董莉莉
- 作品数：8 被引量：7H指数：2
- 供职机构：南京医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划江苏省自然科学基金江苏省博士后科研资助计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学化学工程更多>>
- HCV-F基因在hepG2细胞中的表达以及对PI3K的影响
- 2008年
- 探讨丙型肝炎病毒(HCV)F基因对PI3K表达的影响。应用PCR技术从含有HCV全长开放阅读框的质粒中获得HCV-F基因片段,利用基因重组技术将其克隆至真核表达载体pcDNA3.0(-)中。通过酶切、PCR及测序鉴定,HCV-F基因已正确插入到pcDNA3.0(-)中,再利用脂质体转染HepG2细胞。经RT-PCR及Westernblot检测,HCV的F基因在HepG2细胞中获得表达,而且在表达重组HCV-F的转染HepG2细胞中,检测到PI3K蛋白的表达。实验表明HCV-F可在体外激活PI3K及其信号通路。
- 储春丽邓小昭董莉莉胡学芳喻荣彬张云吴超
- 关键词：丙型肝炎病毒F蛋白HEPG2细胞磷脂酰肌醇-3激酶
- 谷氨酸棒杆菌赖氨酸转运体结构的初步分析
- 谷氨酸棒杆菌是一种在工业上大规模生产各种氨基酸的革兰氏阳性菌,也是生产赖氨酸的常见菌株.赖氨酸的分泌对于赖氨酸生产而言是十分重要的过程,该过程能将赖氨酸合成途经产生的赖氨酸分泌至培养基中.研究发现,一种新型的转运体和赖氨...
- 姚文娟邓小昭董莉莉杨静静王昊鹏李春雷
- 关键词：谷氨酸棒杆菌绿色荧光蛋白
- 文献传递
- 毕赤酵母木糖还原酶定点突变改善其对双辅酶的亲和力被引量：2
- 2009年
- 通过毕赤酵母(Pichia stipitis)木糖还原酶(xylose reductase,XR)基因定点突变,获得NADH高亲和力的毕赤酵母木糖还原酶(PsXR),改善了辅酶不同而导致的酿酒酵母胞内氧化还原失衡.同时克隆了PsXR编码基因,通过BLAST工具进行同源性搜索,并用生物软件进行序列比对和结构分析,确定突变位点.用融合PCR方法进行定点突变,并在大肠杆菌表达系统中进行融合表达,且对表达产物进行HIS-TAG亲和纯化,分光光度法检测酶活性,计算比活力.本研究成功获得突变XR编码基因,并收集了纯化的突变蛋白.酶活性检测和比活力计算显示,3种突变酶对2种辅酶的亲和力在一定程度上都发生了变化.与未突变的PsXR相比,3种突变酶对辅酶NADPH的亲和力均显著下降,突变酶M3对辅酶NADH的亲和力未发生变化,而突变酶M1和M4对辅酶NADH的亲和力显著升高,其中突变酶M1对NADH的亲和力明显提高,对NADPH的亲和力明显下降,其活性主要依赖辅酶NADH,提示K270R位点在XR与辅酶结合中起关键作用.
- 董莉莉邓小昭钟辉姚文娟于娟杨静静
- 关键词：木糖木糖还原酶
- H3型流感病毒血凝素空间构象模拟抗原表位及其应用
- 本发明属于多肽生物技术领域，公开了H3型流感病毒血凝素空间构象模拟抗原表位及其应用。该H3型流感病毒血凝素空间构象模拟抗原表位肽的序列为SEQ ID No.1。本发明利用抗重组HA1兔血清IgG筛选噬菌体12肽库，用噬菌...
- 钟辉邓小昭姚文娟董莉莉于娟储春丽刁振宇张云
- 文献传递
- 毕赤酵母木糖还原酶的改造及重组酿酒酵母发酵木糖生产乙醇的初步研究
- 天然酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)能有效利用己糖发酵产生乙醇,但不能利用木糖。木质纤维素水解液中木糖含量丰富,仅次于葡萄糖,因此,促进木糖向乙醇的生物转化是充分利用木质纤维原料,降低乙醇生产...
