仲晓芳
- 作品数：33 被引量：24H指数：3
- 供职机构：吉林省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 耐盐转基因大豆事件FA8015旁侧序列分离及定性PCR检测被引量：2
- 2018年
- 本研究前期利用转基因技术,将菠菜(Atriplex hortensis)甜菜碱醛脱氢酶编码基因Ah BADH导入栽培大豆Williams 82中,获得耐盐性较强的转基因大豆事件FA8015。为进一步加快该转基因事件生物安全评价,本研究分离了FA8015外源T-DNA旁侧序列,并依据其序列特征,建立事件特异性检测方法。Southern杂交结果表明,转基因事件FA8015外源T-DNA为单拷贝插入。利用基因组重测序技术,获得转基因大豆事件FA8015的基因组信息,并与参考基因组Williams 82做比较,初步确定转基因大豆事件FA8015外源T-DNA片段整合位点。然后根据整合位点,设计融合大豆基因组和T-DNA序列的引物,获得了1 160 bp的左边界旁侧序列,包括405 bp的大豆基因组序列和750 bp的T-DNA序列;右边界获得了1 254 bp的旁侧序列,其中601 bp为T-DNA片段,653 bp为大豆基因组序列;序列分析证明转基因事件FA8015的T-DNA整合位点为Chr15染色体的25129882位点,整合方式为正向单拷贝插入,与Southern杂交和重测序结果一致。依据PCR结果设计事件特异性引物,建立了转基因大豆事件FA8015转化体特异性检测方法。该方法特异性强、灵敏度高,可快速识别该转基因大豆事件的身份,为该转化事件及其衍生品的安全性和监管提供技术支撑。
- 马阔仲晓芳牛陆赵倩倩杨向东
- 关键词：大豆耐盐旁侧序列耐盐
- 一种用于检测高油酸转基因大豆E2D5022的侧翼序列及其检测方法
- 本发明公开了一种用于检测高油酸转基因大豆E2D5022的侧翼序列及其检测方法。本发明首次分离了高油酸转基因大豆E2D5022外源插入片段左边界侧翼序列和右边界侧翼序列。本发明同时公开了利用高油酸转基因大豆E2D5022外...
- 杨向东董英山杨静牛陆仲晓芳邢国杰赵倩倩
- 文献传递
- 一年生野生大豆(Glycine soja)和栽培大豆(G.max)的DNA甲基化多样性和遗传多样性研究及copia-like反转录转座子反转录酶分析
- 大豆属于豆科（Leguminosae）蝶形花亚科（Papiliomatae）菜豆族下的一个小属。一年生野生大豆（Glycine soja）和栽培大豆（G．max）都是分属这个属的两个种。一年生野生大豆（G． soja）是...
- 仲晓芳
- 关键词：反转录转座子作物资源DNA甲基化
- 抗病转基因大豆事件B4J8049外源T-DNA整合位点分析及特异性检测被引量：3
- 2018年
- 大豆疫霉根腐病是由卵菌纲病原菌—疫霉菌(Phytophthora sojae)引起的大豆毁灭性病害之一。本研究前期利用农杆菌介导转化技术,将广谱抗病基因hrpZm导入栽培大豆Williams 82,获得高抗疫霉根腐病转基因大豆新品系B4J8049,并已进入环境释放试验阶段。为进一步推进该转化事件的生物安全评价及应用,本研究采用热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)方法分析外源T-DNA整合位点右边界序列,并依据其序列特征,建立该转化事件特异性检测方法。Southern杂交检测结果表明,转基因大豆事件B4J8049外源T-DNA插入拷贝数为1个。根据外源T-DNA插入片段序列设计3条嵌套特异性检测引物,与简并引物组合进行TAIL-PCR扩增反应,获得外源TDNA插入位点右边界序列。BLAST分析(https://soybase.org/)表明,外源T-DNA片段以单拷贝形式反向插入的方式整合到大豆基因组中第8号染色体的187 824位点。在此基础上,依据插入位点右边界序列设计检测引物,建立转基因大豆事件B4J8049特异性检测方法。本研究为该抗病转基因事件B4J8049及其衍生产品特异性检测提供依据。
- 包婉莹仲晓芳杜茜赵倩倩杨向东
- 关键词：转基因大豆整合位点侧翼序列
- 转GbNPR1基因提高烟草抗病性被引量：1
- 2015年
