石春卫
- 作品数:8 被引量:47H指数:4
- 供职机构:吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪白细胞介素18成熟蛋白基因的克隆与表达被引量:1
- 2012年
- 目的克隆猪白细胞介素18(pIL-18)成熟蛋白基因,并在植物乳杆菌(Lb.plantarum)NC8中进行表达。方法通过RT-PCR方法从猪脾脏细胞中扩增出pIL-18成熟蛋白基因,克隆到T载体pMD18-T后测序;将阳性基因片段克隆至大肠埃希菌-乳酸菌穿梭表达载体pSIP-409构建重组表达载体pSIP-409-IL-18,进行酶切和PCR鉴定;应用电穿孔技术将其转化至Lb.plantarum NC8中,经SppIP诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western-blot分析。结果经测序,pIL-18成熟蛋白基因核苷酸长度为579 bp,编码193个核苷酸;酶切和PCR鉴定证明成功构建了重组表达载体pSIP-409-IL-18;SDS-PAGE及Western-blot分析表明重组菌表达了18 kD的融合蛋白,该重组蛋白可以与鼠抗猪IL-18多克隆抗体反应。结论成功克隆了pIL-18成熟蛋白基因,并获得有生物活性的pIL-18重组乳酸菌,为研制开发IL-18重组乳酸菌制剂奠定基础。
- 王春岩刘莉杨文涛王美芳石春卫杨桂连王春凤
- 关键词:白细胞介素18乳酸菌克隆基因表达
- 肠道菌群与B细胞发育的相互调节作用被引量:6
- 2017年
- 动物肠道是一个栖息着大量菌群、开放的生态系统,这些肠道菌群与宿主之间建立了稳定的互利共生关系,维持肠道内的动态平衡。黏膜免疫学的发展揭示了在正常生理状态下肠道菌群可以促进宿主免疫系统的发育,
- 陈毅秋石春卫姜延龙叶丽萍王春凤
- 关键词:肠道菌群细胞发育黏膜免疫互利共生
- 乳酸菌复合制剂对柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡免疫水平的影响及免疫保护效果评价被引量:10
- 2017年
- 为探究乳酸菌等益生菌在雏鸡抗柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染中的作用,本研究以150只1日龄肉雏鸡为试验动物,以2×10~8CFU/200 L鼠李糖乳杆菌、乳酸片球菌和植物乳杆菌复合制剂饲喂雏鸡,并设红、白对照组。于攻虫前后检测细胞因子IFN-γ和IL-2、IgG和SIgA水平,雏鸡血液中淋巴细胞增殖情况和外周血CD4^+和CD8^+T淋巴细胞数量,并对攻虫期间增重情况、卵囊排出数量和盲肠病变情况进行检测。结果显示,该制剂显著提高了IFN-γ、IL-2、IgG、SIgA水平和外周血中T淋巴细胞数量,从而增强了机体细胞和体液免疫水平(P<0.05)。此外,该制剂可以显著减轻球虫感染对雏鸡增重的影响,降低卵囊排出量和盲肠病理损伤(P<0.05),ACI值达到中等抗球虫效果,有望成为鸡球虫病新的防治手段。
- 杨桂连杨军黄海斌杨文涛姜延龙石春卫王春凤
- 关键词:柔嫩艾美耳球虫乳酸菌
- 肠道微生物群对宿主免疫系统发育和功能的调节被引量:21
- 2016年
- 动物肠道共生着一个庞大而复杂的微生物群,主要是细菌,也包含真菌、酵母菌、病毒和古细菌,这些微生物群构成一个微生态系统,在维持肠道稳态方面发挥着重要的作用。而免疫系统必须不断监测胃肠道病原体的存在。肠道微生物群调节免疫系统保持互利关系,但维持体内平衡的机制尚未完全了解。细胞和分子水平的最新研究进展,
- 石春卫陈毅秋胡静涛杨桂连王春凤
- 关键词:调节免疫系统微生物群系统发育宿主免疫单核吞噬细胞微生态系统
- 黄芪多糖和灭活H9N2亚型禽流感病毒对C57BL/6小鼠外周血T、B淋巴细胞影响的研究被引量:7
- 2020年
- 为了评价黄芪多糖作为疫苗佐剂的潜力,试验用黄芪多糖和灭活的H9N2亚型禽流感病毒免疫C57BL/6小鼠,将20只小鼠均分为4组,第1组为黄芪多糖组(免疫黄芪多糖),第2组为灭活H9N2亚型禽流感病毒组(免疫灭活H9N2亚型禽流感病毒),第3组为混合组(免疫黄芪多糖和灭活H9N2亚型禽流感病毒),第4组为生理盐水组(注射生理盐水),通过淋巴细胞增殖试验和流式细胞术对C57BL/6小鼠外周血淋巴细胞的增殖反应、B淋巴细胞和T淋巴细胞的变化及T淋巴细胞亚群比值变化进行研究。结果表明:混合组对小鼠外周血淋巴细胞的增殖有促进作用,可以提高小鼠外周血B淋巴细胞和CD^+_3CD^+_4T淋巴细胞亚群比例,并对小鼠外周血T淋巴细胞亚群有调节作用。说明灭活H9N2亚型禽流感病毒与黄芪多糖混合时具有协同作用。
