朱明洁
- 作品数：24 被引量：31H指数：4
- 供职机构：上海市肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市科委纳米专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 豌豆凝集素化载多西他赛聚羟基丁酸酯纳米粒对人乳腺癌MCF-7细胞的细胞摄取实验及抑制作用
- 2016年
- 目的:考察豌豆凝集素化载多西他赛聚羟基丁酸酯纳米粒[pisum sativum agglutinin-anchored docetaxel poly(β-hydroxybutyrate)nanoparticles,PSA-DTX-PHB NPs]对人乳腺癌MCF-7细胞的摄取情况和抑制作用。方法:通过激光共聚焦显微镜观察纳米粒与MCF-7细胞共孵育4h后纳米粒的摄取情况。用MTT法测定纳米粒与MCF-7细胞共孵育24、48和72h后MCF-7细胞的存活率。结果:激光共聚焦显微镜观察显示,豌豆凝集素的修饰能够显著提高MCF-7细胞对纳米粒的摄取量。MTT法发现,载体材料聚羟基丁酸酯对MCF-7细胞无明显细胞毒性。72h时,DTX、DTX-PHB NPs和PSA-DTX-PHB NPs的半数抑制浓度(IC50)分别为(70.24±1.85)、(56.93±1.76)和(9.37±0.97)μg/ml。结论:与空白纳米粒相比,豌豆凝集素化修饰能够显著提高多西他赛纳米粒向MCF-7细胞的递药效率,从而增加其体外细胞毒性。
- 李波朱明洁段友容徐希明李凤前
- 关键词：多西他赛豌豆凝集素MTT法
- 五行汤经钙离子/溶酶体途径介导的SGC-7901细胞凋亡
- 2011年
- 目的探索五行汤经钙离子/溶酶体途径介导的SGC-7901细胞凋亡机制。方法吖啶橙染色检测溶酶体膜完整性,胞浆蛋白免疫印迹法检测凋亡途径蛋白变化,Annexin V结合实验和CCK-8法检测不同抑制剂对细胞凋亡和存活的影响。结果凋亡细胞的溶酶体膜渗漏,溶酶体释放蛋白酶Cathepsin D和Cathepsin B至胞浆。天冬氨酸蛋白酶Cathepsin D抑制剂对五行汤诱导的细胞凋亡无影响;半胱氨酸蛋白酶Cathepsin B、L、S抑制剂可明显减少细胞凋亡(P<0.05),且对细胞的保护作用呈浓度依赖性。结论五行汤经钙离子/溶酶体途径介导SGC-7901细胞凋亡。
- 莫非胡晶莹甘愉赵仰星朱明洁赵新泰段友容
- 关键词：细胞凋亡钙离子溶酶体
- 抗人小细胞肺癌T细胞受体嵌合基因的克隆
- 1997年
- 目的克隆人小细胞肺癌抗体／Ｔ细胞受体嵌合基因。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术将人小细胞肺癌单克隆抗体的变区ＶＨ、ＶＫ与Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）恒区Ｃα、Ｃβ进行拼接，构建成ＶＨＣβ、ＶＫＣα嵌合ＴＣＲ，并分别克隆至ｐＭＡＭ、ｐＸＴ１真核表达载体。结果应用ＰＣＲ中重叠延伸剪接（ＳＯＥ）方法，能简化基因拼接步骤；该嵌合基因的克隆有助于对肿瘤免疫治疗新途径的探索。
- 曹晓运朱明洁张中华王斌黄震宇李斯德
- 关键词：T细胞聚合酶链反应肺肿瘤嵌合基因
- 抗人整合素β3亚基单链抗体基因的构建及在大肠杆菌中表达
- 2006年
- 目的:构建抗人整合素β3亚基单链抗体(ScFv)基因,在大肠杆菌中表达并获得具有活性的ScFv。方法:从分泌抗人整合素β3亚基单抗(mAb)的杂交瘤细胞4F12中提取总RNA,RTPCR扩增VH和VL基因,通过PCR在VH和VL基因间插入柔性连接子(Gly4Ser)3,并将其克隆至原核表达载体pQE中,获得含β3抗体基因的高效表达载体pQEβ3ScFv。将重组子转化大肠杆菌M15后诱导表达,并对表达产物进行纯化和凝胶柱上在位复性。结果:获得抗β3单抗的VH和VL基因,构建了pQEβ3ScFv,并在大肠杆菌中获得了表达,表达蛋白相对分子质量约为26×103,以包涵体形式存在,纯化和复性后,ELISA证实其具有良好的抗原结合活性。结论:成功构建、表达了抗人整合素β3亚基的ScFv基因,并获得了有活性的ScFv。
- 马艳春朱明洁张毅胡晶莹杨瑶琴赵新泰
- 关键词：抗肿瘤药抗体基因表达
