陆瑞祺
- 作品数：18 被引量：66H指数：6
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第三人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 免疫磁珠法分离胆囊癌CD133阳性细胞及其生物学特性鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的建立胆囊癌CD133＋细胞分离纯化的方法，观察胆囊癌CD133＋细胞和CD133-细胞生物学特性的差异。方法流式细胞仪检测胆囊癌GBC—SD、SGC996细胞中CD133所占百分比，免疫磁珠法分选CD133＋细胞亚群，免疫荧光法定位检测CD133蛋白表达，逆转录-聚合酶链反应（RT．PCR）检测CD133mRNA表达，细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测CD133＋组和CD133-组细胞增殖能力及对5．氟尿嘧啶（5．Fu）耐药特性的差异，单克隆形成实验观察单个CD133＋细胞生长特性。结果胆囊癌GBC-SD、SGC996细胞中CD133＋亚群所占相对百分比为（68．5±2．9）％、（0．3±0．2）％。GBC—SD组CD133mRNA相对灰度值（0．6466±0．0259）显著高于SGC996组（0．2181±0．0108，P〈0．01）。CD133蛋白定位于细胞膜表面，并在GBC—SD细胞中呈强表达。人胆囊癌GBC—SD细胞分选后，CD133＋组CD133蛋白表达明显强于CD133-组。CD133＋组中CD133＋亚群所占比例为（90．4±0．9）％。CD133＋组CD133mRNA相对灰度值（0．7734±0．0217）显著高于CD133-组（0．2146±0．0174，P〈0．01）。CD133＋组细胞增殖能力明显强于CD133-组（P〈0．01）。经5-Fu（0．1μg／m1）处理后，CD133＋组细胞生存率明显高于CD133-组（P〈0．05）。单克隆形成实验结果示单个CD133＋细胞可形成新的细胞克隆，且CD133＋组[（36．25±2．99）％]细胞克隆球形成率高于CD133-组[（4．50±1．29）％，P〈0．01]。体内成瘤实验结果示CD133＋组与未分选组移植成瘤率分别为100％和60％，而CD133-组不成瘤。结论免疫磁珠分选系统可成功分离高纯度的胆囊癌CD133＋细胞，而且人胆囊癌CD133＋细胞具有-定的增殖、耐药、自我更新及致瘤潜能。
- 俞远林姜波健吴巨钢陆瑞祺俞继卫
- 关键词：胆囊癌磁珠分选CD133
- 胃癌原发灶中Snail和CXCR4的表达及其与临床病理特征和预后的关系
- 2013年
- 目的研究趋化因子受体4（CXCR4）与上皮间质转化（EMT）相关因子Snail表达与胃癌临床病理特征、预后的关系。方法利用免疫组化方法检测50例胃癌组织中CXCR4和Snail的表达，分析Snail和CXCR4表达与胃癌患者的临床病理学指标的关系，Spearman等级相关方法分析Snail和CXCR4表达的关系，Kaplan—Meier方法分析CXCR4和Snail表达与胃癌患者生存的关系。结果Snail和CXCR4表达阳性率各为62％（31／50）和58％（29／50）；肿瘤越大、组织分化越差、有血管浸润、淋巴管浸润、存在淋巴结转移和浸润越深Snail阳性表达越高。