甘愉
- 作品数：17 被引量：35H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生历史地理更多>>
- 肝癌抑制基因-1肿瘤靶向性表达及其特异性抗肿瘤作用
- 2008年
- 目的建立肝癌抑制基因-1（HCCS1）肿瘤靶向性表达载体，提高肿瘤治疗的安全性。方法活细胞计数试剂盒测定HCCS1高表达对正常细胞和肿瘤细胞的影响，荧光素酶试验检测肿瘤特异性启动子PEG3p在正常肝细胞和肝癌细胞中的相对转录活性，AdEasyTM系统包装并利用PCR鉴定重组腺病毒Ad—PEG-3p—HCCS1，Westernblot检测重组腺病毒感染后HCCS1在正常细胞和肿瘤细胞中的表达情况，结晶紫试验和四甲基偶氮唑盐试验观察该重组腺病毒体外抗肿瘤的靶向性。结果HCCS1高表达对肿瘤细胞株BEL7404和SW-620的生长抑制作用明显超过正常细胞株L02和正常人肺成纤维细胞，96h抑制率达60％。荧光素酶试验显示，PEG-3p在BEL-7404、BEL7405、QGY-7703中的相对转录活性分别为L02的3．9、4．7、1．5倍。成功构建了新抑癌基因HCCS1肿瘤靶向性表达的重组腺病毒Ad—PEG3p—HCCS1，Westernblot检测结果显示，在BEL7404和QGY7703中，HCCS1表达高于在L02中的表达。结晶紫试验和四甲基偶氮唑盐试验显示，Ad—PEG-3p—HCCS1与Ad—CMVHCCS1相比，在不降低对肿瘤抑制效果的前提下，明显降低了对正常细胞的杀伤作用。结论肿瘤细胞对HCCS1的生长抑制作用更为敏感，PEG3p在肝癌细胞中也具有肿瘤特异性，AdPEG-3p—HCCS1可特异性地在肿瘤细胞中表达HCCS1，从而提高HCCS1基因治疗的安全性。
- 张剑甘愉胡晶莹赵新泰
- 关键词：腺病毒载体
- 肺癌干细胞的球体形成与致瘤性分析被引量：21
- 2008年
- 目的：从人肺腺癌细胞株SPC—A1中诱导球体形成，对其中的肺癌干细胞进行鉴定并评估其致瘤能力。方法：无血清条件下培养肺癌细胞，采用表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）、重组人胰岛素样生长因子-1（insulin—like growth factor-1，IGF-1）和重组人成纤维细胞生长因子-10（fibroblast growth factor—10，FGF-10）等细胞生长因子诱导球体形成，球体细胞采用RT—PCR及免疫荧光技术检测干细胞相关标志的表达，并通过NOD—SCID小鼠移植评估其致瘤性。结果：SPC—A1肺腺癌细胞经培养5—10d后，即可形成悬浮生长的细胞球体（肺球体）。RT—PCR检测显示肺球体细胞表达肺癌干细胞表面标志CD24和CD221．细支气管肺泡干细胞标志Clara细胞分泌蛋白和肺泡活性蛋白C，胚胎干细胞主干基因OCT4、Nanog和Bmi-1，以及肺干细咆主干基因甲状腺转录因子-1。采用免疫荧光检测其中3个标志的蛋白表达，证实80％以上的肺球体细胞呈Clara细胞分泌蛋白、肺泡活性蛋白C和OCT4染色阳性。肺球体细胞具有高致瘤性，在NOD—SCID小鼠中移植5103个细胞即可形成肿瘤。结论：肺球体细胞中肺癌干细胞高度富集并具有致瘤性。
- 耿沁董强刚姚明郑必强胡晶莹周瑾赵仰星闫明霞甘愉
- 关键词：细胞培养技术干细胞动物实验
- 抗人整合素β3亚基单克隆抗体的制备及其抗肿瘤活性的研究被引量：2
- 2007年
