许汉鹏
- 作品数：29 被引量：190H指数：8
- 供职机构：第四军医大学基础医学部神经科学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 原核表达的Janusin片段对体外培养脊髓神经细胞形态的影响
- 1998年
- 目的：观察Ｊａｎｕｓｉｎ不同片段作为细胞外基质时对脊髓培养神经细胞形态的影响．方法：胚胎第１４日～１５日龄小鼠脊髓神经细胞接种在铺有原核表达的不同Ｊａｎｕｓｉｎ片段的培养孔内，在无血清培养液中培养２６ｈ，经ＡＢＣ法染色，图像处理仪摄取图像后，用体视学方法测量ＮＳＥ阳性细胞数及突起长度，计算单个细胞的突起长度并做统计学方差分析．结果：在无血清培养条件下，细胞呈不同形态：一种胞体较大、折光性差，突起具有复杂的分支，数量较多；一种胞体小、折光性强，多为单极或双极，突起分支少，数量较少；还有一种胞体扁平，自胞体向四周有较均匀的放射状突起，胞质内有２个～４个圆而亮的小泡状的结构，数量最少．结论：Ｊａｎｕｓｉｎ分子上的不同片段作为细胞外基质时，对脊髓培养神经细胞的突起生长影响不同，ＦＮ１－２组平均突起长度最短，明显抑制突起生长。
- 许汉鹏梁哲肖华胜王浩军鞠躬
- 关键词：脊髓体视学
- 培养胚胎神经干细胞移植入纹状体后的形态学观察被引量：1
- 2003年
- 本研究的目的是 :将体外培养的小鼠胚胎大脑皮层和脊髓的神经干细胞经单细胞悬液微移植后观察其在大鼠纹状体的存活、迁移和分化的状况。实验在无血清条件下将这些细胞扩增、培养再经活细胞荧光染料 Di I标记后 ,采用微移植的方法 ,通过脑立体定位仪上用微玻璃针将干细胞分别植入成年大鼠双侧纹状体的对称部位。大鼠存活 8周后 ,经灌注固定、恒冷箱切片 ,在荧光显微镜下观察标记的移植细胞的迁移状况 ;用星形胶质细胞特异性抗体观察移植区 GFAP的表达 ,以显示移植细胞分化状况。结果表明 :来源于胚胎小鼠大脑皮层和脊髓的体外培养神经干细胞经微移植后 ,均可在成年大鼠脑内纹状体区域存活 ,移植的神经干细胞可向周围的脑实质内迁移 ,迁移细胞沿特定的纹状体结构分布。神经干细胞主要分化成星形胶质细胞。本实验结果提示 ,移植的神经干细胞可在脑实质内存活、迁移和分化。
- 许汉鹏苟琳杨浩王春婷鞠躬
- 关键词：神经干细胞体外培养荧光标记
- Numb基因在培养神经干细胞中的表达(英文)被引量：1
- 2003年
- 目的观察参与细胞发育分化和细胞非对称性分裂的notch信号传导路的分子Numb在体外培养的神经干细胞内的分布和表达,以期为在体外控制神经干细胞的分化提供新的线索。方法取孕14d(E14)Balb/c近交系小鼠胚胎,采用无血清培养技术,在体外进行神经干细胞克隆的培养传代,经过免疫细胞化学鉴定后,用Numb特异性引物对培养的神经干细胞进行RT-PCR分析,PCR产物经克隆测序后,用地高辛标记,对神经干细胞克隆进行原位杂交。结果在培养的神经干细胞内有大量细胞(>95%)均为Numb基因表达信号阳性;干细胞克隆内部中心和边缘相互间未见明显差别。结论Numb基因可能在神经干细胞的增殖和分化过程中起重要作用。
- 许汉鹏苟琳黄文晋鞠躬
- 关键词：细胞培养神经干细胞克隆基因表达细胞增殖胚胎学
- Numb基因在培养神经干细胞中的表达被引量：1
- 2002年
- 为了观察在体外培养的神经干细胞内参与细胞发育分化和细胞非对称性分裂的 notch信号传导路的分子 numb的分布和表达 ,采用无血清培养技术 ,在体外进行神经干细胞克隆的培养传代 ,经过免疫细胞化学鉴定后 ,用 num b特异性引物对培养的神经干细胞进行 RT-PCR分析 ,PCR产物经克隆测序后 ,用地高辛标记 ,对神经干细胞克隆进行原位杂交。结果表明 :在培养的神经干细胞内有大量细胞 ( >95 % )均为 numb基因表达信号阳性 ;
- 许汉鹏苟琳黄文晋鞠躬
- 关键词：基因表达NOTCH受体RT-PCR原位杂交小鼠
- 两种不同基质的联合应用对体外分散培养神经元的促贴壁作用被引量：4
