黄岩山
- 作品数：38 被引量：85H指数：6
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- 相关领域：医药卫生生物学交通运输工程轻工技术与工程更多>>
- 层析法去除重组人血清白蛋白干扰素α2b融合蛋白的内毒素被引量：16
- 2008年
- 用柱层析方法在生产重组人血清白蛋白干扰素a2b融合蛋白过程中去除产品中的内毒素。所用柱层析组合为Blue-sepharose亲和柱层析、SOURCE 15 ISO疏水柱层析、Q Sepharose F.F.离子交换柱层析、Sephadex G25 Coarse凝胶过滤柱。采用鲎试剂法检测柱层析各阶段得到蛋白中的内毒素含量;并用RP-HPLC方法测定柱层析各阶段得到蛋白的纯度与浓度,求出每毫克蛋白的内毒素含量。结果为每步柱层析过程式均有去除内毒素的作用,最终所得蛋白的内毒素含量降为1 EU/mg,去除率达到99.9%。因而生产重组人血清白蛋白干扰素a2b融合蛋白所用分离纯化柱层析技术在纯化蛋白的同时能有效的去除产品中内毒素,所得产品内毒素的含量远低于药典对注射剂的内毒素含量要求。
- 徐向荣马国昌王昌梅单剑峰沈玲黄岩山周金宝
- 关键词：人血清白蛋白干扰素Α2B柱层析内毒素
- 含有睫状神经营养因子类似物的稳定药剂
- 本发明公开了一种含有睫状神经营养因子类似物的稳定药剂。它除了睫状神经营养因子(CNTF)类似物作为有效成分外，该药剂至少还包含一种物质是从可供药用的表面活性剂、蛋白质稳定剂、无机盐一类物质中选择而来的，以水溶液或冻干制剂...
- 黄岩山裘霁宛邹晔林斌
- 文献传递
- 人GLP-1R基因转染BHK细胞及重组细胞的应用被引量：2
- 2007年
- 为了构建表达人胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)基因的BHK细胞株,并利用该重组细胞对GLP-1等相关肽进行活性测定,首先通过酶切、连接方式将人GLP-1R基因克隆至真核表达载体pCDNA3.(1+)中,然后用脂质体转染法将重组质粒转染至BHK-21细胞,转染后的细胞经G418加压筛选、细胞有限稀释等方法获得克隆细胞株。经过该细胞株RT-PCR验证,结果证实目的基因已整合至BHK-21细胞基因组中,并获得成功转录和表达。活性检测实验表明该重组细胞株经过GLP-1的刺激后,其细胞中的cAMP含量得到明显提升。该细胞株的构建为GLP-1及相关肽的活性测定奠定了基础。
- 朱振洪王同映黄岩山
- 关键词：BHK-21CAMP
- 明胶样单元的用途
- 本发明涉及明胶样单元的用途，提供了一类新型重组融合蛋白，其基本结构为｛GLK｝p-R-｛GLK｝q，其中R是有生物学功能的蛋白或多肽，GLK为重组明胶样蛋白(gelatin-like protein，GLK)，具有(Gl...
