谢丽萍
- 作品数：52 被引量：37H指数：4
- 供职机构：上海医药工业研究院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- 利用基因组改组技术改良7-ACA产生菌被引量：1
- 2013年
- 将含假单胞菌(Pseudomonas)头孢菌素C(CPC)酰基转移酶基因ecs的pYG233质粒转入CPC产生菌顶头孢霉(Acremonium chrysogenum)中,构建可发酵7-氨基头孢烷酸(7-ACA)的基因工程菌(该菌株含有腐草霉素抗性标记phleo),为第一亲本。同时,构建含有潮霉素抗性标记(hgh)和ecs基因的重组质粒pYG236转化顶头孢霉菌株,以顶头孢霉(含有pYG236)作为第二亲本与第一亲本进行基因组改组,利用双重抗性标记作为融合子筛选条件,筛出一株7-ACA产量提高6.5倍的融合子工程菌。
- 刘春磊刘艳谢丽萍胡又佳
- 关键词：顶头孢霉7-氨基头孢烷酸头孢菌素C基因组改组
- β-内酰胺酶抑制多肽的串联表达及抑制活性研究
- 2009年
- 细菌对β-内酰胺类抗生素及β-内酰胺酶抑制剂产生耐受性使新型β-内酰胺酶抑制剂成为抗生素领域的研究热点。之前的研究通过酵母双杂交系统筛选到了一个β-内酰胺酶的结合多肽SIPIS04-01,体外实验表明其具有抑制氨苄西林的活性,为提高多肽的表达量,以基因串联表达方式-随机定向串联法成功构建密码子改造之后的小肽SIPIS04-01编码基因SIPIS04-01N的双拷贝质粒pYG563,使表达产物中融合蛋白占细菌蛋白总量的比例较单拷贝表达提高了48.4%。纯化所得小肽SIPIS04-01N对TEM-1类型的β-内酰胺酶具有体外抑制活性,并测定了抑制常数Ki。
- 许明飞谢丽萍杨涛朱春宝朱宝泉胡又佳
- 关键词：Β-内酰胺酶抑制剂
- 刺糖多孢菌菌种选育和遗传改造研究进展被引量：1
- 2022年
- 刺糖多孢菌是一种土壤放线菌,其次级代谢产物多杀菌素(1)是一种广谱大环内酯类生物杀虫剂,因其独特的杀虫机制和安全高效的性质而在世界范围内广泛使用。本研究简单介绍了1的分子合成途径及涉及的基因,综述了刺糖多孢菌的菌种选育和遗传改造方法的研究进展,包括传统选育、代谢调控和合成生物学方面的研究进展,为1的产业化研究提供参考。
- 李文杰谢丽萍
- 关键词：多杀菌素刺糖多孢菌
- 一种制备β-内酰胺酶抑制多肽的方法及所用的表达载体
- 本发明公开了一种制备β-内酰胺酶抑制多肽的方法及其中所用的表达载体、融合蛋白等。本发明制备β-内酰胺酶抑制多肽的方法包括以下步骤：1)构建一种表达His tag融合蛋白的重组表达载体，该His tag融合蛋白是β-内酰胺...
