于娟
- 作品数:6 被引量:17H指数:2
- 供职机构:中国药科大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划军队“十一五”科技攻关课题国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 毕赤酵母木糖还原酶定点突变改善其对双辅酶的亲和力被引量:2
- 2009年
- 通过毕赤酵母(Pichia stipitis)木糖还原酶(xylose reductase,XR)基因定点突变,获得NADH高亲和力的毕赤酵母木糖还原酶(PsXR),改善了辅酶不同而导致的酿酒酵母胞内氧化还原失衡.同时克隆了PsXR编码基因,通过BLAST工具进行同源性搜索,并用生物软件进行序列比对和结构分析,确定突变位点.用融合PCR方法进行定点突变,并在大肠杆菌表达系统中进行融合表达,且对表达产物进行HIS-TAG亲和纯化,分光光度法检测酶活性,计算比活力.本研究成功获得突变XR编码基因,并收集了纯化的突变蛋白.酶活性检测和比活力计算显示,3种突变酶对2种辅酶的亲和力在一定程度上都发生了变化.与未突变的PsXR相比,3种突变酶对辅酶NADPH的亲和力均显著下降,突变酶M3对辅酶NADH的亲和力未发生变化,而突变酶M1和M4对辅酶NADH的亲和力显著升高,其中突变酶M1对NADH的亲和力明显提高,对NADPH的亲和力明显下降,其活性主要依赖辅酶NADH,提示K270R位点在XR与辅酶结合中起关键作用.
- 董莉莉邓小昭钟辉姚文娟于娟杨静静
- 关键词:木糖木糖还原酶
- 小盾纤恙螨自然双重感染汉坦病毒和恙虫病东方体及叮刺传播的研究被引量:13
- 2010年
- 目的了解汉坦病毒(HV)和恙虫病东方体(OT)可否在小盾纤恙螨体内双重自然感染及通过叮刺传播的状况。方法在肾综合征出血热(HFRS)和恙虫病混合流行区,将采集的3459只鼠体恙螨和用小黑板诱集的3265只游离恙螨,按1、5、10只螨数分组,每组叮刺6只小白鼠。15d后取小白鼠肺和脾脏制成悬液,经脑内途径接种小白鼠传6代,每代均采用间接免疫荧光法(IFAT)和Giemsa法检测HV和OT病原体;取不同恙螨数的螨制成无菌悬液接种Vero—E6细胞传代,分离检测HV和OT病原体。采用PCR法检测HV.RNA和OT—DNA。结果经传代后HV和OT双重感染鼠的检测情况为,HV单纯阳性鼠体螨5、10只组在第6代各检测到1只,OT单纯阳性鼠体螨10只组在第6代检测到1只,HV、OT双重阳性鼠体螨1只组在第5、6代均检测到1只,HV、OT双重阳性鼠体螨5、10只组在第6代各检测到1只。1、5、10只游离螨组叮刺小白鼠后,在第6代各检测到1只。Vero—E6细胞在第4代时,HV、OT双重阳性的鼠体螨5、10只螨组,各有1份检测到HV和OT双重阳性的感染细胞。传至第6代时,HV、OT双重阳性的鼠体螨1只螨组和游离螨1、5、10只螨组均检测到HV和OT双重阳性的感染细胞。经PCR检测到HV—RNA、OT—DNA。结论小盾纤恙螨体内可自然双重感染HV和OT病原体,并可经叮刺传播。
- 于娟邓小昭杨占秋姚苹苹朱涵坪熊海蓉李春雷张云
- 关键词:汉坦病毒恙螨科组织培养技术
- 导数色谱法在色谱峰纯度鉴定和定量分析方面的应用被引量:2
- 1993年
- 随着色谱技术的普及和发展,气相色谱技术和高效液相色谱技术在药学研究中越来越受到重视。色谱峰纯度鉴定方法、色谱定量方法每年均有较多报道。我们探讨用导数法处理色谱流出曲线。
- 吉宁高国强陈玉英胡育筑戴向东于娟
- 关键词:一阶导数气相色谱
- H3型流感病毒血凝素空间构象模拟抗原表位及其应用
- 本发明属于多肽生物技术领域,公开了H3型流感病毒血凝素空间构象模拟抗原表位及其应用。该H3型流感病毒血凝素空间构象模拟抗原表位肽的序列为SEQ ID No.1。本发明利用抗重组HA1兔血清IgG筛选噬菌体12肽库,用噬菌...
- 钟辉邓小昭姚文娟董莉莉于娟储春丽刁振宇张云
- 文献传递
- H3型流感病毒血凝素空间构象模拟抗原表位及其应用
- 本发明属于多肽生物技术领域,公开了H3型流感病毒血凝素空间构象模拟抗原表位及其应用。该H3型流感病毒血凝素空间构象模拟抗原表位肽的序列为SEQ ID No.1。本发明利用抗重组HA1兔血清IgG筛选噬菌体12肽库,用噬菌...
- 钟辉邓小昭姚文娟董莉莉于娟储春丽刁振宇张云
- 文献传递
- 名优中成药片仔癀系统性创新研究
- 潘杰姚大卫黄进明陈纪鹏林绍碧洪绯于娟余伯阳岳碧松彭军
- 该成果所述技术领域为生物医药技术领域。传统中成药作为中华民族的传统瑰宝,具有辨证论治用药特色及用药天然、副作用低的优势,但普遍存在药效作用机理不明确、质控体系较薄弱,部分天然原料资源稀缺等问题,制约着中药产业的发展及进军...
- 关键词:
- 关键词:中成药片仔癀药理学