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巴西橡胶树乳管高效表达焦磷酸酶基因双元表达载体的构建: 2009年; 巴西橡胶树橡胶生物合成过程中,焦磷酸酶(PPase)具有重要的调控作用。通过基因工程技术提高其在乳管中的表达,有可能促进橡胶的生物合成,从而提高橡胶树产量。笔者以巴西橡胶树叶片为材料提取DNA,用特异引物经PCR扩增获得了378bp的REF启动子片段,该片段序列与NCBI报道的REF序列间的同源性分别是98.68%和99.47%。以胶乳为材料提取总RNA,用特异引物经RT-PCR方法获得了2310bp的V-PPase基因片段,该片段序列与NCBI报道的V-PPase基因序列一致。然后通过酶切和连接,将REF启动子和V-PPase基因重组到植物表达载体pCAMBIA1301中,构建了含有潮霉素磷酸转移酶基因(hptⅡ)的乳管高效表达V-PPase基因的载体pC1301RV,然后用冻融法将其导入根癌农杆菌EHA105,为进一步通过转基因技术转化橡胶树奠定了基础。; 于波吴华玲曾日中; 关键词：橡胶树焦磷酸酶根癌农杆菌

橡胶树皮乳管组织茉莉酸诱导相关因子AP2/EREBP基因的克隆与表达分析被引量：4: 2010年; 茉莉酸(jasmonic acid,JA)可诱导橡胶树(Hevea brasiliensis Muell.Arg.)乳管分化,是乳管分化的关键信号分子。目前,对JA诱导橡胶树乳管分化的分子机理仍然不清楚。在前期研究中通过筛选JA刺激乳管分化时期的橡胶树树皮组织cDNA差减文库,获得了4条与茉莉酸诱导乳管分化相关的AP2/EREBP家族转录因子基因的EST。该研究在此基础上,采用RACE法完整地克隆了这4个AP2/EREBP转录因子基因的开放阅读框,蛋白氨基酸序列分析表明其中3个属于ERF亚类,1个属于RAV亚类;表达分析发现,这4个基因在乳管分化时期的橡胶树树皮组织的表达受JA诱导,随JA处理时间的延长,其表达量先增强后减弱,推测它们可能在JA诱导橡胶树乳管分化过程中起着重要的调控作用。; 吴华玲于波程芹芹曾日中段翠芳聂智毅黎瑜; 关键词：巴西橡胶树 AP2/EREBP转录因子茉莉酸乳管分化

一种橡胶树试管苗无菌根体细胞胚发生植株再生方法: 本发明提供了一种橡胶树试管苗无菌根体细胞胚发生植株再生方法，主要包括：选择橡胶树试管苗无菌幼根，直径为0.8～1.2mm，切成长度为1.0～1.5cm的根段，在胚性愈伤组织诱导培养基暗培养25～40天；再转入继代培养基，...; 周权男李哲孙爱花黄天带于波黄华孙林位夫汪秀华; 文献传递

差异显示技术在橡胶树分子生物学研究中的应用: 2009年; 差异显示技术是从分子水平研究细胞、组织、器官中基因结构和表达变异的手段之一,在巴西橡胶树研究中也已有应用。本文从DNA、RNA和蛋白质水平上介绍了近年来差异显示技术在橡胶树分子生物学研究中的进展,并对其前景作了展望。; 吴华玲于波段翠芳曾日中; 关键词：巴西橡胶树基因分子标记

根癌农杆菌介导的巴西橡胶树胚性悬浮细胞的遗传转化被引量：9: 2012年; 为了建立橡胶树胚性悬浮细胞遗传转化体系,用根癌农杆菌EHA105(携带pCAMBIA1301,含有gusA和hptⅡ)侵染胚性悬浮细胞团,用GUS检测的方法分析了共培养时间和菌液浓度对转化效率的影响;同时,测定了胚性细胞团对潮霉素敏感性。结果表明,适宜的共培养时间为3天,适宜的菌液浓度为OD600=0.4～0.6。潮霉素的致死剂量为15mg/L。使用大约1g鲜重的胚性细胞团,经过转化和选择培养,获得53块抗性愈伤组织,经诱导获得7个体细胞胚。GUS检测和PCR鉴定证实了gusA基因已经整合到橡胶树基因组中。本研究为根癌农杆菌介导的橡胶树胚性悬浮细胞遗传转化体系建立奠定了基础。; 于波吴华玲黄天带戴雪梅; 关键词：橡胶树根癌农杆菌胚性悬浮细胞

一种橡胶树试管苗无菌根体细胞胚发生植株再生方法: 本发明提供了一种橡胶树试管苗无菌根体细胞胚发生植株再生方法，主要包括：选择橡胶树试管苗无菌幼根，直径为0.8～1.2mm，切成长度为1.0～1.5cm的根段，在胚性愈伤组织诱导培养基暗培养25～40天；再转入继代培养基，...; 周权男李哲孙爱花黄天带于波黄华孙林位夫汪秀华; 文献传递

巴西橡胶树橡胶粒子研究进展被引量：13: 2009年; 橡胶粒子是橡胶树乳管细胞质中进行橡胶生物合成的一种特殊细胞器,其内部的主要成分橡胶烃分子,是天然橡胶的直接来源。橡胶生物合成是在橡胶粒子膜上进行的,橡胶转移酶和橡胶延长因子等是参与橡胶生物合成的重要橡胶粒子膜蛋白,它们决定着橡胶粒子的橡胶生物合成速率,并影响橡胶树胶乳产量和橡胶质量。橡胶粒子膜上存在与橡胶生物合成相关的茉莉酸和乙烯信号响应蛋白,茉莉酸、乙烯可能是通过橡胶粒子膜上的茉莉酸、乙烯信号响应蛋白对橡胶生物合成产生调控作用。从橡胶粒子的基本结构、起源和发育、橡胶粒子膜蛋白的组成和功能3个方面对橡胶粒子细胞组织学和分子生物学的研究进展进行综述,可为橡胶树产胶生理学的深入研究提供参考。; 吴华玲段翠芳聂智毅黎瑜于波曾日中; 关键词：橡胶树橡胶粒子橡胶合成

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于波