- 抗人整合素β3亚基单克隆抗体的制备及其抗肿瘤活性的研究被引量：2
- 2007年
- 目的制备抗人整合素β3亚基的单克隆抗体(mAb),研究其对肿瘤治疗的作用。方法用RT-PCR方法扩增人β3胞膜外基因,将其克隆至原核表达载体pQE30中,获得含β3胞膜外基因的高效表达载体pQE30-β3,将其转化大肠杆菌M15,通过诱导表达及纯化,获得β3蛋白。将此蛋白免疫BALB/c小鼠,应用B淋巴细胞杂交瘤技术制备抗β3亚基mAb,Western blot鉴定mAb的特异性。通过小鼠体内抑制黑色素瘤生长实验筛选出具有抑制肿瘤生长作用的mAb。进一步用MTT法及流式细胞术观察该mAb体外抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及诱导其凋亡的作用。结果扩增获得了β3胞膜外基因,构建了β3蛋白的原核表达载体,表达纯化了β3蛋白,成功制备了8株mAb,Western blot证明了其特异性。经过体内抑瘤实验筛选出一株具有显著抑制肿瘤生长的mAb4F12。该mAb可抑制HUVEC细胞增殖并诱导其凋亡。结论成功表达了β3蛋白,并制备了有活性的mAb,抗体具有抑制肿瘤生长的作用,这可能是通过抑制血管内皮细胞的增殖和诱发凋亡实现的。
- 马淑花甘愉张毅朱明洁胡晶莹杨瑶琴赵新泰
- 关键词：整合素Β3单克隆抗体肿瘤治疗
- 小细胞肺癌2F7单抗ScFv的高效表达及复性研究被引量：4
- 2003年
- 目的在大肠杆菌中高效表达小细胞肺癌单抗2F7的单链抗体(ScFv),并获得具有生物学活性的ScFv。方法利用:PCR方法将2F7单抗重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)通过一人工设计的柔性连接肽(Linker)连接,再将单链抗体基因重组到原核表达载体pQE31中,构建单链抗体高效表达载体pQE-2F7-ScFv。将pQE-2F7-ScFv质粒转化大肠杆菌M15后诱导表达,并对表达产物进行纯化和稀释复性。结果 获得了2F7单链抗体的高效表达,表达蛋白大小约27.4kD,以包涵体形式存在。包涵体蛋白在经过变性、纯化和稀释复性后,获得了有功能的单链抗体。结论 成功地构建和表达了小细胞肺癌单抗2F7的单链抗体,并对其进行了纯化和复性,将进一步促进2F7单抗小分子抗体的应用。
- 马钢张毅胡晶莹朱明洁赵新泰
- 关键词：SCFV复性小细胞肺癌单链抗体
- 抗膜联蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的：制备抗膜联蛋白Ⅰ单克隆抗体（mAb），对其进行特性鉴定，为在恶性肿瘤诊断和治疗中的应用打下基础。方法：构建膜联蛋白Ⅰ基因480bp的原核表达载体pQE30ANXI，异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导蛋白表达，并用Ni—NTA树脂亲和层析柱纯化蛋白。用纯化的膜联蛋白I作为抗原免疫BALB／c小鼠，取免疫小鼠的脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，经过HAT、HT选择培养及有限稀释法进行克隆化，制备抗膜联蛋白Ⅰ蛋白的单克隆抗体，用ELISA、Western blot及免疫组织化学染色法进行特性鉴定。结果：获得5株分泌抗膜联蛋白ImAb的杂交瘤细胞，分别命名为1A8、1D2、1E2、4E7和5G3，所产抗体，均为IgGl亚型，轻链均为K链，亲和力为（2．3～3．03）×10^8L／mol。经Western blot证实获得的mAbs可以特异性识别膜联蛋白Ⅰ抗原；免疫组织化学染色结果也显示这些mAbs可以特异识别肿瘤组织中的膜联蛋白Ⅰ。结论：成功地获得了5株抗膜联蛋白Ⅰ的mAbs，为进一步在肿瘤诊断和治疗中应用膜联蛋白Ⅰ抗体打下了基础。
- 蔡幸胡晶莹莫忠根朱明洁赵新泰
- 关键词：杂交瘤
- 应用免疫PCR法检测肺癌细胞株方法的建立
- 1998年
- 肺癌是全球范围内发病率最高的恶性肿瘤之一。流行病学资料显示，肺癌患者占世界肿瘤患者的１１．８％，而目前临床诊断中约有１０％“肺部块影”通过常规Ｘ线、ＣＴ、支气管镜、痰涂片等检查仍不能明确诊断。免疫－ＰＣＲ法是９０年代兴起的一种新的抗体依赖性的抗原检测...
