许丽红
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 酵母双杂交筛选PMEPA1互作蛋白
- 2012年
- 采用酵母双杂交技术筛选与前列腺跨膜蛋白PMEPA1相互作用的蛋白质,构建了pGBKT7-PMEPA1诱饵质粒,获得与PMEPA1互作蛋白,GST pull-down实验确定2种蛋白间的相互作用.构建了诱饵载体转化酵母菌Y2HGold,对酵母宿主无毒性、无自激活活性.得到阳性克隆Dynactin6,GST pull-down实验证实PMEPA1与Dynactin6蛋白间相互作用.推测蛋白Dynactin6可能参与调控PMEPA1在细胞的运输.
- 罗深恒许丽红楚雯马岳刁爱坡
- 关键词：酵母双杂交
- PMEPA1蛋白的原核表达、纯化及其抗体制备
- 2012年
- 为了从蛋白水平上检测前列腺跨膜蛋白PMEPA1(prostate transmembrane protain,androgen induced 1)在细胞内的表达和功能,构建了原核表达重组质粒pTrcHisA-PMEPA1和pGEX4T-2-PMEPA1,转化大肠杆菌BL21-RIPL后,IPTG诱导蛋白表达,分别用Ni-NTA和谷胱甘肽琼脂糖凝胶层析柱纯化蛋白。用His-PMEPA1免疫兔子制备抗体,并用GST-PMEPA1对抗体进行纯化。免疫印迹检测显示抗体能够特异识别细胞中内源PMEPA1蛋白。
- 许丽红罗深恒王莎莎侯国丽刁爱坡
- 关键词：原核表达抗体纯化
