舒凡帆
- 作品数:14 被引量:20H指数:4
- 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项云南省教育厅科学研究基金云南省高端科技人才引进计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 柔嫩艾美耳球虫裂殖子酵母双杂交cDNA文库的构建
- 构建cDNA文库是获得生物某一阶段表达全部基因并进行基因筛选和功能研究的一种现代分子生物学方法,酵母双杂交cDNA文库适用于筛选相互作用蛋白,已在刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)等的研究中有所应用.
- 薛璞黄兵韩红玉金亚美姜连连董辉赵其平王晔朱顺海舒凡帆
- 柔嫩艾美耳球虫eIF3d基因及其应用
- 本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫基因,该基因为编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的柔嫩艾美耳球虫eIF3d基因。本发明还公开了上述基因编码的蛋白质。本发明柔嫩艾美耳球虫eIF3d基因编码的重组蛋白对鸡球虫具有良好的免...
- 韩红玉黄兵孔春林姜连连董辉朱顺海赵其平李婷王晔薛璞舒凡帆
- 文献传递
- 柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2基因真核表达载体的构建及在293T细胞中表达
- 为构建柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2(Eimeria tenella rhoptry neck protein 2, EtRON2)基因的重组质粒pCAGGS-EtRON2,并转染293T细胞进行表达.以柔嫩艾美耳球虫孢...
- 王晔姜连连韩红玉薛璞赵其平董辉朱顺海舒凡帆黄兵
- 柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3在293T细胞中的表达研究被引量:3
- 2013年
- 为构建柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3(Eimeria tenella calcium-dependent protein kinases 3,EtCDPK3)基因的重组质粒pCAGGS-EtCDPK3,并转染293T细胞进行表达,以柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA为模板,经PCR扩增其含完整开放阅读框的序列,将其克隆至pGEM-T easy载体,构建pGEM-Teasy-EtCDPK3重组质粒,双酶切回收目的片段后与相应酶切的真核表达载体pCAGGS连接,构建真核重组表达质粒pCAGGS-EtCDPK3。该重组质粒经酶切和测序鉴定正确后转染293T细胞进行表达,分别用免疫印迹和间接免疫荧光鉴定EtCDPK3基因的表达情况。结果显示所构建的真核重组表达质粒pCAGGSEtCDPK3经过双酶切鉴定,可见1条大小约为1302 bp的目的条带,测序结果与实验室已获得的EtCDPK3序列完全一致;Western blot结果可见大小约为49 kDa的目的蛋白条带,间接免疫荧光实验可以检测到红色荧光。这些研究结果表明已成功构建了EtCDPK3的真核重组表达质粒pCAGGS-EtCDPK3,并在真核细胞中获得表达,为深入研究EtCDPK3的功能和制备DNA疫苗奠定了基础。
- 王晔韩红玉董辉姜连连赵其平朱顺海薛璞舒凡帆黄兵
- 关键词:柔嫩艾美耳球虫293T细胞真核表达
- 柔嫩艾美耳球虫4种基因的真核重组质粒构建与EtAMAl核酸疫苗的保护效果初步评价
- 究以柔嫩艾美耳球虫cDNA和鸡脾脏cDNA为模板,参照GenBank登录序列设计引物,引物上下游加入酶切位点,扩增了柔嫩艾美耳球虫顶体膜蛋白1基因(EtAMAl)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(EtSerpin)、棒状体颈部蛋白2...
- 王晔韩红玉姜连连赵其平薛璞朱顺海舒凡帆董辉黄兵
- 关键词:鸡柔嫩艾美耳球虫核酸疫苗免疫保护力重组质粒
- 我国鸟类原虫种类与感染状况研究进展被引量:6
- 2013年
- 原虫是寄生于鸟的一类常见寄生虫,不仅危害鸟的生长发育,还对人类健康存在潜在威胁。为了解我国鸟类原虫种类与感染状况,作者查阅了近几十年我国在鸟类原虫调查方面的文献。经归类整理,在我国鸟类中共发现原虫70种,隶属于3门、4纲、5目、9科、12属。其中,顶器复合门(Apicomplexa)、孢子虫纲(Sporozoa)、真球虫目(Eucoccidiorida)的原虫有26种,包括艾美耳科(Eimeiridae)的艾美耳球虫属(Eimeria)20种和等孢球虫属(Isospora)2种、隐孢子虫科(Cryptosporidiidae)的隐孢子虫属(Cryptosporidium)3种、住肉孢子虫科(Sarcocystidae)的弓形虫属(Toxoplasma)1种;孢子虫纲、血孢子虫目(Haemospororida)的原虫39种,包括疟原虫科(Plasmodiidae)的疟原虫属(Plasmodium)23种和血变虫属(Haemoproteus)1种、住白细胞虫科(Leucocystozoidae)的住白细胞虫属(Leucocytozoon)15种;肉足鞭毛门(Sarcomastigophora)、动物鞭毛虫纲(Zoomastigophora)、毛滴虫目(Trichomonadorida)的原虫2种,包括单尾滴虫科(Monocercomonadidae)的组织滴虫属(Histomonas)1种、毛滴虫科(Trichomonadidae)的毛滴虫属(Trichomonas)1种;肉足鞭毛门、叶足纲(Lobosasida)、阿米巴目(Amoebida)、内阿米巴科(Entamoebidae)的原虫2种,即内阿米巴属(Entamoeba)1种和内蜒阿米巴属(Endolimax)1种;芽囊原虫新亚门(Blastocysta)、芽囊原虫纲(Blastocystidea)、芽囊原虫目(Blastocystida)、芽囊原虫科(Blastocystidae)的芽囊原虫属(Blastocystis)1种。