肿瘤越大、有血管浸润、有淋巴管浸润、存在淋巴结转移和浸润越深，则CXCR4阳性表达越高。Spearman相关分析表明，Snail与CX—CR4的表达呈正相关（r=0．330，P=0．014）。Snail和CXCR4共同阳性表达为患者术后生存的独立预后因素（P=0．001）。结论CXCR4和Snail共同表达为胃癌患者独立预后因子，两者之间可能互相联系促进胃癌的侵袭和转移，通过靶向CXCR4和EMT相关因子或能干预胃癌的转移与复发。
- 陈李骏蔡成俞继卫吴巨钢陆瑞祺姜波健
- 关键词：新生物上皮间质转化CXCR4预后
- CXCR4和CD133mRNA在胃腺癌原发灶中的表达及其临床意义被引量：2
- 2012年
- 目的 探讨CXCR4和CDl33mRNA在胃腺癌原发灶中的表达及其与各临床病理参数之间的关系。分析CXCR4和CDl33mRNA二者间的相关关系。方法 分析50例胃腺癌原发灶和癌旁胃黏膜组织行免疫组化法定位检测CXCR4和CD133mRNA的相对表达率，并用半定量RT-PCR法测定CXCR4和CDl33mRNA的相对灰度值，分析上述两者间的相互关系（Fisher精确概率法）。分析CXCR4和CDl33mRNA与临床病理因素之间的联系（Spearman相关分析）。结果 CXCR4和CDl33mRNA在胃腺原发灶中的阳性表达率分别为76．0％和66．0％，显著高于癌旁胃黏膜组织中的16．0％（P=0．000）和10．0％（P=0．000）。肿瘤直径越大、TNM分期越晚及淋巴管浸润存在，则CXCR4mRNA灰度值就越高（P〈0．05）。肿瘤较大，TNM分期较晚者，CDl33mRNA灰度值越高（P〈0．05）。CXCR4和CDl33mRNA相对灰度值变化呈正相关（r=0．453，P〈0．01）。结论 CXCR4和CDl33mRNA的高表达与胃癌的肿瘤直径、TNM分期及淋巴管浸润有关。CD133mRNA相对灰度值随CXCR4mRNA相对灰摩信增加而增加．
- 周国才俞继卫陆瑞祺吴巨钢姜海广倪晓春郑林海姜波健
- 关键词：干细胞干细胞
- 趋化因子及其受体与胃癌的关系被引量：1
- 2010年
- 目的介绍趋化因子及其受体,尤其是CCL19/CCL21-CCR7及CXCL12-CXCR4轴在胃癌发生、发展中的作用。方法查阅国内、外近年来有关趋化因子及其受体与胃癌关系的文献并作综述。结果趋化因子及其受体通过对胃癌生长微环境的调控,CCL19/CCL21-CCR7在胃癌淋巴结转移过程中起着突出作用,CXCL12-CXCR4轴在胃癌腹膜转移过程中起着关键作用。CCR7可能成为特异性评价胃癌淋巴结转移潜能的分子标志物。阻断CXCL12-CXCR4轴有助于推动进展期胃癌腹膜转移治疗策略的进一步发展。结论趋化因子及其受体从不同的方面促进胃癌的演进,了解这些方面的机理可以为未来的治疗提供理论依据。以趋化因子及其受体作为一种胃癌标志物和肿瘤治疗的新靶点,在胃癌侵袭转移的评估、预后判断和治疗方面将有着广阔的临床应用前景。
- 陆瑞祺俞继卫姜波健
- 关键词：趋化因子趋化因子受体