- 目的制备抗人整合素β3亚基的单克隆抗体(mAb),研究其对肿瘤治疗的作用。方法用RT-PCR方法扩增人β3胞膜外基因,将其克隆至原核表达载体pQE30中,获得含β3胞膜外基因的高效表达载体pQE30-β3,将其转化大肠杆菌M15,通过诱导表达及纯化,获得β3蛋白。将此蛋白免疫BALB/c小鼠,应用B淋巴细胞杂交瘤技术制备抗β3亚基mAb,Western blot鉴定mAb的特异性。通过小鼠体内抑制黑色素瘤生长实验筛选出具有抑制肿瘤生长作用的mAb。进一步用MTT法及流式细胞术观察该mAb体外抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及诱导其凋亡的作用。结果扩增获得了β3胞膜外基因,构建了β3蛋白的原核表达载体,表达纯化了β3蛋白,成功制备了8株mAb,Western blot证明了其特异性。经过体内抑瘤实验筛选出一株具有显著抑制肿瘤生长的mAb4F12。该mAb可抑制HUVEC细胞增殖并诱导其凋亡。结论成功表达了β3蛋白,并制备了有活性的mAb,抗体具有抑制肿瘤生长的作用,这可能是通过抑制血管内皮细胞的增殖和诱发凋亡实现的。
- 马淑花甘愉张毅朱明洁胡晶莹杨瑶琴赵新泰
- 关键词：整合素Β3单克隆抗体肿瘤治疗
- 顾健人院士:德技双馨,誉耀杏林
- 2021年
- 顾健人,上海交通大学教授、中国工程院院士。1932年1月出生于江苏省吴县一个医学世家,1948年毕业于震旦大学附属苏州有原中学,1954年毕业于上海第一医学院。主要从事肿瘤病理、肿瘤生物化学、肿瘤分子生物学科研和教学工作,是我国癌相关基因及基因治疗研究的奠基人之一,提出了肿瘤是一种系统性疾病的概念。现任上海交通大学医学院附属仁济医院上海市肿瘤研究所名誉所长。
- 覃文新李宗海屠红甘愉张志刚
- 关键词：系统性疾病名誉所长肿瘤病理肿瘤生物中国工程院院士
- 乙型肝炎病毒P区变异及其用途
- 本发明涉及乙型肝炎病毒P区变异及其用途。本发明首次揭示了乙型肝炎病毒P区多个位点上的碱基突变与肝癌的发生密切相关，可将这些位点的变异作为肝癌易感性标志。本发明还提供了可特异性检测所述突变位点的试剂或试剂盒。
- 屠红赵芝梅金晏高付敏陈陶阳吴燕甘愉
- 文献传递
- 五行汤经钙离子/溶酶体途径介导的SGC-7901细胞凋亡
- 2011年
- 目的探索五行汤经钙离子/溶酶体途径介导的SGC-7901细胞凋亡机制。方法吖啶橙染色检测溶酶体膜完整性,胞浆蛋白免疫印迹法检测凋亡途径蛋白变化,Annexin V结合实验和CCK-8法检测不同抑制剂对细胞凋亡和存活的影响。结果凋亡细胞的溶酶体膜渗漏,溶酶体释放蛋白酶Cathepsin D和Cathepsin B至胞浆。天冬氨酸蛋白酶Cathepsin D抑制剂对五行汤诱导的细胞凋亡无影响;半胱氨酸蛋白酶Cathepsin B、L、S抑制剂可明显减少细胞凋亡(P<0.05),且对细胞的保护作用呈浓度依赖性。结论五行汤经钙离子/溶酶体途径介导SGC-7901细胞凋亡。
- 莫非胡晶莹甘愉赵仰星朱明洁赵新泰段友容
- 关键词：细胞凋亡钙离子溶酶体
- 丰富生存环境对肿瘤的抑制作用及其相关基因通路分析
- 2015年
- 目的探讨丰富生存环境(EE)对肿瘤抑制作用及可能机制。方法 EE饲养环境为12只以上小鼠置大空间笼饲养,笼内设有用于小鼠探索、学习和运动的玩具。小鼠置EE环境饲养3周后,皮下接种B16F10恶性黑色素瘤细胞或Panc02胰腺癌细胞,置原环境继续饲养,比较EE组和常规环境(SE)饲养组小鼠的成瘤率和瘤重。APCMin/+基因突变小鼠3周龄起分别置EE和SE环境饲养,20周龄时处死小鼠,比较两组小鼠小肠腺瘤数量。实验还采用Agilent小鼠全基因组44K表达谱芯片对Panc02胰腺癌细胞移植瘤组织进行基因表达差异分析。结果与SE饲养比较,EE饲养对B16F10恶性黑色素瘤和Panc02胰腺癌皮下瘤的生长均有显著的抑制作用,抑瘤率分别为43.0%(P<0.05)和58.2%(P<0.01);EE对APCMin/+小鼠肠道腺瘤的生成也具有明显的抑制作用(P<0.05)。Panc02胰腺癌细胞移植瘤表达谱芯片结果的KEGG分析显示,有2倍以上表达差异的基因通路富集于细胞粘附和线粒体功能,并与神经退行性疾病和心脏疾病相关基因有交集。结论 EE对肿瘤的发生发展具有广泛的抑制作用,其对肿瘤细胞内线粒体功能的影响及其生物学意义值得深入研究。
