董飚
- 作品数：21 被引量：75H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 荧光偏振法建立格尔德霉素-Hsp90α结合高通量筛选模型及其应用被引量：1
- 2011年
- 目的:建立格尔德霉素(geldanamycin,GA)-Hsp90α结合高通量荧光偏振法筛选模型及应用此模型探查新的格尔德霉素衍生物。方法:本模型利用荧光偏振原理,在均相溶液中,以异硫氰酸荧光素(FITC)标记的格尔德霉素作为配基,与Hsp90α蛋白作用,采用荧光仪检测荧光偏振值。以竞争性结合方式评价新格尔德霉素衍生物对Hsp90α的亲和力,以期找出更好的格尔德霉素衍生物。结果:成功建立了荧光偏振原理的格尔德霉素-Hsp90α结合模型,其Z因子可达0.641。所测试的格尔德霉素衍生物样品中,GA-APML和GA-AEPD抑制GA-Hsp90α结合的IC50分别为82.98和90.06 nmol.L-1。结论:建立的格尔德霉素-Hsp90α结合荧光偏振法模型基本达到进行高通量实验所需的标准。所设计格尔德霉素衍生物仍具备与格尔德霉素相同的对Hsp90α亲和力,说明了在这些位点对格尔德霉素进行改造是可行的。
- 董飚陶佩珍李艳萍李玉环
- 关键词：荧光偏振HSP90Α
- RT/PR双靶点HIV抑制剂及其制备方法和应用
- 本发明公开了RT/PR双靶点HIV抑制剂及其制备方法和应用。该RT/PR双靶点HIV抑制剂由式1所示的化合物或其药学上可接受的盐制备。式1所示的化合物具有明显的抑制HIV逆转录酶和抑制HIV蛋白酶的活性；毒性研究显示其具...
- 王玉成朱梅白晓光张国宁王菊仙岑山董飚
- 文献传递
- 高通量荧光底物HIV-1蛋白酶模型的建立被引量：5
- 2006年
- 目的应用荧光方法建立、优化、评价艾滋病病毒1型(HIV-1)蛋白酶抑制剂高通量筛选模型,并用于大规模样品筛选。方法将p100w表达质粒转化E.coli细菌细胞,使其表达包涵体形式的HIV-1蛋白酶融合蛋白,制备纯化自剪切后成熟的HIV-1蛋白酶。通过测定Km值及已知HIV蛋白酶抑制药的IC50对酶进行鉴定。优化酶反应体系,评价模型的可靠性。建立、比较HPLC酶切分析法及荧光底物法两种测定酶活性方法。结果建立了高通量HIV-1蛋白酶筛选模型,经优化减少酶及底物用量,降低了成本。在模型可靠性评价中,Z因子达到0.786以上。在对9000个微生物发酵产物样品的筛选中,验证了方法的可应用性,并获得阳性菌株41个。结论所建立的荧光方法高通量筛选模型稳定可靠,效率比传统的HPLC酶切分析法提高,适用于大规模筛选HIV-1蛋白酶抑制剂。
- 董飚章天陶佩珍
- 关键词：艾滋病病毒蛋白酶高通量筛选
- 丙型肝炎病毒解旋酶活性高通量筛选模型的建立
- 2018年
- 目的建立丙型肝炎病毒(HCV)解旋酶抑制剂高通量筛选模型,筛选抗HCV药物。方法应用荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)法检测丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3的解旋酶活性,并对反应温度、反应缓冲液pH、解旋酶浓度、底物浓度、ATP浓度等反应条件进行优化,建立筛选模型优化反应体系,通过Doxorubicin对反应体系进行验证。结果优化的解旋酶模型测定反应体系和条件为:反应温度为22℃,反应缓冲液pH值为7,酶浓度为5μg/ml,底物浓度为5nmol/L,ATP浓度为2.5mmol/L。用优化的FRET测得2μmol/L Doxorubicin对解旋酶的抑制率为(59.1±17.4)%。结论建立了HCV解旋酶抑制剂FRET法高通量筛选模型,为新型HCV NS3解旋酶抑制剂的研发奠定了基础。
- 李健蕊董飚董飚马雪梅
- 关键词：丙型肝炎病毒解旋酶荧光共振能量转移高通量筛选模型
- 一个新的具有HIV‑1蛋白酶抑制活性的拟肽类化合物及其制备方法和用途
- 本发明属于天然药物技术领域，具体地，本发明涉及从微生物中，特别是链霉菌发酵产物中获得新的拟肽类化合物，及其药用盐类在制备预防和治疗与HIV感染的相关的疾病，例如艾滋病。本发明所述的拟肽类化合物或其药用盐，其结构如下所示：...