- 2001年
- 王春婷杨浩许汉鹏孟晋宏游思维鞠躬
- 关键词：神经细胞培养多聚赖氨酸胶原细胞贴壁
- MG患者AChRAb对培养大鼠神经元胞浆钙的影响
- 2005年
- 目的 本研究从离体细胞水平探讨重症肌无力 (MG)患者 CNS受损的可能机制。方法 从 MG患者和正常人血中提取 Ig G。体外培养新生 SD大鼠皮层神经元 ,用免疫组化法观察 ACh RAb与神经元 n ACh R免疫结合反应 ,并行神经元胞浆钙测定。结果 MG患者 Ig G可与离体培养的皮层神经元免疫结合并引起异常胞浆钙变化 ,而正常人血中提取的 Ig G则否。结论 MG患者外周 Ig G(ACh RAb)可与离体培养的神经元 n ACh R结合并引起神经元生理活性变化 ,是 MG患者 CNS受损的可能机制。
- 刘睿李柱一吴玉梅许汉鹏王者晋
- 关键词：胞浆皮层神经元CNS离体细胞
- 胸椎黄韧带骨化患者黄韧带细胞的体外培养及初步鉴定被引量：6
- 2007年
- 目的探讨胸椎黄韧带骨化的发病机理。方法2004年3月-2004年12月对8例行后路减压的下胸椎黄韧带骨化患者（男性5例，女性3例，平均年龄55岁）进行术中取材，采用组织块培养法，体外培养下胸椎黄韧带骨化患者非骨化区域的黄韧带细胞，并进行细胞化学，免疫细胞化学等方面研究；同时对7例急性外伤性下胸椎压缩骨折行胸椎后路减压术的患者（男性5例，女性2例，平均年龄28岁）进行术中取材，体外培养青壮年患者的下胸椎黄韧带细胞作为正常对照。结果体外成功地培养出黄韧带细胞15株，其中骨化患者黄韧带细胞8株（OLF1～OLF8），正常黄韧带细胞7株（NLF1～NLF7），黄韧带细胞可以在体外增殖和传代，通常正常黄韧带生长较慢，而骨化患者的黄韧带细胞则生长较快，并且可形成典型的钙结节样结构；80％以上的细胞呈碱性磷酸酶（ALP）强阳性反应；细胞内的ALP活性及其合成的骨钙素（BGP）含量均较正常对照组明显升高；细胞浆有BMP-2与TGF—betal的阳性表达，表明体外培养的下胸椎黄韧带骨化患者非骨化区域的黄韧带细胞呈现典型的成骨细胞表型特征：而正常黄韧带细胞主要为成纤维细胞表型。结论胸椎黄韧带骨化患者的非骨化区域中存在大量具备典型的成骨细胞表型特征的细胞，可能被骨形成蛋白等骨生长因子所调控。
- 王哲许汉鹏罗卓荆张义福史晓娟
- 关键词：黄韧带骨化异位性细胞培养技术
- 神经干细胞克隆内细胞的扫描电镜超微结构研究
- 许汉鹏苟琳黄晓峰鞠躬
- 文献传递
- 退行性变黄韧带细胞的体外培养及初步鉴定被引量：4
- 2004年
- 目的:探讨黄韧带退变的发生机理。方法:采用组织块培养法,体外培养正常黄韧带和退变性黄韧带细胞,并进行细胞化学、免疫细胞化学等方面研究。结果:黄韧带细胞可以在体外增殖和传代,退变性黄韧带细胞呈现出某些成骨细胞表型特征,而正常黄韧带细胞主要为成纤维细胞表型。结论:退变黄韧带中存在大量具备某些成骨细胞表型特征的细胞,其中包括软骨细胞,它们可能被骨形成蛋白等骨生长因子所调控。
- 王哲许汉鹏王全平张俊华李明全雷伟罗卓荆
- 关键词：细胞培养体外培养细胞鉴定细胞分离
- 小鼠神经干细胞的分离和培养及其鉴定被引量：18
- 2002年
- 目的 探讨体外分离和培养及鉴定小鼠神经干细胞 ,为相关的实验研究奠定基础。方法 利用神经干细胞条件培养基和单细胞克隆技术 ,从胚胎小鼠大脑皮质分离并体外培养胚胎期小鼠大脑皮质细胞 ,连续稳定传代 2 0代后 ,以免疫荧光细胞化学法检测克隆细胞Nestin和分化后细胞中胶质原纤维酸性蛋白、β tublin和半乳糖苷酶的表达。 结果 从小鼠大脑皮层分离的细胞群具有连续形成克隆能力 ,其Nestin表达阳性。分化后的细胞可表达神经元、星形胶质细胞和寡突胶质细胞的特异性抗原。结论 成功分离并获得了小鼠皮层神经干细胞 ,该细胞可连续稳定传代 ,具备多向分化潜能 。
- 章翔李侠吴景文王占祥许汉鹏杨大莉
- 关键词：小鼠神经干细胞细胞培养