- 甘愉李国华吴育峰蔡小锦姚明屠红
- 关键词：恶性肿瘤基因表达谱
- 乙型肝炎病毒反转录酶编码区核苷酸变异与肝癌的相关性研究被引量：2
- 2014年
- 目的：探讨乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus，HBy）一多聚酶（polymerase，P）基因反转录酶（reversetranscriptase，RT）区突变与肝癌发生的关系。方法：收集202例肝癌患者及202例年龄、性别匹配的慢性HBV携带者（对照组）的血清，采用病例一对照的方法进行研究；PCR法扩增HBV-P基因的RT区，对扩增产物直接测序并进行序列分析，探讨该区域基因突变与肝癌发生的关系。结果：HBIT-P基因RT区共有3个位点发生突变T895A、A904T和C955T，它们在肝癌组中的发生率均显著高于对照组，分别为47．5％坩37．1％（P=0．034）、5．4％VS1．0％（P=0．011）和5．4％vs1．5％（P=O．030）。Logistic多因素分析结果显示，T895A是肝癌的独立危险因素[比值比（oddsratio，0R）=2．230，95％可信区间（confidenceinterval，CI）：1．230～4．044，P=0．008]。A904T和C955T虽有增加肝癌风险的趋势（OR=6．523，95％CI：0．838～50．733和OR=2．904，95％C7：0．599～14．093），但差异无统计学意义。然而，A904T和C955T中有一项为阳性的发生率在肝癌组和对照组中分别是9．4％和2．5％（P=0．003），经多因素调整后统计显示，与肝癌具有相关性（OR=4．145，95％CI：1．170～14．681，P=0．028）。结论：邯V-P基因RT区存在着与肝癌发生相关的突变。
- 高付敏吴燕赵芝梅金晏钱耕荪陈陶阳张亚玮王金兵甘愉项永兵屠红
- 关键词：肝炎病毒乙型DNA突变分析流行病学方法
- 肝癌抑制基因-1与转运功能相关的451bp序列区的确定被引量：1
- 2008年
- 背景与目的:肝癌抑制基因-1(HCCS1)是一种潜在的肝癌抑制基因,并且在细胞内蛋白分拣运输中也发挥着重要作用,其抑癌作用有可能是通过其蛋白转运的功能而发挥的,本文以寻找HCCS1序列中与转运相关的最小功能序列区域为目的。方法:通过亚克隆技术,构建以pEGFP-C2为载体的含不同长度HCCS1cDNA片段的亚克隆,将构建的亚克隆转染子宫颈癌HeLa细胞,通过免疫荧光共聚焦显微镜观察不同长度HCCS1蛋白的分布,以及与6-磷酸甘露糖受体(M6PR)的共定位。结果:成功构建了以pEGFP-C2为载体的10个含有不同长度HCCS1片段的亚克隆;HCCS1cDNA从3'端向5'端逐渐缺失的片段中:2100bp片段至778bp片段编码的不同长度HCCS1蛋白呈颗粒状分布于核周的胞质内,其中2100bp片段至1571bp片段编码的不同长度HCCS1蛋白均呈颗粒状、极性分布于核周的胞质内,且与M6PR有共定位;而1120bp片段至778bp片段编码的不同长度HCCS1蛋白虽然也呈颗粒状分布于核周,但极性分布消失,且与M6PR共定位消失;HCCS1cDNA片段678bp片段至339bp片段编码的不同长度HCCS1蛋白呈散点状弥散分布于胞质以及胞核内。结论:确定了HCCS1cDNA1571bp片段的3'端451bp的序列为与HCCS1转运功能相关的最小区域范围。
- 孔伟甘愉胡晶莹朱明洁赵仰星赵新泰
- 关键词：转运
- 腺病毒介导的HCCS1基因抗肿瘤作用及其机制的研究Prohibitin（PHB）作为肿瘤血清标志物的初步研究
- HCCS1是通过对肝细胞癌病人染色体17p13.3区域的杂合性缺失进行分析发现的新抑癌基因。研究显示，在肝细胞癌组织中HCCS1的表达水平明显低于癌旁正常组织。将HCCS1基因克隆后转染人肝癌细胞株发现，其在体外和体内均...
- 甘愉
- 关键词：治疗基因PHB
- 文献传递
