董浩
- 作品数：4 被引量：17H指数：2
- 供职机构：华侨大学分子药物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 重组人可溶性TRAIL在毕赤酵母中表达与纯化及其抗肿瘤细胞活性
- 2010年
- 目的研究重组人可溶性TRAIL(sTRAIL)蛋白的表达和纯化,以及对HepG2细胞增殖与凋亡的影响。方法将人sTRAIL基因插入毕赤酵母表达载体pPIC9中,构建甲醇酵母分泌型表达载体pPIC9-sTRAIL,电击转化至GS115(his4),MD平板筛选出阳性菌株。对工程菌株发酵培养基成分、pH、甲醇浓度、诱导表达时间等条件进行优化,并初步分析重组sTRAIL蛋白的体外抗肿瘤活性。结果工程菌株在BMMY培养基(pH6.0)、1%甲醇条件下诱导表达48h目的蛋白浓度最高可达(58.7±2.4)mg/L。重组人sTRAIL蛋白能抑制HepG2细胞的增殖、诱导HepG2细胞的凋亡。结论优化了人sTRAIL的表达和纯化工艺条件,所生产的sTRAIL可用于抗肝癌新药的开发。
- 黄晓平王晓董浩赵小峰李招发王启钊许瑞安刁勇
- 关键词：STRAIL毕赤酵母纯化肿瘤
- 重组人kallistatin蛋白在毕赤酵母中的高效表达及生物活性分析被引量：10
- 2010年
- 为了研究kallistatin(Kal)的生物活性,本实验构建了可分泌表达Kal的毕赤酵母菌株。首先通过PCR方法从pAAV-Kal中扩增出KalcDNA,并克隆至酵母表达载体pPIC9,得到甲醇酵母分泌型表达载体pPIC9-Kal,然后将载体线性化并电击转化毕赤酵母GS115(his4),通过MD平板筛选出阳性表达菌株。阳性表达菌株在BMMY培养基(pH7.0)中29℃培养,经2%甲醇诱导表达96h,摇瓶表达量可达14mg/L。表达上清经PhenylSuperose、Heparin SepharoseFF分离纯化,目的蛋白纯度达到98%,分子量为58kDa。生物活性实验显示,所得到的Kal蛋白具有较好的抗氧化活性,过氧化物酶活性达到(163±4)U/(mg·min),可有效降低H2O2对LX-2细胞的氧化损伤。另外,重组产生的Kal还能抑制HUVEC细胞的增殖。本研究首次成功地利用毕赤酵母表达系统分泌表达了有生物活性的Kal,为继续开展其抗肿瘤活性奠定了基础。
- 黄晓平王晓董浩赵小峰李招发王启钊许瑞安刁勇
- 关键词：KALLISTATIN毕赤酵母活性
- Kallistatin的研究进展
- 2009年
- Kallistatin（KAL）是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂（serpin），可以与Kallikrein（血管舒缓素）特异性的结合并抑制其功能的发挥^[1,2]。近年研究发现，KAL还具有抑制血管生成、抗高血压、抗炎和抗肿瘤活性，并且这些功能的发挥并不依赖其与Kallikrein的结合。
- 董浩李亨芬赵小峰黄晓平刁勇
- 关键词：KALLISTATIN丝氨酸蛋白酶抑制剂抑制血管生成血管舒缓素抗肿瘤活性抗高血压
- 以VEGF/VEGFR为靶点的肝癌药物研究进展被引量：7
- 2009年
- 肝癌细胞的生长、转移依赖新生血管的形成,血管内皮生长因子(VEGF)是最有效的促血管生长因子。以VEGF及其受体VEGFR为靶点治疗肝癌是肝癌药物研究的热点。当前肝癌治疗药物疗效差、易产生耐药性、副作用大,而不同药物之间的综合治疗能提高肝癌治疗效果。本文对以VEGF/VEGFR为靶点的肝癌药物研究进行综述。
- 赵小峰董浩黄晓平许瑞安刁勇
- 关键词：肝癌血管生成
