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淡水鱼类主要过敏原的模拟肠胃液消化被引量：6: 2010年; 采用Tricine-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Tricine-SDS-PAGE)和免疫印迹(Western-blot)方法,通过模拟肠胃液消化实验分析淡水鱼类肌肉中主要过敏原小清蛋白(parvalbumin,PV)的消化特性。Tricine-SDS-PAGE结果显示,纯化的鲫、鲢PV在模拟胃液消化实验中反应5～30min明显分解,而在模拟肠液消化实验中4h仍未见明显分解。鲫、鲢肌浆蛋白在模拟胃液消化实验中,肌浆蛋白中的PV比纯化PV的分解时间明显延长,消化30～60min仍未被完全分解,而其它肌浆蛋白消化10～30min就完全分解。采用抗PV多克隆抗体的Western-blot显示,该抗体能特异识别PV及其降解产物。研究结果表明,淡水鱼类PV相对于非过敏蛋白具有较高的消化稳定性,而胃蛋白酶能较好地分解该过敏原。; 刘光明黄园园蔡秋凤翁凌苏文金曹敏杰; 关键词：小清蛋白

蟹类主要过敏原的模拟肠胃液消化及其对过敏原活性的影响被引量：14: 2009年; 目的:通过模拟肠胃液消化试验,分析锯缘青蟹肌肉中过敏原(原肌球蛋白)的消化特性以及消化对过敏蛋白致敏性的影响。方法:采用美国药典提供的模拟胃、肠液配方,测定青蟹原肌球蛋白和肌原纤维蛋白在体外模拟肠胃环境中的消化稳定性。以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Western-blot)进行分析。结果:在模拟胃液反应中,非过敏原蛋白尤其是肌球蛋白重链和肌动蛋白等被胃蛋白酶快速降解,而原肌球蛋白在60min时仍未被完全分解。在模拟肠液反应中,相对于致敏蛋白,肌球蛋白重链、肌动蛋白等非过敏蛋白在较短的时间内被分解,原肌球蛋白尽管120min后几乎被完全分解,但会产生一些较稳定的蛋白降解片段。以免疫印迹法检测过敏患者血清,结果分子质量为34kDa的原肌球蛋白降解产物仍具有过敏原性。结论:蟹类过敏蛋白相对于非过敏蛋白具有较高的消化稳定性,而且其高分子质量降解产物仍可能引起过敏反应。; 黄园园刘光明周利亘张凌晶苏文金曹敏杰; 关键词：锯缘青蟹原肌球蛋白 WESTERN-BLOT

水产过敏原的模拟胃肠液消化: 近年来,食物过敏问题受到了越来越多人的关注,也被认为是食品安全问题的一个重要方面。在FAO公布的八大类主要过敏食物中,水产品占了两类。虽然迄今为止已有不少关于食物过敏机理的研究报道,但食物过敏原是通过什么途径引发过敏的以...; 黄园园; 关键词：水产制品食物过敏胃蛋白酶; 文献传递

锯缘青蟹原肌球蛋白过敏者血清的筛选被引量：2: 2010年; 为了解集美大学学生的饮食及食物过敏情况,对在校学生进行了问卷调查.调查共分发了4 000份,主要涉及水产品食物过敏的种类、过敏症状等.调查收到有效问卷3 890份,应答率为97.3%.自诉过敏的学生为1 149人,约占29.5%.对水产品食物过敏的有545人(占自诉过敏的47.4%),其中31例经ELISA检测,IgE为对蟹的原肌球蛋白呈阳性反应(占水产品食物过敏的5.7%,占蟹过敏的11.3%).男女之间无统计学差异.自诉对蟹、虾、贝、鱼等水产品的过敏症状相似,多为皮疹和皮肤瘙痒.调查结果表明,蟹、虾、贝类和鱼是主要的水产品过敏食物.食物过敏症患者血清食物过敏原特异性IgE升高明显,采用ELISA检测法,方便,安全,准确,对临床确诊与防治食物过敏症有重要意义.; 李兵刘光明蔡秋凤黄园园苏文金曹敏杰; 关键词：食物过敏水产品 ELISA

