赵成根
- 作品数：15 被引量：66H指数：5
- 供职机构：上海中医药大学附属普陀医院更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金上海市普陀区科委自主创新基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 转基因重组质粒ATP4B-SV40T-IRES-GFP的构建及鉴定
- 2012年
- 目的:构建ATP4B-SV40T-IRES-GFP重组质粒并进行鉴定.方法:根据小鼠ATP4B启动子序列设计引物,获得的小鼠ATP4B基因启动子序列,并加入限制性内切酶酶切位点.将其装入载体IRES-GFP,获得重组载体ATP4B-IRES-GFP并进行酶切鉴定.之后将SV40T基因克隆入ATP4B-IRES-GFP载体,并用限制性内切酶PstI和AseⅠ进行验证.结果:将小鼠ATP4B启动子序列插入IRES-GFP载体,经过酶切验证获得正确的ATP4B-IRES-GFP质粒;将SV40T片段插入ATP4B-IRES-GFP,质粒测序及酶切结果验证获得正确的ATP4B-SV40T-IRES-GFP重组质粒.显微注射入小鼠受精卵可获得阳性小鼠.结论:成功构建ATP4B-SV40T-IRES-GFP重组质粒,可用于下一步构建原发性胃癌转基因小鼠.
- 张隆赵成根李大力王金玉李琦范忠泽
- 关键词：质粒转基因小鼠
- 幽门螺杆菌长期感染诱发C57BL/6小鼠胃癌模型的建立及对血管新生的影响被引量：12
- 2010年
- 目的:研究H.pylori长期感染C57BL/6小鼠致胃黏膜病变及其致癌性,并从血管新生的角度探讨H.pylori感染致胃癌发生的可能机制.方法:将80只SPF级C57BL/6小鼠随机分为正常组和模型组,每组40只.正常组正常饲养,模型组经口直接灌服H.pylori标准株SS1,距末次灌胃后10wk、25wk、45wk、72wk分4批处死,每批每组各处死10只小鼠.快速尿素酶试验、Giemsa染色法观察H.pylori在胃黏膜的定植情况,HE染色观察小鼠胃黏膜病理变化,免疫组织化学法观察微血管密度(microvessel density,MVD)的变化.结果:正常组动物的胃窦、胃体及十二指肠黏膜的尿素酶实验、Giemsa染色结果均呈阴性,在末次接种H.pylori后第10周、第25周、第45周、第72周,模型组H.pylori的定植率分别为88.9%、100%、100%、100%;72wk时,模型组慢性胃炎、萎缩性胃炎、肠化生、异型增生和胃癌的发生率分别为100%,88.9%,77.8%,33.3%和22.2%,胃黏膜组织中MVD为18.56±2.62,较正常组(2.50±1.54)明显升高(P<0.01).结论:成功建立了H.pylori长期感染诱发C57BL/6小鼠胃癌模型,且H.pylori可增加小鼠胃黏膜MVD,可能在胃黏膜的癌变中发挥作用.
