陈绅波
- 作品数：19 被引量：16H指数：3
- 供职机构：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国际科技合作与交流专项项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 日本血吸虫含EF-手型结构域钙结合蛋白的克隆表达与免疫诊断分析被引量：2
- 2012年
- 目的克隆和表达日本血吸虫(Schistosoma japonicum)含EF-手型(EF-hand)结构域钙结合蛋白(SjEFCAB)的编码基因,纯化表达产物,鉴定重组蛋白的反应原性,初步评价其用于日本血吸虫病诊断的价值。方法以日本血吸虫虫卵cDNA文库中免疫筛选所获阳性克隆删除环化后的pBluescript-SjEFCAB质粒为模板,扩增SjEFCAB基因,将目的基因片段与原核表达载体pGEX-4T-1连接构建重组质粒pGEX-4T-1-SjEFCAB,转化至大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)标签亲和层析法纯化表达产物,蛋白质印迹(Western blotting)分析其反应原性。以SjEFCAB为包被抗原,采用间接ELISA方法检测日本血吸虫病(78份)、华支睾吸虫病(5份)、猪囊尾蚴病(10份)、卫氏并殖吸虫病(6份)和旋毛虫病(9份)患者血清,以及健康人血清(50份),评价该重组蛋白的免疫学诊断效果。结果构建了重组质粒pGEX-4T-1-SjEFCAB,并在E.coli BL21中高效表达,经亲和层析纯化获得可溶性重组蛋白SjEFCAB。Western blotting分析结果显示,重组蛋白SjEFCAB能被感染兔血清和血吸虫病患者血清所识别,在相对分子质量(Mr)约为8 200处出现条带。间接ELISA检测日本血吸虫病患者血清的敏感性为82.1%(64/78),特异性为95.0%(76/80)。与华支睾吸虫病患者、猪囊尾蚴病患者和旋毛虫病患者血清的交叉反应分别为1/5、1/10和1/9,与卫氏并殖吸虫病患者血清无交叉反应(0/6)。结论日本血吸虫SjEFCAB重组抗原具有较高的免疫学诊断价值。
- 卢艳徐斌鞠川莫筱瑾陈绅波冯正王小宁胡薇徐斌
- 关键词：日本血吸虫免疫诊断
- 鉴定恶性疟原虫Pfmspdbl2基因多态性的引物及方法
- 本发明公开了一种鉴定恶性疟原虫Pfmspdbl2基因多态性的引物及方法，包括上游引物(如SEQ ID NO：1所示)和下游引物(如SEQ ID NO：2所示)。根据基因多态性区域特征，设计特定的引物，经PCR扩增得到包含...
- 陈军虎陈绅波仰梦佳沈海默徐斌
- 鉴定恶性疟原虫Pfmspdbl2基因多态性的引物及方法
- 本发明公开了一种鉴定恶性疟原虫Pfmspdbl2基因多态性的引物及方法，包括上游引物(如SEQ ID NO：1所示)和下游引物(如SEQ ID NO：2所示)。根据基因多态性区域特征，设计特定的引物，经PCR扩增得到包含...
- 陈军虎陈绅波仰梦佳沈海默徐斌
- 文献传递
- 田鼠巴贝虫Bm7重组抗原蛋白及其制备方法和用途
- 本发明公开了一种田鼠巴贝虫Bm7重组抗原蛋白，具有SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的蛋白、或由该蛋白发生一个或多个氨基酸的置换、缺失或插入而形成的具有相同功能的蛋白。此外，本发明还公开了该田鼠巴贝虫Bm7重组抗原蛋白...
- 胡薇孙嘉慧徐斌周霞鞠川陈军虎沈海默黄继磊张铤莫筱瑾陈绅波周晓农
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- 日本血吸虫SjPPase重组抗原蛋白及其制备方法和用途
- 本发明公开了一种日本血吸虫无机焦磷酸酶(SjPPase)重组抗原蛋白，是可以催化无机焦磷酸盐(PPi)水解生成磷酸盐的蛋白(其氨基酸序列如SEQ？ID？NO：1所示)。本发明还公开了上述重组抗原蛋白的制备方法，包括日本血...
