冯思源
- 作品数：13 被引量：25H指数：3
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- 牛源多杀性巴氏杆菌粘附相关基因的体内表达及FimA蛋白功能的研究
- 多杀性巴氏杆菌是一种非运动性的、兼性球状杆菌，属于革兰氏阴性菌，巴氏杆菌科巴氏杆菌属。该菌能够引起多种动物感染，导致急性、败血性传染病，包括禽霍乱、牛出血性败血症、猪肺疫和猪萎缩性鼻炎、兔出血性败血症，甚至受到其感染的犬...
- 冯思源
- 关键词：基因表达突变株
- 文献传递
- 牛A型多杀性巴氏杆菌新型保护性抗原的筛选及鉴定被引量：1
- 2016年
- 为筛选牛A型多杀性巴氏杆菌新型保护性抗原,采用生物信息学方法,对牛A型多杀性巴氏杆菌Pm CQ 2基因组中功能未知基因进行分析,从中筛选出22个具有信号肽的蛋白编码基因进行克隆表达。以Pm CQ2基因组D N A为模板,22个基因经PCR扩增分别克隆到载体p ET-30a(+)或p ET-32a(+)上,转入E.coli BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测,22个基因均获得表达。W estern-blot检测发现有8个重组蛋白与感染Pm CQ2的犊牛血清具有良好的免疫反应,以其制备抗原免疫昆明小鼠,经ELISA检测免疫小鼠血清抗体水平后,采用2 LD50的Pm CQ2腹腔攻毒测定其免疫保护效果。结果表明,8个重组蛋白均能诱导小鼠产生较高水平的抗体,其中3号和9号蛋白免疫小鼠后抗体效价达到1∶12 800,且3号和9号蛋白免疫保护效果最好,免疫保护率均为30%,其余重组蛋白的免疫保护率均较低。
- 李能章刘舒萍程蓉冯思源张继鑫李春明彭远义
- 牛源A型多杀性巴氏杆菌强毒株CQ2和弱毒株CQ6毒力相关基因分析.被引量：2
- 2015年
- 为探讨牛源A型多杀性巴氏杆菌强毒株(PmCQ2)与弱毒株(PmCQ6)其所含毒力基因的差异,本研究选择了多杀性巴氏杆菌17个与毒力相关的基因(tbpA、hgbA、hgbB、tonB、ptfA、pfhA、nanB、nanH、toxA、oma87,sodA、sodC、fimA、hsf-1、tadD、pmHaS、hadA)进行检测。试验结果显示,所检测的17个毒力相关基因中,有14个基因在PmCQ2和PmCQ6中都存在,tox A和hgb B基因在两菌株中均未检出,tadD基因仅存在于PmCQ6中。以上结果提示,CQ2株与CQ6株之间的毒力差异原因可能是:除上述所检测的毒力相关基因外,可能还存在其他毒力相关基因;二者毒力基因的表达调控存在差异。
- 潘婷婷冯思源杜慧慧李能章王自力魏学良彭远义
- 关键词：强弱毒株毒力相关基因
- 牛源F型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及其LD50测定
- 2013年,从重庆市某肉牛场发生呼吸道疾病的病牛肺组织中分离到1株细菌,经细菌形态和培养特性观察、生化试验、小鼠攻毒试验及细菌16S rRNA基因序列分析,初步判定该细菌为多杀性巴氏杆菌.进一步通过多杀性巴氏杆菌种特异性...
- 杨宝凤马建伟彭远义张熠李能章吴俊容吴亭李海娥李春明袁晓娟冯思源
- 关键词：药敏试验免疫功能
- 文献传递
- 1株牛变形杆菌的分离鉴定及其药物敏感性研究
- 从重庆市某肉牛场病牛关节液中分离到1株细菌,经细菌形态和培养特性观察、生化试验、小鼠攻毒试验及细菌16S rRNA基因序列分析,判定该菌为变形杆菌.药敏试验表明,分离菌株对头孢呋辛、丙氟哌酸等药物敏感.