- 李琦刘宁宁赵成根周宁王炎孙珏范忠泽
- 关键词：幽门螺杆菌胃癌微血管密度
- 帕瑞昔布对人结肠癌SW1116细胞裸鼠移植瘤生长的影响及安全性观察
- 2015年
- 目的观察帕瑞昔布对人结肠癌SW1116细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及安全性。方法建立人结肠癌SW1116细胞裸鼠皮下移植瘤模型。将24只BALB/C裸鼠随机分为对照组、帕瑞昔布组和5-Fu组。记录各组裸鼠的体重和瘤体积变化,用药30 d后取瘤及脾脏,计算脾脏指数、抑瘤率,检测血清ALT和BUN,并用透射电镜观察瘤组织的形态学变化。结果帕瑞昔布组未见明显的药物相关毒副反应。帕瑞昔布能抑制SW11 16细胞裸鼠皮下移植瘤的生长。在干预前18 d,帕瑞昔布组的肿瘤抑制率逐渐增加,但随着药物干预时间的延长,抑制率却逐渐降低。结论裸鼠体内短期应用帕瑞昔布（15~18 d）是安全的,并能抑制SW1116细胞皮下移植瘤的生长。
- 杨海波马艳春赵成根王建东高家治施展
- 关键词：帕瑞昔布裸鼠皮下移植瘤安全性
- 二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌组织CLDN1基因表达及其甲基化被引量：4
- 2013年
- 目的探讨二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导大鼠肝癌发生中肝癌组织CLDN1基因表达及其启动子甲基化的规律。方法 65只雄性Wistar大鼠随机选择40只作为模型组,其余作为正常组。模型组在1～12周饮用含DEN 80 mg/L的饮水以诱癌(每日8mg/kg),各组在造模过程的第4周、8周、12周、16周随机5只取肝,第20周剩余大鼠取肝,应用RT-PCR方法检测肝组织CLDN 1 mRNA的表达,应用MSP法检测肝组织CLDN1启动子甲基化和非甲基化。结果模型大鼠病死率为10%(4/40),正常组无死亡。至第20周,成瘤率达到100%。RT-PCR显示,与正常组比较,模型组在16周和20周CLDN1mRNA表达下调(P<0.05),其他各周两组差异不显著。MSP结果表明,模型组肝组织CLDN1甲基化率达77.78%,而正常肝组织甲基化率为24%,两者比较差异有显著性(P<0.01)。结论 CLDN1启动子甲基化及CLDN1基因表达下调与大鼠肝癌病变相关,对其机制值得进一步深入研究。
- 张斌李琦殷佩浩高虹赵成根范忠泽
- 关键词：原发性肝癌二乙基亚硝胺DNA甲基化
- 青藤碱对人结肠癌细胞株SW480增殖和细胞周期的影响被引量：7
- 2014年
- 目的研究青藤碱对人结肠癌SW480细胞增殖和细胞周期的影响。方法用不同浓度的青藤碱处理体外培养的人结肠癌SW480细胞24、48、72h后,采用CCK法检测细胞的增殖活性,采用流式细胞术检测细胞的细胞周期分布,并用光镜和透射电镜观察SW480细胞的形态学变化。结果青藤碱在体外可抑制SW480细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性。干预48h后,中、低浓度的青藤碱(8mmol/L、4mmol/L)可诱导SW480细胞G1期细胞比例增加,而高浓度的SIN(16mmol/L、10mmol/L)可诱导G1期、G2期细胞比例增加。光镜与电镜下均见凋亡细胞增多。结论青藤碱在体外能抑制人结肠癌SW480细胞增殖和诱导该细胞系的凋亡,其机制可能与其阻滞细胞周期进程有关。
- 杨海波施展马艳春倪振华赵成根高家治
- 关键词：青藤碱抗肿瘤细胞周期细胞凋亡
- 健脾解毒方对幽门螺杆菌诱发胃癌血管新生的抑制研究被引量：21
- 2011年