- TGF-β1诱导胃癌细胞上皮间质转化及其上调CD44表达的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的观察TGF-β1诱导胃癌SGC7901细胞发生上皮间质转化及其对胃癌细胞生物学特性与肿瘤起始细胞特性的影响。方法TGF-β1处理胃癌SGC7901细胞后，观察其形态学变化；CCK-8法检测细胞增生能力；划痕实验及transwell实验检测细胞迁移与侵袭能力；免疫荧光法检测上皮钙黏素及间质钙黏素表达的变化；逆转录PCR法与免疫蛋白印迹法检测上皮间质转化相关因子及CD44的表达。结果TGF-β1处理SGC7901细胞后，细胞形态由上皮细胞形态向间质细胞样形态转变；TGF-β1处理后，处理组划痕愈合程度明显高于对照组（P〈0．05），处理组穿膜细胞数目（107．674-5．48）显著高于对照组（53．33±8．47，P〈0．05），TGF-β1处理组SGC7901细胞上皮钙黏素表达显著降低（P〈0．05），间质钙黏素（P〈0．05）与Snail（P〈0．05）表达显著增加，肿瘤起始细胞相关标志物CD44表达显著增加（P〈0．05）。结论TGF-β1可诱导胃癌SGC7901细胞发生上皮间质转化，增加CD44表达，抑制胃癌细胞增生，促进其侵袭和迁移。
- 蔡成俞继卫吴巨钢陆瑞祺倪晓春王守练姜波健
- 关键词：TGF-Β1上皮间质转化
- 胃癌KATO-Ⅲ细胞CD133基因的siRNA干扰及其效果比较被引量：1
- 2012年
- 目的比较3段化学合成的siRNA对KATO-Ⅲ胃癌细胞中CDl33基因的抑制效果，并初步探讨CDl33基因表达被抑制后对胃癌细胞增生的影响。方法实验分为空白对照组、阴性对照组、CDl33siRNA-1组，CD133siRNA-2组和CD133siRNA-3组。针对CD133mRNA序列设计并合成3段siRNA，利用荧光标记的siRNA转染KATO-Ⅲ胃癌细胞后，通过共聚焦显微镜荧光计数检测其转染率，用RT—PCR法和Western blot法检测并比较3段siRNA对CD133基因表达的沉默效果，采用CCK-8法检测CD133表达被抑制后对胃癌细胞增生的影响。结果siRNA在KATO—Ⅲ细胞中的转染效率可达到（85±8）％，所设计的3段siRNA均可显著抑制胃癌KATO—Ⅲ细胞CD133基因的表达，抑制率分别为（11±2）％、（19±2）％和（24±3）％。与空白组比较，CDl33siRNA-3转染组细胞的增生活性降低了（42±4）％（P〈0．05）。结论成功转染并抑制了KATO—Ⅲ胃癌细胞中CD133基因的表达，并从中筛选出了干扰效果最佳的CDl33siRNA片段，为后续CD133^＋胃癌细胞的干扰提供初步的实验研究。
- 王守练俞继卫陆瑞祺蔡成吴巨钢倪晓春姜波健
- 关键词：胃肿瘤干细胞RNAICD133
- 胃癌患者外周血CD133 mRNA检测及其临床意义被引量：5
- 2011年
- 目的 探讨胃癌患者外周血CD133 mRNA表达情况及其临床意义.方法 抽取10名健康志愿者（组1）、5例胃溃疡穿孔患者（组2）,18例胃癌术前患者（组3）及19例胃癌术后患者（组4）外周静脉血2 ml,分离单核细胞,采用半定量RT-PCR检测CD133 mRNA表达水平.结果 组3患者外周血CD133 mRNA灰度值显著高于组1和组2（P=0.001）.组4患者中12例复发转移者外周血CD133mRNA灰度值显著高于7例无复发转移者（P=0.042）.CD133 mRNA表达与淋巴结转移和肿瘤分期有关（P＜0.05）.CD133 mRNA灰度值与淋巴结转移率呈正相关（P=0.007）.结论 胃癌患者外周血高表达CD133 mRNA,其表达与淋巴结转移率正相关.胃癌术后外周血高表达CD133mRNA提示肿瘤复发或转移.