- 董莉莉
- 关键词：酿酒酵母木糖还原酶乙醇
- 文献传递
- H3型流感病毒血凝素空间构象模拟抗原表位及其应用
- 本发明属于多肽生物技术领域，公开了H3型流感病毒血凝素空间构象模拟抗原表位及其应用。该H3型流感病毒血凝素空间构象模拟抗原表位肽的序列为SEQ ID No.1。本发明利用抗重组HA1兔血清IgG筛选噬菌体12肽库，用噬菌...
- 钟辉邓小昭姚文娟董莉莉于娟储春丽刁振宇张云
- 文献传递
- HCV患者外周血单个核细胞蛋白质表达质谱分析被引量：4
- 2008年
- 目的:应用比较蛋白质组学的方法分析丙型肝炎患者外周血单个核细胞蛋白质表达模式的变化及寻找丙型肝炎相关生物标记分子,进一步识别鉴定其差异表达蛋白质,分析其对丙型肝炎慢性化机制的意义。方法:应用固相化pH梯度双向凝胶电泳(2-DE)分离健康者(10)及HCV患者(28)PBMC的总蛋白质,凝胶银染显色后,PDQuest图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)获得差异蛋白点的肽质指纹图谱,通过SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质。结果:得到两张2-DE图谱,HCV患者及健康者PBMC凝胶的蛋白质点数分别为625及614;初步筛选出HCV患者与健康者存在明显差异的12个蛋白点,经质谱分析,初步鉴定了10种蛋白质。这些差异蛋白质包括病毒蛋白、蛋白质合成与分解、三大代谢相关酶类、细胞结构相关蛋白质以及信号转导相关蛋白质。结论:应用2-DE及MALDI-TOF-MS方法建立了HCV患者PBMC双向凝胶电泳图谱,分离并初步鉴定了10种与HCV感染相关的差异表达的蛋白质,为研究HCV慢性化相关机制提供新的线索。
- 储春丽邓小昭张云董莉莉王忠灿喻荣彬吴超
- 关键词：PBMC2-DE
- 一种基因工程改造的NADH高亲和力木糖还原酶突变基因可促进酿酒酵母发酵木糖生成乙醇被引量：1
- 2011年
- 在导入表达毕赤酵母(Pichia stipitis)木糖还原酶(xylose reductase,XR)和木糖醇脱氢酶(xylitol dehydrogenase,XDH)基因的重组酿酒酵母中,木糖还原酶活性主要依赖辅酶NADPH,木糖醇脱氢酶活性依赖辅酶NAD+,两者的辅助因子不同导致细胞内电子氧化还原的不平衡,是造成木糖醇积累,影响木糖代谢和乙醇产量的主要原因之一.将经过基因工程改造获得的NADH高亲和力的木糖还原酶突变基因m1,与毕赤酵母木糖醇脱氢酶(PsXDH)基因xyl2共转染酿酒酵母AH109,以转染毕赤酵母木糖还原酶(PsXR)基因xyl1和xyl2重组质粒的酵母细胞为对照菌株,在SC/-Leu/-Trp营养缺陷型培养基中进行筛选,获得的阳性转化子分别命名为AH-M-XDH和AH-XR-XDH.重组酵母在限制氧通气条件下对木糖和葡萄糖进行共发酵摇瓶培养,HPLC检测发酵底物的消耗和代谢产物的产出情况.结果显示,与对照菌株AH-XR-XDH相比,AH-M-XDH的木糖利用率明显提高,乙醇得率增加了16%,木糖醇产生下降了41.4%.结果证实,通过基因工程改造的木糖代谢关键酶,可用于酿酒酵母发酵木糖生产乙醇,其能通过改善酿酒酵母细胞内氧化还原失衡的问题,提高木糖利用率和乙醇产率.
- 李春雷邓小昭董莉莉韦娟余晓杰
- 关键词：乙醇木糖还原酶木糖醇脱氢酶酿酒酵母