- 司书毅陈明华常珊珊董飚巫晔翔姜威余利岩樊秀勇
- 紫草酸B的抗HIV-1活性研究被引量：10
- 2008年
- 目的:研究紫草酸B(lithospermic acid B,LAB)在体外和细胞培养内的抗HIV-1作用及小鼠口服后的血清在细胞培养内的抗HIV-1活性。方法:在体外无细胞系统内采用放射性核素3H掺入法、荧光方法和酶联免疫吸附法分别测定其对HIV-1逆转录酶、蛋白酶和整合酶的半数抑制浓度(IC50);以传代人T淋巴细胞MT-4细胞感染实验病毒株HIV-1ⅢB测定其对细胞的毒性和对HIV-1P24抗原的抑制作用;给小鼠单剂量灌胃LAB200mg.kg-1后不同时间取血,分离血清,测定其在MT-4细胞培养内对HIV-1ⅢB P24抗原的抑制率。结果:LAB在体外抑制HIV-1整合酶和蛋白酶,其IC50分别为(7.91±1.59)和(34.84±1.11)μmol.L-1,对HIV-1逆转录酶无效。在MT-4细胞培养内对细胞的半数有毒浓度(CC50)为(13.31±3.05)μmol.L-1,对MT-4细胞感染HIV-1ⅢB后的P24抗原表达有抑制作用,IC50为(0.240±0.003)μmol.L-1,选择指数为54;与临床应用的HIV-1逆转率酶抑制剂核苷类齐多夫定(AZT)和非核苷类奈韦拉平(NVP)联合用药,均有协同抗HIV-1的作用,联合指数(CI值)分别为0.09和0.41。小鼠灌胃LAB200mg.kg-1后血清在细胞培养内有抑制HIV-1ⅢB P24抗原的活性。结论:LAB在MT-4细胞培养内抑制HIV-1的P24抗原表达,与临床应用的逆转录酶抑制有协同抗HIV-1的作用,但小鼠口服生物利用度较低。
- 彭宗根高雷董飚蒋建东陈鸿珊
- 关键词：HIV-1生物利用度
- 牛膝多糖硫酸酯体外和体内抗艾滋病病毒作用被引量：34
- 2008年
- 牛膝多糖硫酸酯(Achyranthes bidentatapolysaccharide sulfate,ABPS)为牛膝多糖经硫酸酯化修饰后获得的产物,其结构清楚、理化性质稳定及分子质量小,具有抗单纯疱疹病毒、柯萨奇病毒和乙型肝炎病毒等作用。本文研究其在体外和体内的抗艾滋病病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)活性。体外采用3H掺入法和酶联免疫吸附法测定ABPS对HIV-1逆转录酶和整合酶的活性,其半数抑制浓度(50%inhibiting concentrations,IC50)分别为(2.948±0.556)μmol.L-1和(0.155±0.030)μmol.L-1,但25μmol.L-1ABPS对HIV-1蛋白酶无效。ABPS在MT-4细胞培养内对HIV-1实验病毒株IIIB和在人外周血单核细胞培养内对AZT耐药病毒株的急性感染有较强的抑制作用,但在HIV-1 IIIB慢性感染的H9细胞培养中则无效。血清药理学研究表明,单次腹腔注射大鼠ABPS125 mg.kg-1或连续腹腔注射小鼠ABPS3 mg.kg-1(qd×20)后鼠血清在MT-4细胞培养内对HIV-1 P24抗原都有抑制作用,但口服ABPS生物利用度低,灌胃大鼠ABPS 2 g.kg-1或灌胃小鼠ABPS 300 mg.kg-1无效。实验结果提示ABPS有抗HIV-1作用,有可能用于防治HIV-1感染,值得进一步研究。
- 彭宗根陈鸿珊郭志敏董飚田庚元王光强
- 关键词：抗HIV-1活性血清药理学
- 一种酰胺类衍生物或其药学上可接受的盐及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种具有式Ⅰ所示结构的酰胺类衍生物或其药学上可接受的盐，该化合物或其药学上可接受的盐具有明显的抑制HIV蛋白酶和逆转录酶的活性；毒性研究显示其具有良好的成药性，表明该类化合物作为抗艾滋病药物具有良好的应用前景...
- 王玉成朱梅王菊仙张国宁董飚彭宗根岑山王宇佳杜潇楠王明华赵跃李云鸽张煊笛邵端阳牛伟萍
- 文献传递
- 一种包含氨基酸连接链的羰基化合物或其药学上可接受的盐及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种包含氨基酸连接链的羰基化合物或其药学上可接受的盐及其制备方法和应用，属于抗艾滋病药物技术领域。本发明提供的包含氨基酸连接链的羰基化合物或其药学上可接受的盐，具有式I所示的结构。本发明提供的包含氨基酸连接链...
- 朱梅王玉成岑山董飚王菊仙彭宗根王宇佳张国宁单淇杜潇楠王明华牛伟萍窦月周慧宇胡尚玖王维
- 文献传递
- 一种包含氨基酸连接链的羰基化合物或其药学上可接受的盐及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种包含氨基酸连接链的羰基化合物或其药学上可接受的盐及其制备方法和应用，属于抗艾滋病药物技术领域。本发明提供的包含氨基酸连接链的羰基化合物或其药学上可接受的盐，具有式I所示的结构。本发明提供的包含氨基酸连接链...
- 朱梅王玉成岑山董飚王菊仙彭宗根王宇佳张国宁单淇杜潇楠王明华牛伟萍窦月周慧宇胡尚玖王维
- 文献传递