球虫、疟原虫、隐孢子虫是鸟类中的常见原虫,球虫、疟原虫、血变虫、毛滴虫在鸟中的感染率较高,隐孢子虫、弓形虫、阿米巴、芽囊原虫等为可感染人类的原虫。了解我国鸟类的原虫种类与感染状况,对做好鸟类原虫病的防控和保护鸟类具有十分重要的指导意义。
- 李榴佳黄兵舒凡帆吴有陵
- 关键词:原虫球虫疟原虫隐孢子虫住白细胞原虫
- 柔嫩艾美耳球虫Serpin基因在293T细胞中的表达被引量:1
- 2015年
- 为了检测柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,Et)丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine protease inhibitor,Serpin)基因(EtSerpin)在真核细胞293T中的表达情况,以Et孢子化卵囊cDNA为模板,经PCR扩增含完整Serpin开放阅读框的序列,将其克隆至pGEM-Teasy载体,构建pGEM-Teasy-EtSerpin质粒,双酶切回收目的片段后与相应酶切的真核表达载体pCAGGS连接,构建真核重组表达质粒pCAGGS-EtSerpin.该重组质粒经酶切和测序鉴定正确后转染293T细胞,用间接免疫荧光法和Western blot鉴定EtSerpin基因的表达情况,间接免疫荧光实验可以检测到红色荧光,Western blot结果显示出大小约45.5kDa的目的蛋白条带,结果表明构建的EtSerpin可以在293T细胞中获得表达.
- 王晔韩红玉董辉赵其平朱顺海姜连连薛璞舒凡帆黄兵
- 关键词:柔嫩艾美耳球虫293T细胞真核表达
- 云南藏猪弓形虫病血清学调查
- 2011年
- 为调查云南藏猪弓形虫病流行情况,采集云南迪庆州藏猪血样42份。采用间接血凝试验(IHA)检测弓形虫抗体,被检血清抗体效价大于或等于1:64判为阳性。检测结果显示,42份被检血清中有9份为阳性,血清阳性率为21.4%。检测结果初步说明云南迪庆地区藏猪弓形虫病流行感染率较高,应加强对该病的防控措施。
- 刘敏万宝云魏建宏舒凡帆杨建发邹丰才
- 关键词:藏猪弓形虫病血清学
- 柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库的构建及EtAMA1相互作用蛋白的初步筛选
- 究以柔嫩艾美耳球虫顶体膜蛋白1为诱饵,在柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库中筛选与之相互作用的蛋白,为研究参与子孢子入侵过程中的相关蛋白提供重要的分子基础.首先利用酵母双杂交技术成功构建了柔嫩艾美耳球虫子孢子的c...
- 薛璞韩红玉董辉姜连连朱顺海赵其平王晔舒凡帆黄兵
- 关键词:鸡柔嫩艾美耳球虫酵母双杂交基因文库
- 堆型艾美耳球虫早熟株免疫剂量研究被引量:4
- 2012年
- 为确定堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)早熟株合适的免疫剂量,设立7个早熟株免疫攻虫组、7个母株免疫攻虫组、1个不免疫攻虫组和1个不免疫不攻虫组,7个早熟株/母株免疫组的免疫剂量为孢子化卵囊100、200、400、600、800、1 000、2 000个/羽,经嗉囊感染,7日龄首次免疫,14日龄以同等剂量进行第二次免疫,21日龄以1.5×105个/羽的同源母株进行攻虫,28日龄结束试验,以增重、肠道病变记分和卵囊减少率为试验指标。并对早熟株中免疫保护效果较好的2个免疫剂量进行重复试验,免疫方法、试验周期、试验指标同第一批试验,攻虫剂量为2×105个/羽的同源母株。结果显示,免疫期间,各免疫组的增重与不免疫组差异不显著(P>0.05);攻虫期间,早熟株400、600、800、1 000个/羽和母株600、800、1 000个/羽免疫组的相对增重与不免疫不攻虫组差异不显著(P>0.05);肠道病变记分,除2 000免疫组明显低于不免疫攻虫组(P<0.05)外,其余各免疫组虽低于不免疫攻虫组,但与其差异不显著(P>0.05);卵囊减少率,早熟株和母株400~2 000个/羽免疫组均达90%以上,其中600、800个/羽免疫组达97%以上。用早熟株600、800个/羽进行免疫重复试验,两个免疫组攻虫期间的相对增重和肠道病变记分均与不免疫不攻虫组差异不显著(P>0.05),而与不免疫攻虫组差异显著(P<0.05),其卵囊减少率均在88%以上。研究结果表明,该堆型艾美耳球虫早熟株保持了良好的免疫原性,不同免疫剂量均能诱发鸡产生免疫保护力,其中以600、800个/羽的免疫效果更好,可考虑以600个/羽作为该早熟株在疫苗制备中的推荐免疫剂量。
- 舒凡帆董辉赵其平李婷朱顺海韩红玉姜连连孔春林王晔薛璞邹丰才黄兵
- 关键词:球虫堆型艾美耳球虫早熟株免疫