- 胡又佳谢丽萍朱春宝朱宝泉许明飞
- 文献传递
- 顶头孢霉蛋白质组的制备被引量：4
- 2011年
- 分别采用液氮研磨-裂解酶破壁和尿素-硫脲结合三氯乙酸(TCA)-丙酮提取法,提取丝状真菌顶头孢霉Acremonium chrysogenum 84-3-87总蛋白,以SDS-PAGE和双向电泳检测比较两法的蛋白提取效果。结果显示,后法所获蛋白浓度高、条带多,双向电泳图像清晰,横条纹较少,拖带现象轻,可作为后续比较蛋白质组学研究的蛋白样本制备方法。
- 刘红刘艳谢丽萍朱宝泉胡又佳
- 关键词：顶头孢霉丝状真菌双向电泳
- 菌丝霉素的高效表达、纯化及活性被引量：3
- 2013年
- 将来自腐生子囊菌中的菌丝霉素成熟肽基因经大肠杆菌密码子优化后,克隆到pET32a(+)载体中,构建了含His-tag标签和TEV酶识别位点的菌丝霉素表达质粒pYG330,使含菌丝霉素的融合蛋白在大肠杆菌中以可溶形式高效表达。建立了菌丝霉素的纯化路线,将融合蛋白进行TEV酶切后脱盐再进行亲和色谱分离,收集目的蛋白冻干浓缩,通过高效液相色谱进一步纯化获得纯度72%的目的多肽。纯化所得菌丝霉素对临床耐药金黄色葡萄球菌M-2和枯草芽孢杆菌有明显的抑菌活性。
- 梁文胡又佳朱宝泉谢丽萍
- 关键词：纯化抑菌活性
- 一种生产鲨烯的基因工程菌及其方法
- 本发明公开了一种生产鲨烯的基因工程菌及其方法。该基因工程菌为大肠杆菌(Escherichia coli)中表达鲨烯合酶基因、5‑磷酸脱氧木酮糖合酶基因、异戊烯基二磷酸异构酶基因以及法尼基焦磷酸合酶基因的基因工程菌；所述鲨...
- 谢丽萍胡又佳刘海元龚桂花张伟韩姝潘洁宋智慧
- 文献传递
- 柔红霉素生物合成基因簇的克隆及其基因打靶研究
- 2014年
- 本研究通过构建柔红霉素产生菌天蓝淡红链霉菌Streptomyces coeruleorubidus DM的基因组文库,获得2 230个重组克隆。利用菌落原位杂交和PCR筛选获得黏粒Cosmid 8-22,其插入片段大小为41 431 bp,含36个完整的开放阅读框,基本包含了完整的柔红霉素生物合成基因簇。利用黏粒Cosmid 8-22成功构建了基因打靶系统,同时敲除部分dau W和完整的dnr X基因。HPLC结果显示,敲除突变株的柔红霉素产量较出发菌提高了3~4倍。
- 袁天杰谢丽萍朱宝泉胡又佳
- 关键词：柔红霉素基因组文库基因打靶基因敲除
- 天蓝淡红链霉菌SIPI-1482中酮还原酶基因dnrU的阻断突变研究被引量：1
- 2007年
- 目的:研究柔红霉素产生菌天蓝淡红链霉菌SIPI-1482中酮还原酶基因dnrU阻断后的产物(13s)-13-二氢柔红霉素及其他发酵产物的变化。方法:利用同源重组的原理,以大肠杆菌质粒pUC18为基础构建了dnrU基因交换质粒,通过在SIPI-1482染色体上的dnrU基因中插入安普霉素抗性基因来筛选dnrU的阻断突变株。结果和结论:PCR验证表明成功地阻断了dnrU基因。dnrU基因敲除后,重组菌发酵产物中(13s)-13-二氢柔红霉素消失,而其他发酵中间产物也有一定变化。
- 谢丽萍宫倩胡又佳朱春宝朱宝泉
- 关键词：天蓝淡红链霉菌同源重组
- 1-脱氧-D-木酮糖醇-5-磷酸还原异构酶(DXR)作为新的药物靶点的研究进展被引量：1
- 2014年
- 植物、藻类和细菌等可利用2C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(MEP)途径生物合成类异戊二烯前体异戊酰焦磷酸(IPP)及其异构体二甲烯丙基焦磷酸(DMAPP)等生长所必须的前体,因此MEP途径作为除草剂、抗菌药物和抗疟疾药物的药物靶点可用于新药开发。其中MEP途径中的第二个酶1-脱氧-D-木酮糖醇-5-磷酸还原异构酶(DXR)是研究最为广泛的靶点,膦胺霉素即为该酶的抑制剂。本综述主要介绍MEP途径、DXR及其抑制剂的研究进展。
- 陈习平谢丽萍胡又佳
- 关键词：抑制剂药物靶点