- 病害是造成烟草减产和品质降低的主要因素,而利用生物技术提高烟草抗病性是解决此问题的有效途径,其中包括利用与植物抗病性密切相关的关键因子如病程相关基因非表达子(non-expressor of pathogenesis-related genes1,NPR1)。本研究利用源于海岛棉的Gb NPR1基因,表皮特异性启动子CUT1和组成型启动子35S构建两个植物表达载体35S-Gb NPR1和CUT1-Gb NPR1,经农杆菌介导法分别转化烟草。T0代及T1代转化植株PCR检测证明,目的基因已整合到核基因组中。T1代植株RT-PCR分析表明,Gb NPR1基因在转录水平得以表达。bar试纸条检测为阳性,证明和Gb NPR1连锁的草甘膦基因能够正常转录和翻译表达。将阳性植株进行烟草病菌赤星病、炭疽病和低头黑病等三种病害的病原菌离体接菌实验,研究结果表明:转CUT1-Gb NPR1载体的转基因烟草虽然较转35S-Gb NPR1载体的烟草对三种病菌的抗性稍低,但较野生型烟草相比具有较高抗性。转Gb NPR1基因的烟草能提高对低头黑病和炭疽病的抗性为首次报道。
- 王月琳林春晶韦正乙王云鹏仲晓芳邢少辰
- 关键词：烟草病程相关基因GBNPR1基因烟草病害农杆菌转化抗病性
- 三种基因型羽衣甘蓝筛选适合叶绿体转化材料
- 2016年
- 以3种不同基因型的羽衣甘蓝品种"皱叶红心"、"白鸥"和"红鸥"为试材,以MS培养基为基础培养基,分别添加不同质量浓度的6-BA、NAA、IBA激素,筛选不同品种真叶叶片不定芽的诱导频率,同时确定不同材料对除草剂双丙氨膦和抗生素壮观霉素的致死临界质量浓度,为羽衣甘蓝的叶绿体转化研究筛选受体材料。结果表明:影响羽衣甘蓝叶片诱导不定芽因素中,激素质量浓度的影响比品种的影响更大;当诱导培养基中的6-BA质量浓度为1.0mg/L、NAA质量浓度为0.1mg/L时,诱导效果最佳,是3个品种的最适培养基;按照由高到低的顺序排列,3个品种的不定芽诱导率依次为"红鸥"、"白鸥"和"皱叶红心",因此择优利用品种"红鸥"作为后续转基因研究的受体材料;分别利用双丙氨膦和壮观霉素的不同质量浓度梯度进行筛选,研究二者对"红鸥"品种叶片分化的影响,发现双丙氨膦和壮观霉素的最低抑制质量浓度分别为4mg/L和50mg/L。该研究结果对今后利用叶绿体遗传转化技术改良羽衣甘蓝品种提供了技术支持。
- 平璐顾德峰韦正乙仲晓芳林春晶邢少辰王云鹏
- 关键词：羽衣甘蓝不定芽诱导叶绿体转化高频再生
- GmLecRLK基因在增强植物对胞囊线虫病抗性中的应用
- 本发明提供了GmLecRLK基因在增强植物对胞囊线虫病抗性中的应用，属于生物育种技术领域。本发明的GmLecRLK基因是从大豆胞囊线虫抗源材料中克隆的，能够编码一种G型凝集素类受体激酶。接种大豆胞囊线虫后，植物体内GmL...
- 张原宇杨向东杨静牛陆董英山刘斯祺魏嘉仲晓芳马瑞邢少辰蔡琴安
- Hg-rps-23基因RNAi转基因大豆对大豆胞囊线虫的抗性研究被引量：1
- 2016年
- 大豆胞囊线虫（Soybean Cyst Nematode,SCN）是一种极具破坏性的大豆寄生虫,一般可造成大豆减产10%~20%。利用植物介导RNAi是培育抗虫转基因植物新品种的有效手段之一。本研究从大豆胞囊线虫中获得了编码参与线虫m RNA代谢的关键基因-核糖体蛋白基因Hg-rps-23。采用农杆菌介导法将Hg-rps-23 RNA干扰片段导入Williams82中。PCR和Southern杂交检测结果表明,外源RNAi片段已导入受体大豆品种。病土接种鉴定结果表明,转基因大豆对大豆胞囊线虫3号生理小种抗性水平显著提高,表明利用植物介导RNAi可以有效提高大豆抗胞囊线虫水平。本研究为大豆抗胞囊线虫新材料的创制及新品种培育提供了一条新的途径。
- 仲晓芳杨向东张金花杨静邢国杰郭东全牛陆董英山
- 关键词：大豆胞囊线虫RNAI
- 一种适于少量样本RNAi提取的辅助固定装置
- 本实用新型公开了一种适于少量样本RNAi提取的辅助固定装置，包括管套、离心管、高灵敏度压力传感器、重量显示器、计时表和微型振动马达，所述连接板的内侧分别设有第一放置板与第二放置板，所述管套安装在第一放置板的内侧，且管套的...
- 仲晓芳王云鹏韦正乙邢少辰蔡玉红
- 文献传递
- 高油酸转基因大豆事件EB8072外源插入片段侧翼序列及其应用
- 本发明提供一种高油酸转基因大豆事件EB8072外源插入片段侧翼序列及其应用，属于植物生物技术领域。具体地，涉及一种高油酸转基因大豆事件EB8072外源插入片段左、右边界侧翼序列及其应用。本发明公开的转基因大豆事件EB80...
- 杨向东杨静仲晓芳牛陆贺红利邢国杰郭东全钱雪燕姚瑶
