黄海斌
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
- 供职机构：吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 2株乳酸菌对鼠结肠癌模型的抑制效果被引量：2
- 2015年
- 为比较酸奶中分离的短乳杆菌和鼠李糖乳杆菌对消化道肿瘤的潜在抑制效果,在肿瘤模型建立前2周给小鼠分别灌胃2株乳酸菌(2×108cfu),此后建立鼠结肠癌模型以比较2株乳酸菌对其是否具有抑制作用。通过给小鼠皮下注射CT26.WT细胞获得皮下增生物,经病理组织学检测为肿瘤后,通过腹部手术移植皮下瘤块至肠道表面,进而建立鼠结肠癌肿瘤模型。模型建立后通过腹部B超扫描监测肿瘤体积,并于模型建立2周后处死小鼠、分离肿瘤称重,计算抑瘤率。结果表明:皮下注射CT26.WT可以诱导获得皮下肿瘤,腹部手术、OB胶黏附瘤块建立了鼠结肠癌皮下移植瘤模型,荷瘤率为100%,术后存活率为96%以上。模型建立7 d后,腹部B超扫描检测结果表明,灌胃短乳杆菌组荷瘤鼠肿瘤的体积显著低于PBS组(P<0.05),而鼠李糖乳杆菌灌胃组荷瘤鼠肿瘤体积也有下降趋势,但与PBS组相比差异不显著。分离荷瘤鼠肿瘤组织,灌胃2株乳酸菌组小鼠肿瘤重均有所下降,且短乳杆菌组更为明显,短乳杆菌抑瘤率为36.47%,鼠李糖乳杆菌抑瘤率为21.68%。构建了鼠结肠癌原位移植瘤模型,且短乳杆菌对鼠结肠癌具有较好的抑制效果,优于鼠李糖乳杆菌。
- 胡静涛李俊峰黄海斌王丹叶丽萍
- 关键词：乳酸菌结肠癌抑瘤率
- H9N2亚型禽流感病毒M1基因的克隆及其原核表达被引量：2
- 2014年
- 为克隆H9N2亚型禽流感病毒M1基因并研究其原核表达产物的反应原性,从H9N2亚型禽流感病毒中提取病毒基因组RNA,采用RT-PCR方法克隆了M1全长基因。把M1基因克隆至pMD18-T载体中之后进行测序。M1基因亚克隆至pET-28a(+)表达载体中,构建重组表达质粒pET-28a-M1。该重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)并经IPTG诱导表达,对表达产物进行纯化和鉴定。测序分析结果表明,本研究克隆的M1基因与数株甲型流感病毒的M1基因的核苷酸同源性为89.7%~99.1%。SDS-PAGE分析表明,构建的重组蛋白以可溶性形式存在。Western-blot鉴定结果表明,它具有良好的反应原性。M1的成功表达为进一步研制新型流感疫苗奠定了基础。
- 石少华杨文涛胡静涛王倩黄海斌许云飞赵亮石春卫王春凤杨桂连
- 关键词：禽流感病毒克隆原核表达
- H9N2亚型禽流感病毒HA-DCpep融合基因重组乳杆菌的构建及免疫原性分析被引量：3
- 2014年
- 为了构建HA-DCpep融合基因重组乳杆菌并检测其表达产物的免疫原性,以pSIP409-HA质粒为模板,采用PCR方法将HA基因和DCpep基因融合。将目的基因克隆至pGEM-T载体中,进行测序。再将阳性基因亚克隆至大肠杆菌-乳杆菌穿梭表达载体pSIP409中,电转化入植物乳杆菌NC8中,经SppIP诱导后对表达产物进行Western-blot分析。结果显示,重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep的裂解物中出现大小约为64ku的反应条带,大小与预期结果相符,表明重组融合蛋白具有良好的反应原性。重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep口服免疫SPF雏鸡后,在免疫后第14天可被检出特异性HI抗体,28d后达到高峰。结果表明,应用重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep免疫雏鸡能刺激机体产生特异性体液免疫应答反应,这为研制预防禽流感的重组乳杆菌口服制剂奠定了基础。
- 石少华杨文涛叶丽萍黄海斌蔡若鹏李雨宸闫晓月王春凤杨桂连
- 关键词：禽流感病毒免疫原性
- 斯氏艾美球虫可溶性蛋白对小鼠结肠癌皮下肿瘤模型的影响
- 2017年
- 目的探讨斯氏艾美球虫(Eimeria stiedai)可溶性蛋白(EsSP)对荷瘤小鼠肿瘤生长、生存率和免疫状态的影响。方法建立小鼠皮下结肠癌(CT26)肿瘤模型,确定最小100%致瘤量肿瘤细胞数。取10~8个斯氏艾美球虫孢子化卵囊,采用超声波间断乳化制备EsSP。105只雄性BALB/c小鼠按随机数表法均分为7组(15只/组),每组小鼠于右侧腋窝皮下接种CT26细胞5×10~5个,其中6个实验组(A^F组)小鼠分别腹腔注射100.00、50.00、10.00、1.00、0.10、0.01μg/d EsSP,1次/d×5 d,对照组腹腔注射等量PBS。于接种后第7、11、13、15、17、19、21、23天测量肿瘤直径,计算相对肿瘤体积和相对肿瘤增殖率(T/C)。接种后第25天每组各处死5只小鼠,称量瘤重,计算抑瘤率。采眼球血,分离小鼠外周血淋巴细胞,MTS比色法检测EsSP对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖能力的影响,计算刺激指数(SI);流式细胞术检测外周血CD4^+/CD8^+T淋巴细胞比值变化。记录各组荷瘤小鼠死亡时间和死亡数量,共观察80 d。