- 吴巨钢陆瑞祺张鹏李芮俞继卫姜波健
- 关键词：胃肿瘤CD133淋巴结转移
- 化疗药物对胃癌CD133＋细胞亚群的作用及其对相关凋亡基因表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的研究常规化疗药物对纯化的胃癌CD133＋细胞亚群的作用及对相关凋亡基因Bc1-2和BAX的mRNA表达的影响，进而探讨胃癌耐药的作用机制。方法采用免疫磁珠分选术分离纯化KATO-Ⅲ细胞株中CD133-和CD133-细胞亚群。采用CCK-8法分析两种亚群细胞对不同化疗药物5-氟尿嘧啶（5-Fu）、顺铂及依托泊苷（VP-16）敏感性的差别。行半定量聚合酶链反应分析化疗药物诱导后相关凋亡基因表达产物的表达差异。结果KATO—III细胞磁珠分选纯化后，经流式细胞仪分析结果显示：分选后CD133＋组所得细胞CD133＋表达率为90％。5-FU、顺铂及VP-16分别作用12h后，CD133＋组及CD133-组均开始出现凋亡的形态学改变。CCK-8检测发现CD133＋组细胞生长抑制比率较CD133-组有-定程度的下降[5-FU组为：（30．56±1．99）％～（88．60±1．95）％vs（32．81±2．67）％-（35．55±3．23）％，P=0．045；顺铂组为：（45．89±3．64）％～（81．20±1．18）％vs（50．21±3．22）％～（90．46±1．89）％，P=0．043；VP-16组为：（37．21±3．80）％-（78．49±3．22）％vs（35．55±3．23）％～（89．32±3．54）％，P=0．048]。3种化疗药物干预后，两组亚群细胞中均呈现凋亡抑制因子Bc1-2mRNA表达降低，凋亡因子BAXmRNA表达升高。这些变化在CD133＋组中较CD133-组中更为明显。结论胃癌CD133＋细胞亚群对5-FU、顺铂及VP-16具有-定耐药潜能。可能是由于BAX基因上调及Bc1-2基因下调进而诱导胃癌CD133＋细胞亚群凋亡，并由此而获得对肿瘤药物的抵抗性。
- 祝一鸣俞继卫陆瑞祺吴巨钢姜波健
- 关键词：化疗药物细胞凋亡
- CXCL12(SDF-1)-CXCR4轴在胃癌中作用的研究进展被引量：7
- 2010年
- 在胃癌发生、发展过程中,CXCL12(SDF-1)-CXCR4轴参与肿瘤生长微环境的调节,调控胃癌的演进过程。笔者对此过程的相关研究进展进行文献综述,主要包括:CXCL12(SDF-1)-CXCR4轴的构成及生物学功能,其在胃癌中的表达及意义,在胃癌的生长增殖、肿瘤侵袭和特异性转移、肿瘤组织血管生成的作用。
- 陆瑞祺俞继卫姜波健
- 关键词：胃肿瘤
- 胃癌CD133阳性细胞亚群肿瘤起始细胞样特性的检测被引量：16
- 2012年
- 目的 探讨人胃癌细胞CD133＋亚群的分选及其特性的鉴定.方法 对50例胃癌原发灶和癌旁胃黏膜组织标本行免疫组织化学染色及Western blot检测CD133蛋白的表达.采用流式细胞仪检测不同分化胃癌细胞系CD133所占百分比,免疫磁珠法分选CD133＋细胞亚群,悬浮培养并观察其生长特性,并检测CD133阳性细胞裸鼠皮下接种致瘤能力.单细胞克隆观察单个CD133＋细胞生长特性,半定量反转录聚合酶链反应法鉴定相关干细胞标记的表达.结果 CD133蛋白多定位于胃癌原发灶黏膜及黏膜下层的肿瘤细胞膜表面,其相对表达量高于癌旁胃黏膜组织（P＜0.05）.不同分化程度的人胃癌细胞系KATO-Ⅲ、SGC-7901、AGS及MKN-45中CD 133＋亚群所占相对百分比为（28±2）％、（17±2）％、（6±2）％及（4±2）％.人胃癌细胞系KATO-Ⅲ分选后阳性组中CD133＋亚群比例分别为（91±3）％；培养1周后,达到（95±2）％,并不断增殖形成细胞球.而且其增殖能力强于阴性细胞[群体倍增时间分别为（21±3）h和（40±8）h,P＜0.05].CD133阳性组和未分选组细胞裸鼠皮下接种时成瘤率分别为100％和80％；而CD133阴性组不成瘤,CD133阳性组移植瘤平均体积及重量均大于未分选组（P＜0.05,P＜0.05）.单克隆形成实验示单个CD133＋细胞可形成新的细胞克隆.半定量RT-PCR检测示其表达干细胞标记物Oct-4、Nanog、Sox-2、Musashi-1及EGFR.结论 体外可成功分离、纯化和扩增人胃癌细胞CD133＋亚群,其具有自我更新、增殖能力及较强的致瘤能力,并表达部分干细胞相关基因.
- 陆瑞祺吴巨钢周国才姜海广俞继卫姜波健
- 关键词：胃肿瘤CD133