- 目的:探讨健脾解毒方在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)长期感染诱发C57BL/6小鼠胃癌过程中对微血管密度(microvessel density,MVD)和血管新生相关基因的调控作用,为其治疗H.pylori感染相关胃病提供实验依据。方法:采用H.pylori标准株SS1 ig的方法建立H.pylori感染C57BL/6小鼠诱发胃癌动物模型,分为对照组、模型组、健脾解毒方低剂量组和健脾解毒方高剂量组。72周时,免疫组化法检测各组小鼠胃黏膜MVD的变化;实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)法和免疫组化法检测各组小鼠胃黏膜血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)及其受体Tie-2 mRNA和蛋白的表达。结果:对照组、模型组、健脾解毒方低、高剂量组胃黏膜MVD分别为(2.50±1.54),(18.56±2.62),(14.61±3.60),(7.39±1.75)个/视野。模型组MVD较对照组明显增高,P<0.01;健脾解毒方低、高剂量组MVD较模型组显著降低,P<0.01。模型组VEGF,Ang-2,Tie-2 mRNA表达较对照组都明显增加,P<0.01;健脾解毒方低、高剂量组均可显著降低三者的表达,并成一定的剂量依赖效应。结论:H.pylori诱发C57BL/6小鼠胃癌过程中,可增加胃黏膜MVD,促进VEGF,Ang-2,Tie-2的表达,在H.pylori诱导的胃癌发生中起到促进作用;健脾解毒方可减少MVD,抑制VEGF,Ang-2,Tie-2的表达,这可能是其防治胃癌的重要机制之一。
- 刘宁宁王炎周利红赵成根吴东辉范忠泽李琦
- 关键词：健脾解毒方幽门螺杆菌胃癌血管新生微血管密度促血管生成素-2促血管生成素-2
- 健脾解毒方对人结肠癌HCT116/L-OHP裸鼠皮下移植瘤的作用及Caspase3表达的影响被引量：5
- 2014年
- 目的:观察中药健脾解毒方对人结肠癌HCT116/奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)裸鼠皮下移植瘤化疗的增效作用,初步探讨其增效的作用机制.方法:建立人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT116/L-OHP裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为空白组、奥沙利铂组、健脾解毒方组、健脾解毒方低剂量联合奥沙利铂组、健脾解毒方高剂量联合奥沙利铂组.治疗中测量肿瘤的长径和短径,根据公式计算瘤体体积,描绘瘤体生长曲线,治疗结束后称取瘤质量,公式计算瘤体抑制率和瘤质量抑制率;免疫组织化学,Western blot技术检测皮下移植瘤Caspase3的表达.结果:健脾解毒方高剂量联合奥沙利铂组的瘤体体积和瘤质量(995.54 mm3±87.26 mm3;0.85g±0.06 g)及健脾解毒方低剂量联合奥沙利铂组的瘤体体积和瘤质量(1318.32 mm3±100.68mm3;1.06 g±0.07 g)明显低于单用健脾解毒方组(1967.83 mm3±178.83 mm3;1.71 g±0.11 g)或奥沙利铂组(1698.46 mm3±147.61 mm3;1.56g±0.12 g),有统计学意义(P<0.05或P<0.01);同时健脾解毒方高剂量联合奥沙利铂组的瘤体抑制率和瘤质量抑制率(55.63%;56.85%)及健脾解毒方低剂量联合奥沙利铂组的瘤体抑制率和瘤质量抑制率(41.25%;46.19%)明显高于单用健脾解毒方组(12.30%;13.20%)或奥沙利铂组(24.31%;20.81%),有统计学意义(P<0.05或P<0.01);健脾解毒方联合奥沙利铂组均可上调裸鼠皮下移植瘤组织Caspase3蛋白的表达有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论:健脾解毒方联合奥沙利铂能抑制裸鼠结肠癌皮下移植瘤的生长,增加奥沙利铂的疗效,其增效的机制是通过上调Caspase3的表达而促进细胞凋亡有关.
- 张瑞娟余倩云许建华孙珏赵成根范忠泽
- 关键词：健脾解毒方结肠癌半胱天冬酶3
- 肠胃清对HP感染诱发胃癌过程中NF-kB信号通路调控机制的研究
- 目的:通过由中医健脾解毒法则组方的肠胃清对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染致胃癌形成过程的干预,从核因子kB(Nuclear factor kappa B,NF-kB)信号通路角度探讨肠胃清...