- 陈军虎吴群峰陈绅波王越张颋徐斌胡薇
- 文献传递
- 日本血吸虫SjSap重组抗原蛋白及其制备方法和用途
- 本发明公开了一种日本血吸虫含鞘脂激活蛋白B结构域蛋白(SjSap)重组抗原蛋白，具有SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的蛋白、或由该蛋白发生一个或多个氨基酸的置换、缺失或插入而形成的具有相同功能的蛋白。此外，本发明还公...
- 卢艳胡薇徐斌鞠川莫筱瑾陈绅波冯正
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- 日本血吸虫病SjPPase重组抗原蛋白及其在疗效考核中的应用
- 本发明公开了一种日本血吸虫无机焦磷酸酶(SjPPase)重组抗原蛋白在日本血吸虫病疗效考核中的应用，属于免疫学领域。日本血吸虫SjPPase重组抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，是可以催化无机焦磷酸盐(P...
- 陈绅波陈军虎胡薇徐斌
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- 间日疟原虫疫苗重要候选分子AMA1多态性分析
- 间日疟原虫是感染人体的五种疟原虫中分布最广的虫种,是亚洲和拉丁美洲疟疾感染的主要病原体,也是我国云南边境地区最主要的内源性和输入性疟疾种类。目前间日疟仅有数个疫苗候选分子正在开展研究工作。间日疟原虫顶端膜抗原-1(AMA...
- 王越陈绅波马安陈军虎
- 关键词：间日疟原虫基因多态性顶端膜抗原1
- 文献传递
- 日本血吸虫虫卵cDNA文库的免疫筛选和阳性克隆的鉴定被引量：5
- 2012年
- 目的寻找可用于日本血吸虫病诊断或疗效考核的抗原分子。方法在安徽省安庆市某现场,采集经粪检(Kato-Katz法,2送6检)日本血吸虫卵阳性的10份患者血样,患者年龄13～64岁,EPG为4～172;并收集该10例患者经吡喹酮(60 mg/kg×2 d)治疗6个月后的血样,将吡喹酮治疗前和治疗后的血清各10份分别混合,分别筛选虫卵cDNA文库,将所获阳性克隆分类,测定阳性克隆插入片段的DNA序列,经BLAST程序分析同源性,并利用在线的生物信息学软件预测阳性克隆基因编码蛋白的结构和功能。结果初次筛选共获得75个阳性克隆,其中46个阳性克隆吡喹酮治疗前和治疗后的日本血吸虫病患者血清反应一致(为Ⅰ类),21个阳性克隆吡喹酮治疗前的血清强于治疗后的(为Ⅱ类);8个阳性克隆吡喹酮治疗后的血清强于治疗前的(为Ⅲ类)。结合反应强度、分类和插入片段的大小选择了14个阳性克隆进行测序和生物信息学分析,多数阳性克隆插入片段均属于虫卵毛蚴抗原家族,1个阳性克隆的插入片段与含EF-hand结构域的钙结合蛋白具有一定的同源性(分值=143),1个阳性克隆的插入片段与应激反应组分1前体具有较高的同源性(分值=487),其余阳性克隆的插入片段仅与假定蛋白有一定的同源性,蛋白功能无明确注释。结论用吡喹酮治疗前后的日本血吸虫病患者血清筛选虫卵cDNA文库,获得的29个阳性克隆在吡喹酮治疗前后有差异。
- 卢艳徐斌鞠川莫筱瑾陈绅波冯正王小宁胡薇
- 关键词：日本血吸虫虫卵CDNA文库免疫筛选疗效考核
- 日本血吸虫SjEFCAB重组抗原蛋白、制备方法及用途
- 本发明公开了一种日本血吸虫含EF-hand结构域钙结合蛋白(SjEFCAB)重组抗原蛋白的制备方法，包括设计SEQ ID NO.3或其互补链为5′引物，SEQ ID NO.4或其互补链为3′引物，进行日本血吸虫SjEFC...
- 胡薇卢艳徐斌莫筱瑾鞠川陈绅波冯正
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