任党丽
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 不同浓度TGF-β对内皮细胞锌指基因ZNF580表达的影响
- 2014年
- 目的探讨不同浓度转化生长因子(TGF-β)对内皮细胞锌指基因ZNF580表达的影响。方法以不同浓度(0.25~4 ng/ml)的TGF-β刺激EA.hy926内皮细胞12 h,提取细胞总RNA,通过半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析ZNF580基因在内皮细胞中的表达情况。结果成功提取内皮细胞总RNA并进行RT-PCR反应;当TGF-β浓度从0.25~2 ng/ml逐渐增加时,ZNF580的表达呈逐渐下降趋势(P<0.05,P>0.01);但继续增加TGF-β刺激浓度至4 ng/ml,ZNF580的表达又有所回升(P<0.05)。结论随TGF-β刺激浓度逐渐升高,EA.hy926内皮细胞中ZNF580基因表达呈先降低后升高变化,表明ZNF580很可能是受TGF-β信号转导通路调控的核转录因子,ZNF580和Smad2间的相互作用及ZNF580转录活性的改变可能进一步影响下游相应靶基因的转录,进而影响内皮细胞的功能。
- 韩国亮任党丽赵英张梅张文成罗玉玉
- 关键词：动脉粥样硬化TGF-Β转录因子
- 酵母双杂交筛选与转录因子ZNF580相互作用的蛋白被引量：1
- 2012年
- 目的:寻找可能与锌指转录因子ZNF580存在相互作用的蛋白。方法:以ZNF580基因开放阅读框作为模版,PCR扩增后连接入酵母表达质粒pGB。诱饵质粒pGB-ZNF580经测序验证后转化酵母菌株Y190,人胎脑cDNA文库亦转化到能稳定表达诱饵蛋白的Y190酵母菌株中,并铺到含有营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-His/-Leu)的培养皿上进行初步筛选。所得阳性克隆再进行β-半乳糖苷酶克隆转移滤纸实验进一步去除假阳性。随机挑取部分阳性克隆,逐一转化入含有诱饵质粒的Y190酵母菌进行一对一验证。分离阳性克隆质粒测序,并应用生物信息学方法分析阳性克隆cDNA编码的蛋白。结果:确定了14种与ZNF580可能存在相互作用的蛋白。结论:初步探讨了ZNF580的功能及其可能参与的信号转导通路,为进一步研究转录因子ZNF580参与动脉粥样硬化的机制奠定了实验基础。
- 罗玉玉杨蓉孔麟麟任党丽张文成
- 关键词：转录因子酵母双杂交蛋白相互作用