- 赵成根
- 关键词：肠胃清胃癌NF-KB信号通路
- 文献传递
- 健脾解毒方对二乙基亚硝胺诱导的肝癌大鼠肝组织CCR1和Cyclin D1 mRNA表达的影响
- 2013年
- 目的:探讨二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导大鼠肝癌过程中肝组织CC趋化因子受体1(CCR1)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达规律及健脾解毒中药的干预机制。方法:雄性Wistar大鼠,随机分为正常组(n=25)、模型组(n=40)及中药组(n=40)。除正常组外,其他组大鼠在1～12周饮用含DEN 80mg/L的饮水以诱癌(8mg.kg-1.d-1),共12周。中药组大鼠同时给予含生药1.75g/ml的健脾解毒方灌胃(10ml/kg),正常组大鼠给予10ml/kg生理盐水灌胃,1次/d,共12周。于4、8、12、16周时相点,各组随机取5只大鼠剖腹取肝,20周时剩余大鼠全部剖腹取肝,观察肝脏外观,计算病死率和腹水生成率,肝组织进行HE染色,应用RT-PCR半定量检测肝组织CCR1、Cyclin D1 mRNA的表达。结果:在20周实验结束时,正常大鼠无死亡,而模型大鼠死亡率为42.5%(17/40),中药组死亡率为17.5%(7/40);16周～20周时模型组大鼠腹水发生率为87.5%(7/8),而中药组腹水发生率为44.4%(8/18),中药组与模型组差异有显著性意义(P<0.05)。肝组织HE染色表明,至第20周成瘤率达到100%。RT-PCR结果显示,与正常组比较,模型组各时段CCR1 mRNA均显著上调(P<0.01),与模型组比较,中药组除第8周外,其余各时段CCR1 mRNA均显著下调(P<0.01);与正常组比较,模型组大鼠除第4周及8周的Cyclin D1表达下调外,其余均出现显著上调,与模型组比较,中药组大鼠第4周、8周及12周的Cyclin D1表达上调,在16周时出现显著下调(P<0.01),第20周时两组差异不明显。结论:CCR1、Cyclin D1的表达上调与二乙基亚硝胺诱导肝癌形成密切相关,健脾解毒中药可以较好延缓肝癌的发生和发展,可能与下调CCR1关系密切,但下调Cylin D1的作用不明显,值得进一步深入研究。
- 张斌李琦殷佩浩赵成根高虹范忠泽
- 关键词：二乙基亚硝胺健脾解毒方细胞周期蛋白D1
- DEN诱导大鼠肝癌形成中miR-199a的表达机制及健脾解毒法的干预作用被引量：14
- 2010年
- 目的:探讨中药复方健脾解毒方对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的大鼠肝癌的预防作用及其调控miR-199a的表达机制.方法:♂Wistar大鼠,随机分为正常组(n=25)、模型组(n=40)及中药预防组(n=40).除正常组外,其他组在1-12wk饮用含DEN80mg/L的饮水[mg/(kg?d)]以诱癌,中药组同时给予含生药1.75g/mL的健脾解毒方灌胃(10mL/kg),正常组给予10mL/kg生理盐水灌胃,每日1次,共12wk.于4、8、12、16wk时相点,各组随机取5只大鼠处死取肝,20wk将剩余大鼠全部处死取肝,观察肝脏外观,计算死亡率和腹水生成率,比较肝脾指数,肝组织进行HE染色,应用Real-timePCR检测肝组织miR-199a的表达.结果:在20wk实验结束时,正常大鼠无死亡,而模型大鼠死亡率为42.5%(17/40),预防组死亡率为17.5%(7/40),16-20wk时模型组腹水发生率为87.5%(7/8),预防组为44.4%(8/18),与模型组有差异性(P<0.05).正常组没有肿瘤形成,模型组和预防组在16wk后成瘤率均为100%.16wk模型组肝癌Ⅲ级发生率为100%(5/5),而预防组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级肝癌发生率分别为40%(2/5)、40%(2/5)及20%(1/5),两组比较有差异(P<0.05).与模型组比较,中药预防组有显著降低肝脾指数的作用(均P<0.01).PCR结果显示,模型组肝组织miR-199a较正常组明显上调,中药预防组除16wk外均有显著下调miR-199a表达的作用(均P<0.01).结论:健脾解毒方有预防DEN诱导大鼠肝癌发生的作用,其机制可能部分与下调miR-199a的表达有关.
- 张斌李琦殷佩浩赵成根李先茜高虹孙珏范忠泽
- 关键词：健脾解毒方二乙基亚硝胺微RNA
