侯国丽
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- PMEPA1蛋白的原核表达、纯化及其抗体制备
- 2012年
- 为了从蛋白水平上检测前列腺跨膜蛋白PMEPA1(prostate transmembrane protain,androgen induced 1)在细胞内的表达和功能,构建了原核表达重组质粒pTrcHisA-PMEPA1和pGEX4T-2-PMEPA1,转化大肠杆菌BL21-RIPL后,IPTG诱导蛋白表达,分别用Ni-NTA和谷胱甘肽琼脂糖凝胶层析柱纯化蛋白。用His-PMEPA1免疫兔子制备抗体,并用GST-PMEPA1对抗体进行纯化。免疫印迹检测显示抗体能够特异识别细胞中内源PMEPA1蛋白。
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- 关键词：原核表达抗体纯化
- 果蝇Golgin-84在发育中的表达和功能研究
- 2013年
- 高尔基体形态和结构的维持与真核细胞内的物质运输和细胞正常功能密切相关,高尔基体蛋白Golgin-84对维持高尔基体形态发挥了重要作用,但其在发育中的功能尚不清楚。为了研究Golgin-84在果蝇发育中的作用,成功制备并纯化了抗果蝇Golgin-84的多克隆抗体并成功构建了UAS-golgin-84-V5过表达和golgin-84 RNAi转基因果蝇,并对golgin-84在果蝇发育中的作用作了初步分析。蛋白免疫印迹和免疫荧光染色实验表明:制备的Golgin-84抗体能特异性识别重组和内源Golgin-84蛋白;Golgin-84与高尔基体蛋白GM130共定位;Golgin-84在果蝇不同发育阶段的各组织中广泛表达,在睾丸中表达较高。另外发现,选择性地在果蝇翅膀中抑制Golgin-84表达使得翅脉发育异常;过表达Golgin-84导致果蝇翅膀生长图式出现缺陷。该实验成功制备了果蝇Golgin-84抗体,获得了golgin-84转基因果蝇,并对golgin-84的功能作了初步的分析,为进一步阐明Golgin-84的作用机制奠定了基础。
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- 关键词：黑腹果蝇抗体制备过表达