各组间差异性比较采用单因素方差分析。结果最小100%致瘤量肿瘤细胞数为5×10~5个。接种结肠癌细胞后第23天,A、B、C组的肿瘤体积为(435.2±41.1)、(366.3±29.2)、(460.2±28.5)mm^3,较E、F和对照组的(761.2±33.2)、(810.4±38.4)、(865.2±35.3)mm^3生长缓慢(P<0.05);A、B、C组的T/C分别为(39.0±6.7)%、(33.3±8.9)%、(35.0±8.1)%,均<40%。B组小鼠瘤重为(1.109±0.432)g,低于对照组的(1.946±0.289)g(P<0.05),抑瘤率最高,为(43.0±14.6)%。MTS比色法检测结果显示,B、C组小鼠SI分别为1.75±0.15、1.70±0.32,高于对照组的1.38±0.18(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,A、B、C组小鼠外周血中CD4^+/CD8^+T淋巴细胞亚群的比值分别为1.58±0.24、1.74±0.22、1.61±0.16,与对照组的1.34±0.15比较,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。荷瘤小鼠生存率结果显示,至第80天,B、C组各存活5只小鼠,高于对照组的2只(P<0.05)。结论 EsSP能�
- 杨桂连黄海斌杨文涛姜延龙石春卫王春凤
- 关键词：结肠癌肿瘤生长免疫
- 乳酸菌复合制剂对柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡免疫水平的影响及免疫保护效果评价被引量：10
- 2017年
- 为探究乳酸菌等益生菌在雏鸡抗柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染中的作用,本研究以150只1日龄肉雏鸡为试验动物,以2×10~8CFU/200 L鼠李糖乳杆菌、乳酸片球菌和植物乳杆菌复合制剂饲喂雏鸡,并设红、白对照组。于攻虫前后检测细胞因子IFN-γ和IL-2、IgG和SIgA水平,雏鸡血液中淋巴细胞增殖情况和外周血CD4^+和CD8^+T淋巴细胞数量,并对攻虫期间增重情况、卵囊排出数量和盲肠病变情况进行检测。结果显示,该制剂显著提高了IFN-γ、IL-2、IgG、SIgA水平和外周血中T淋巴细胞数量,从而增强了机体细胞和体液免疫水平(P<0.05)。此外,该制剂可以显著减轻球虫感染对雏鸡增重的影响,降低卵囊排出量和盲肠病理损伤(P<0.05),ACI值达到中等抗球虫效果,有望成为鸡球虫病新的防治手段。
- 杨桂连杨军黄海斌杨文涛姜延龙石春卫王春凤
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫乳酸菌
- 原虫抗肿瘤免疫机制研究进展被引量：5
- 2015年
- 阿米巴原虫、克氏锥虫、艾美尔球虫、恶性疟原虫和刚地弓形虫等多种原虫可激活和调节人体免疫系统,改变肿瘤诱导的免疫抑制状态,增强机体抗肿瘤反应。本文对原虫抗肿瘤的细胞免疫、体液免疫和肿瘤微环境进行综述,旨在探讨其免疫机制,为原虫抗肿瘤的研究提供理论参考。
- 黄海斌杨文涛王春凤王春凤
- 关键词：原虫肿瘤治疗细胞免疫体液免疫肿瘤微环境
- 兽医免疫学实验的教学改革与探索被引量：1
- 2017年
- 兽医免疫学实验教学在培养合格的动物医学专业学生中发挥着极其重要的作用，兽医免疫学实验教学的改革与探索是一项长期、艰巨的任务。我们在分析当前实验教学存在的问题基础上，在实验教学内容，培养学生实验兴趣，有机结合教师先进的科研成果与实验教学，考核体系等方面进行探索和改革，旨在提高兽医免疫学实验教学质量，培养合格的兽医专业人才，满足社会的需求。
- 杨文涛王春凤杨桂连钱爱东胡静涛叶丽萍姜延龙王建忠黄海斌石春卫
- 关键词：实验教学教学改革
- E.tenella初次感染雏鸡外周血T淋巴细胞亚群及增殖能力变化的动态研究被引量：2
- 2014年
- 应用流式细胞术（ FCM）和MTS比色法检测雏鸡初次感染柔嫩艾美尔球虫（ E． tenella）后外周血中CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋T淋巴细胞及其增殖能力的动态变化。数据显示，E． tenella初次感染雏鸡后7～20 d CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋T 淋巴细胞比例明显高于对照组雏鸡（ P＜0．05和P＜0．01），并且均于12 d时达到峰值。初次感染后7～20 d雏鸡外周血中CD4＋／CD8＋T淋巴细胞亚群的比值明显升高，于感染后16 d时达到1．78。 E． tenella初次感染雏鸡后12～20 d外周血淋巴细胞增殖能力明显高于对照组雏鸡（ P＜0．05），并于16 d达到峰值。试验表明E． tenella初次感染雏鸡能激活淋巴细胞产生增殖反应，CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋T淋巴细胞在抵抗E． tenella初次感染过程中有重要作用。
- 黄海斌张许科杨文涛石少华杨军王倩赵亮王春凤杨桂连
- 关键词：柔嫩艾美尔球虫外周血增殖
