACE在伴有以上情况的患者中更能发挥重要作用（无危险因素组：RR=1．10，95％CI：0．97，1．25，P〈0．05；伴危险因素组：RR=1．16，95％CI：1．02，1．32，P〈0．05）。结论手术后行TACE能提高原发性肝细胞癌患者的1年、3年生存率，特别是对合并上述危险因素的患者。手术后行TACE可作为一种常规的治疗方式。
- 李伟男杨刚冷政伟李强李勇李敬东
- 关键词：原发性肝细胞肝癌肝切除肝动脉化疗栓塞疗效
- 淤血肝组织切除对大鼠肝切除术后早期残肝功能的影响
- 2016年
- 目的探讨淤血肝组织切除对大鼠肝切除术后早期残肝功能的影响。方法健康雄性SD大鼠75只,按随机数字表法随机分为3组,各25只。非淤血组：肝中叶＋左叶切除;淤血组：肝中叶＋左叶切除＋尾状叶静脉结扎淤血;淤血切除组：肝中叶＋左叶切除＋尾状叶静脉结扎淤血3 min后切除。术后24 h检测血TB,并行肝组织病理学检查,免疫组化法检测肝组织CD68标记的巨噬细胞浸润情况,Western blot检测cleaved casepase-3蛋白表达。观察3组TB、肝组织病理学检查情况、cleaved casepase-3蛋白表达以及生存情况。检测指标比较采用单因素方差分析和LSD-t检验,生存分析采用Kaplan-Meier曲线和Log-rank检验。结果术后24 h非淤血组、淤血组、淤血切除组TB分别为（15.9±1.7）、（19.3±2.0）、（16.4±1.5）μmol/L,淤血组明显高于非淤血组、淤血切除组（LSD-t=3.14,2.68;P〈0.05）。淤血组空泡样变性细胞、巨噬细胞较非淤血组增多,而淤血切除组空泡样变性细胞、巨噬细胞减少。淤血组肝组织cleaved casepase-3蛋白表达强于非淤血组及淤血切除组。3组大鼠术后总体生存率分别为75%、15%、60%,淤血组明显低于非淤血组和淤血切除组（χ~2=14.3,8.1;P〈0.05）。结论淤血肝组织切除能明显改善大鼠肝切除术后早期残肝功能损害,并降低大鼠死亡率,其机制可能与减少细胞凋亡和减轻炎症反应有关。
- 李敬东唐小龙闫在华冷政伟谢梦忆
- 关键词：肝功能试验胆红素
- 碱性成纤维细胞生长因子在富集结直肠癌肿瘤干细胞中的作用被引量：4
- 2020年
- 目的研究不同浓度碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作用于结直肠癌细胞不同时间,富集肿瘤干细胞的效果。方法结直肠癌DLD-1细胞分别在含5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL bFGF的无血清培养基中悬浮培养,分为G1、G2、G3组,设置培养时间梯度为10 d、20 d、30 d,获得球细胞。采用流式细胞术(FCM)检测细胞球中的CD44^+、CD133^+及CD44^+CD133^+双阳性的细胞表达比例,Real-time PCR检测球细胞中的干细胞基因(KLF4、Nanog);上皮间质转化基因(E-cadherin、Snail);Wnt/β-catenine通路基因(Wnt-3a)的mRNA表达情况,成球实验检测细胞球的自我更新能力。结果 FCM检测结果:CD44^+阳性表达的细胞表达以G2组20 d最高,CD133^+及CD44^+CD133^+双阳性的细胞表达均以G2组20 d及G3组10 d最高,差异有统计学意义(F=98.895、147.641、13.321,P<0.05)。Real-time PCR检测结果:各组中KLF4、Nanog、Snail以及Wnt-3a mRNA的表达均以G2组20 d表达最高(F=2.424、7.694、2.951、3.771,均P<0.05),E-cadherin基因G2组20 d mRNA表达最低(G2组30 d、G1组10 d除外) (F=10.620,P<0.05)。成球实验结果:各组比较G1组20 d和G2组20 d成球数量明显多于其他组,差异具有统计学意义(F=14.279,P<0.01);但G1组20 d和G2组20 d比较,无统计学差异(t=0.605,P=0.578)。结论碱性成纤维细胞生长因子无血清悬浮培养能够有效富集肿瘤干细胞,其中G2组培养20 d较其余组能更有效地富集结直肠癌肿瘤干细胞。
- 周国俊冯彦超黄理政孙成杰吴妮莎侍琳雷蕾钟晓蓉冷政伟
- 关键词：结直肠癌碱性成纤维细胞生长因子
- 肿瘤干细胞及Wnt/β-catenin信号通路在结直肠癌肝转移中的作用被引量：4
- 2019年
- 结直肠癌(colorectal cancer,CRC)在女性消化系统肿瘤中居第2位,男性中居第3位[1]。肝脏是CRC远处播散的最常见部位,约有60%的CRC患者在病程中出现结直肠癌肝转移(colorectal liver metastases,CLM),CLM已成为CRC患者死亡的主要原因之一[2]。肿瘤干细胞(cancerstem cells,CSCs)是指一小部分存在于肿瘤组织中,具有自我更新、无限增殖与多向分化潜能的细胞。越来越多的证据表明CSCs与肿瘤的发生、发展、耐药、转移复发等生物学行为密切相关[3]。因此,从CSCs的角度深入探索CLM的机制,将为我们防治CLM提供新的思路。
- 李孝琼肖云峰吴妮莎徐黎明罗博周国俊冷政伟
- 关键词：肿瘤干细胞结直肠肿瘤肿瘤转移信号通路