- 于潼杨文涛黄雨琳杨桂连杨桂连
- 关键词:黄芪多糖禽流感病毒外周血B淋巴细胞
- 斯氏艾美球虫可溶性蛋白对小鼠结肠癌皮下肿瘤模型的影响
- 2017年
- 目的探讨斯氏艾美球虫(Eimeria stiedai)可溶性蛋白(EsSP)对荷瘤小鼠肿瘤生长、生存率和免疫状态的影响。方法建立小鼠皮下结肠癌(CT26)肿瘤模型,确定最小100%致瘤量肿瘤细胞数。取10~8个斯氏艾美球虫孢子化卵囊,采用超声波间断乳化制备EsSP。105只雄性BALB/c小鼠按随机数表法均分为7组(15只/组),每组小鼠于右侧腋窝皮下接种CT26细胞5×10~5个,其中6个实验组(A^F组)小鼠分别腹腔注射100.00、50.00、10.00、1.00、0.10、0.01μg/d EsSP,1次/d×5 d,对照组腹腔注射等量PBS。于接种后第7、11、13、15、17、19、21、23天测量肿瘤直径,计算相对肿瘤体积和相对肿瘤增殖率(T/C)。接种后第25天每组各处死5只小鼠,称量瘤重,计算抑瘤率。采眼球血,分离小鼠外周血淋巴细胞,MTS比色法检测EsSP对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖能力的影响,计算刺激指数(SI);流式细胞术检测外周血CD4^+/CD8^+T淋巴细胞比值变化。记录各组荷瘤小鼠死亡时间和死亡数量,共观察80 d。各组间差异性比较采用单因素方差分析。结果最小100%致瘤量肿瘤细胞数为5×10~5个。接种结肠癌细胞后第23天,A、B、C组的肿瘤体积为(435.2±41.1)、(366.3±29.2)、(460.2±28.5)mm^3,较E、F和对照组的(761.2±33.2)、(810.4±38.4)、(865.2±35.3)mm^3生长缓慢(P<0.05);A、B、C组的T/C分别为(39.0±6.7)%、(33.3±8.9)%、(35.0±8.1)%,均<40%。B组小鼠瘤重为(1.109±0.432)g,低于对照组的(1.946±0.289)g(P<0.05),抑瘤率最高,为(43.0±14.6)%。MTS比色法检测结果显示,B、C组小鼠SI分别为1.75±0.15、1.70±0.32,高于对照组的1.38±0.18(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,A、B、C组小鼠外周血中CD4^+/CD8^+T淋巴细胞亚群的比值分别为1.58±0.24、1.74±0.22、1.61±0.16,与对照组的1.34±0.15比较,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。荷瘤小鼠生存率结果显示,至第80天,B、C组各存活5只小鼠,高于对照组的2只(P<0.05)。结论 EsSP能�
- 杨桂连黄海斌杨文涛姜延龙石春卫王春凤
- 关键词:结肠癌肿瘤生长免疫
- 兽医免疫学实验的教学改革与探索被引量:1
- 2017年
- 兽医免疫学实验教学在培养合格的动物医学专业学生中发挥着极其重要的作用,兽医免疫学实验教学的改革与探索是一项长期、艰巨的任务。我们在分析当前实验教学存在的问题基础上,在实验教学内容,培养学生实验兴趣,有机结合教师先进的科研成果与实验教学,考核体系等方面进行探索和改革,旨在提高兽医免疫学实验教学质量,培养合格的兽医专业人才,满足社会的需求。
- 杨文涛王春凤杨桂连钱爱东胡静涛叶丽萍姜延龙王建忠黄海斌石春卫
- 关键词:实验教学教学改革
- H9N2亚型禽流感病毒M1基因的克隆及其原核表达被引量:2
- 2014年
- 为克隆H9N2亚型禽流感病毒M1基因并研究其原核表达产物的反应原性,从H9N2亚型禽流感病毒中提取病毒基因组RNA,采用RT-PCR方法克隆了M1全长基因。把M1基因克隆至pMD18-T载体中之后进行测序。M1基因亚克隆至pET-28a(+)表达载体中,构建重组表达质粒pET-28a-M1。该重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)并经IPTG诱导表达,对表达产物进行纯化和鉴定。测序分析结果表明,本研究克隆的M1基因与数株甲型流感病毒的M1基因的核苷酸同源性为89.7%~99.1%。SDS-PAGE分析表明,构建的重组蛋白以可溶性形式存在。Western-blot鉴定结果表明,它具有良好的反应原性。M1的成功表达为进一步研制新型流感疫苗奠定了基础。
- 石少华杨文涛胡静涛王倩黄海斌许云飞赵亮石春卫王春凤杨桂连
- 关键词:禽流感病毒克隆原核表达