- 黄岩山周林福陈智
- 文献传递
- 荷人膀胱癌原位移植瘤裸小鼠动物模型的建立被引量：6
- 2006年
- 目的建立模拟人的原位裸小鼠模型,评价抗人膀胱癌免疫毒素临床前的疗效。方法将体外培养的人移行细胞癌细胞系(BIU-87)原位移植于经酸处理的裸小鼠膀胱内,定期用核磁共振成像(MRI)检查,并进行解剖、组织学检查和免疫细胞化学的检测。结果在第7～36天内,成瘤率为92．9％(52／56);其中第12～13天处死的裸小鼠中,95．2％(40／42)发展成移行细胞癌,以浅表性为主。组织学检查证实为Ⅱ～Ⅲ级;免疫细胞化学证实,该模型具有BIU-87细胞的特征。在肿瘤的发生发展中,MRI检查的结果与组织学检查的结果密切相关。接种后第7～9天可以检测出原位癌(CIS),其后发展成乳头状瘤或浸润性疾病。结论模拟人的原位裸小鼠模型重复性好,是临床前研究膀胱灌注治疗的理想模型。
- 李翀颜汝平袁国红奉友刚王剑松高翔黄岩山周金宝谢蜀生
- 甘露醇对转移因子口服冻干粉制剂中多肽含量测定的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:由于转移因子口服冻干粉制剂中的辅料甘露醇会对福林酚法的测定产生干扰,因此对甘露醇对测定方法的干扰进行研究,以期在实际测定中可予以预测并排除;方法:以牛血清白蛋白为对照,制备标准品并得出标准曲线,对比不含甘露醇和含0.27%甘露醇转移因子溶液的吸光度;结果:0.27%甘露醇福林酚溶液在650nm处有吸收峰,因此可能影响多肽的测定结果,不同批号的甘露醇与福林酚试剂的呈色反应不一,吸光度值最多可差4倍以上;结论:测定管减去空白管(福林酚0.27%甘露醇)的吸光度,再计算,可得到准确的实验结果。在检测以甘露醇为辅料的转移因子冻干制剂时,空白管必须要采用同批的甘露醇。
- 蒋微琴许晓燕黄岩山朱海红
- 关键词：甘露醇多肽
- 酶联免疫吸附试验法研究PEG-rhG-CSF与rHSA-hG-CSF在小鼠体内的药代动力学被引量：15
- 2007年
- 研究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)、聚乙二醇修饰的重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-rhG-CSF)与重组人血清白蛋白-粒细胞集落刺激因子融合蛋白(rHSA-hG-CSF)在小鼠体内的药代动力学,验证两种方法对rhG-CSF半衰期(T1/2)的影响。小鼠分别皮下给药rhG-CSF,PEG-rhG-CSF与rHSA-hG-CSF后,在不同时间点采血并分离血清,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法测定血清中rhG-CSF的浓度,用3P87药动学软件进行曲线拟合并计算参数。结果显示,rhG-CSF,PEG-rhG-CSF与rHSA-hG-CSF的半衰期(T1/2)分别为2.1,14.2和10.6h,后两者半衰期分别为rhG-CSF的7倍、5倍;PEG-rhG-CSF和rHSA-hG-CSF的达峰时间Tpeak分别为rhG-CSF的15倍、13倍。通过ELISA法检测比较rhG-CSF,PEG-rhG-CSF与rHSA-hG-CSF在小鼠体内的药代动力学,表明PEG修饰与白蛋白融合技术可以延长rhG-CSF的半衰期。
- 马国昌陈枢青朱振洪黄岩山潘会强周金宝
- 关键词：人粒细胞集落刺激因子白蛋白药代动力学ELISA
- 一种聚乙二醇单修饰的重组人粒细胞集落刺激因子突变体及其制备方法
- 本发明公开了一种高活性的聚乙二醇单修饰重组人粒细胞集落刺激因子突变体(PEG-rmhG-CSF)及其制备方法和医疗用途。将重组人粒细胞集落刺激因子突变体(rmhG-CSF)游离的半胱氨酸(Cys)经聚乙二醇巯基反应试剂定...
- 黄岩山金荣徐飞虎刘晓妮单剑峰王昌梅
- 文献传递
- 毕赤酵母表达重组人白细胞介素11的纯化与鉴定
- 重组人白细胞介素11在临床用于治疗化疗导致的血小板低下症,目前浣的表达方法都是通过大肠杆菌融合表达,工艺复杂.鉴于毕赤酵母(Pichiapastorish)具有易操作、低成本等许多优点,人工合成了经计算机优化的IL-11...
- 黄岩山
- 关键词：毕赤酵母重组人白细胞介素11纯化
- 文献传递
- 毕赤酵母表达重组人白介素11的生产方法
- 本发明公开了一种毕赤酵母表达重组人白介素11的生产方法，该方法包括反相柱层析、疏水柱层析、凝胶柱层析顺序组合纯化，能够大规模制备得到高纯度的药用重组人白细胞介素11蛋白。
- 黄岩山马国昌杨志愉李辉孙汉栋徐飞虎周金宝