- 林琳黄震宇张中华杨瑶琴胡晶莹朱明洁许凯黎
- 关键词：免疫-PCR抗原检测肺癌细胞株
- 抗人小细胞肺癌单克隆抗体及应用
- 本发明提供了一种抗人小细胞肺癌的特异性单克隆抗体2F7。该单克隆抗体具有稳定性好和与小细胞肺癌抗原结合的特异性强的特点。本发明还提供了2F7免疫球蛋白、及其片段和免疫偶联物以及含有上述免疫球蛋白、片段或免疫偶联物的药物组...
- 林琳张毅杨瑶琴莫忠根朱明洁胡晶莹赵新泰
- 文献传递
- 乳糖酸修饰mPEG-PLGA-PLL纳米粒靶向肝癌细胞Huh7的研究被引量：5
- 2012年
- 背景与目的:去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)是一种肝细胞特异性表达的膜表面蛋白,能够特异性地识别带有半乳糖残基的糖蛋白。乳糖酸含有半乳糖基团,可以作为靶向肝癌的特异性配基。该研究旨在探讨乳糖酸修饰的聚乙二醇/聚丙交酯-乙交酯/聚赖氨酸[methoxy-poly(ethylene glycol)-b-poly(D,L-lactide-co-glycolide)-b-poly(L-lysine)(mPEG-PLGA-PLL)纳米粒,mPEG-PLGA-PLL-GAL NPs)]对肝癌Huh7靶向效果,为构建新型的靶向肝癌的纳米递送系统提供实验数据。方法:MTT法确定Huh7细胞摄取mPEG-PLGA-PLL NPs与mPEG-PLGA-PLL-GAL NPs适当的浓度;通过激光共聚焦和荧光显微镜定性观察Huh7对罗丹明B标记的mPEG-PLGA-PLL NPs和mPEG-PLGA-PLL-GAL NPs的摄取;并采用流式细胞计数仪定量研究Huh7细胞对两者的摄取差别;尾静脉注射荷Huh7瘤裸鼠研究两者体内分布情况。结果:mPEG-PLGA-PLL NPs与mPEG-PLGA-PLL-GAL NPs的浓度在0.2 mg/mL时细胞存活率较高且对Huh7细胞的毒性较小。激光共聚焦断层扫描显示Huh7细胞可以较好地摄取mPEG-PLGA-PLL-GAL NPs,同时流式细胞仪定量显示mPEG-PLGA-PLL-GAL NPs在Huh7细胞的分布较mPEG-PLGA-PLL NPs高40%(P<0.05)。mPEG-PLGA-PLL NPs与mPEG-PLGA-PLL-GAL NPs在移植瘤中的分布明显多于其他脏器,并且随时间的延长mPEG-PLGA-PLL-GAL NPs体现了更好的靶向效果。结论:体外与体内实验证明乳糖酸修饰的mPEG-PLGA-PLL NPs对肝癌细胞Huh7有很好的靶向效果,可为肝癌的靶向治疗提供较好的药物载体。
- 孙彦明朱明洁王炳武孙颖刘培峰段友容
- 关键词：纳米粒靶向