锯缘青蟹主要过敏原的纯化与鉴定被引量：9: 2010年; 以锯缘青蟹为研究对象,从免疫鉴定、分离纯化、抗体制备和免疫学分析等方面对其主要过敏原进行研究。首先利用过敏者血清的免疫印迹法,确定锯缘青蟹的主要过敏原为分子量约38kD的蛋白。然后通过制备丙酮粉、等电点沉淀、硫酸铵沉淀及加热处理对分子量为38kD的主要过敏蛋白进行了高度纯化。该蛋白的pI约为4.5,与虾的原肌球蛋白Pena1性质相近,证实了锯缘青蟹的主要过敏原为原肌球蛋白。通过免疫新西兰大白兔,制备了原肌球蛋白的抗血清,采用Protein A Sepharose亲和层析柱对动物抗体进行了纯化。该抗血清效价高,经4×105倍稀释后仍能与抗原进行反应。该抗体与甲壳类动物及软体动物的原肌球蛋白具有较强的免疫交叉反应,可用于食品过敏原检测。; 刘光明梁银龙翁凌苏文金黄园园曹敏杰; 关键词：锯缘青蟹原肌球蛋白纯化

水产品主要过敏原的模拟胃液消化实验的条件优化被引量：2: 2011年; 采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western blot)方法,通过体外模拟消化实验分析水产品主要过敏原原肌球蛋白(Tropomyosin,TM)和小清蛋白(Parvalbumin,PV)的消化特性,主要研究酶/蛋白的比值、pH值对模拟胃液(SGF)消化过敏蛋白稳定性的影响。结果表明,提高胃蛋白酶的相对量使甲壳类水产品TM从消化稳定性转变成消化不稳定性,但是TM具有较强的消化稳定性,当酶/蛋白比值提高到10/1时,一些稳定的降解条带仍未被完全分解;当pH≥5时胃液消化会受到抑制,甲壳类水产品TM和鱼类PV均不会被消化分解。在优化条件(0.33U酶/μg蛋白,pH3.5)的SGF消化试验中,甲壳类水产品TM具有较高的消化稳定性,而鱼类PV能被较快分解;甲壳类水产品过敏蛋白相对于非过敏蛋白具有较高的消化稳定性,其降解产物仍可能引起过敏反应的发生。; 刘光明黄园园蔡秋凤翁凌苏文金曹敏杰; 关键词：原肌球蛋白小清蛋白 SDS-PAGE WESTERN BLOT

辐照处理对蟹类过敏原(原肌球蛋白)性质的影响被引量：18: 2009年; 食物过敏是当前食品安全领域较为突出的问题，辐照作为食物过敏原的加工处理方法之一,引起了学者的重视．作者对中华绒鳌蟹和三疣梭子蟹的主要过敏原（原肌球蛋白）进行了辐照处理，并分析了辐照处理对原肌球蛋白性质的影响．十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示，部分纯化的蟹类原肌球蛋白经7kGy辐照处理后出现明显降解,10kGy辐照处理后完全降解；蟹类过敏者血清的免疫印迹分析结果显示．部分纯化原肌球蛋白经3～7kGy辐照处理后的过敏原性无明显变化．而10kGy辐照处理后的过敏原性降低；兔抗锯缘青蟹原肌球蛋白抗体的免疫胶体金层析检测结果证实部分纯化原肌球蛋白经10kGy辐照处理后的抗原性为阴性．但是．3～10kGy辐照处理对整蟹原肌球蛋白及其过敏原性无明显影响。模拟胃液消化反应结果也表明3～10kGy辐照处理对整蟹原肌球蛋白的酶解消化特性无明显影响．; 刘光明王玉松黄园园曹敏杰张凌晶苏文金; 关键词：蟹类原肌球蛋白辐照处理免疫检测

蟹类主要过敏原的模拟肠胃液消化及其对过敏性的影响: 通过模拟肠胃液消化试验分析锯缘青蟹肌肉中过敏原（原肌球蛋白）的消化特性,实验以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和免疫印迹法（Western-blot）进行分析。结果显示,在模拟胃液反应中,非过敏原蛋...; 黄园园刘光明周利亘张凌晶苏文金曹敏杰; 关键词：锯缘青蟹原肌球蛋白 SDS-PAGE WESTERN-BLOT; 文献传递

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黄园园