- 张熠杨宝凤李能章李海娥李春明袁晓娟冯思源马建伟彭远义
- 关键词：发病机制药物敏感性
- 文献传递
- 牛源A型多杀性巴氏杆菌pm 0979和pm 0442基因编码蛋白对小鼠的免疫保护性研究被引量：3
- 2014年
- 为评价牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌(Pm)pm0979和pm0442基因编码蛋白的免疫保护效果,本研究以牛源PmCQ2株基因组DNA为模板,经PCR扩增得到pm0979、pm0442全长基因,将其分别克隆到pET-30a、pET-32a载体并转化BL21(DE3)大肠杆菌,经IPTG诱导表达,分别获得大小约41.8 ku(rPM0979)和21.6 ku(rPM0442)的重组蛋白;将其亲合层析纯化后分别免疫小鼠,以PmCQ2株进行攻毒试验,测定其抗体产生情况和保护效果。结果表明,两种重组蛋白均可以诱导小鼠产生较高水平的抗体;其中rPM0979对小鼠的免疫保护高于rPM0442,保护率可达60%。结果表明,重组蛋白PM0979可作为Pm的一种疫苗候选蛋白,为进一步的疫苗研制奠定了基础。
- 冯思源马建伟杜慧慧李能章彭远义
- 关键词：编码蛋白免疫保护性
- 牛源多杀性巴氏杆菌新型交叉保护性抗原的筛选被引量：5
- 2016年
- 为了筛选多杀性巴氏杆菌潜在的交叉保护性抗原,首先对牛源多杀性巴氏杆菌PmCQ2株(A型)、PmCQ6株(A型)、PmB株(B型)、PmF株(F型)全基因组序列进行分泌蛋白及膜蛋白预测,并使用Signal、TMMHM在线分析筛选到48个候选共有抗原基因;然后分别克隆于pET-28α中构建原核重组表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达,SDS-PAGE检测获得31个重组表达蛋白。间接ELISA检测重组蛋白对3种不同血清型牛多杀性巴氏杆菌多抗的反应原性,发现13个重组蛋白具有较强的反应原性。最后选择5个重组蛋白免疫小鼠后,分别采用10LD50PmCQ2、PmB和PmF进行攻毒保护性试验,结果显示:r-PmCQ2_1g0376免疫后的小鼠对PmCQ2和PmB的攻毒保护率为50%和30%,对PmF则没有保护性;r-PmCQ2_4g0132免疫后对PmCQ2、PmB和PmF株的攻毒保护率分别为80%,20%和10%;r-PmCQ2_1g0311免疫后的小鼠对PmCQ2的攻毒保护率为30%,对PmB和PmF株均无保护性。本试验筛选出2个交叉保护性抗原,可以不同程度保护同源或异源菌株的攻击,为多杀性巴氏杆菌新型疫苗候选蛋白的筛选奠定了基础。
- 杜慧慧潘婷婷伍晨露秦小彬雷桂花刘亚净冯思源彭远义
- 关键词：生物信息学
- 牛源A型多杀性巴氏杆菌强弱毒株CQ2、CQ6毒力相关基因分析
- 为探讨牛源A型多杀性巴氏杆菌强毒株(PmCQ2)与弱毒株(PmCQ6)其所含毒力基因的差异,本研究选择了多杀性巴氏杆菌17个与毒力相关的基因(tbpA、hgbA、hgbB、tonB、ptfA、pfhA、nanB、nanH...
- 潘婷婷冯思源杜慧慧李能章王自力魏学良彭远义
- 关键词：强毒株弱毒株毒力基因
- 牛源A型多杀性巴氏杆菌强弱毒株相关毒力基因表达差异分析
- 为探讨导致牛源A型多杀性巴氏杆菌毒力差异的原因,本研究选择了7个巴氏杆菌病相关毒力基因(ompA、ompH、pfhB2、plpE、hasR、pm0979、pm0442)对两株毒力迥异的牛荚膜血清A型PmCQ2和CQ6进行...
- 龙青山李能章张宏福吴俊容冯思源李春明张翼彭远义
- 关键词：毒力基因免疫保护
- 文献传递
- 牛源多杀性巴氏杆菌交叉保护性抗原的筛选被引量：2
- 2015年
- 为筛选牛源多杀性巴氏杆菌(Pm)交叉保护性抗原,本研究以A型Pm CQ2株基因组为模板,对其omp A、omp H、plp E、pm0979、P6和pfh B基因分别进行扩增,克隆于相应表达载体并进行原核表达,同时对表达产物进行纯化及western blot鉴定。将纯化的重组蛋白免疫小鼠,分别测定其对2 LD50剂量的A型和B型Pm的攻毒保护效果。结果表明,重组蛋白r Omp A、r Omp H、r Plp E、r Pm0979、r P6和r Pfh B对A型Pm CQ2株的攻毒保护率分别为20%、60%、70%、40%、20%和10%,对B型Pm CVCC450株的攻毒保护率分别为0、30%、40%、20%、10%和0,表明重组蛋白r Plp E、r Omp H和r Pm0979可以针对不同血清型的Pm提供较好的交叉保护作用。本研究为牛源Pm新型疫苗的研制奠定了基础。
- 马建伟吉佳乐刘亚静李春明冯思源李能章彭远义
- 关键词：多杀性巴氏杆菌
