王琼
- 作品数：10 被引量：37H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院放射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队科研计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组葡激酶致突变检测试验
- 2004年
- 背景与目的 :观察重组葡激酶有否遗传毒性。材料与方法 :分别经Ames试验、CHL细胞染色体畸变试验和昆明种小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验对其进行了系统检测。结果 :在5个给药剂量(40、20、5.7、3.5、0.7mg/皿)和±S9 mix的情况下 ,重组葡激酶对组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌株TA97、TA98、TA100 和TA102 均无诱发回变作用 ;CHL细胞经重组葡激酶3个剂量(5、2.5和1.25mg/ml)作用一定时间 ,无论在有否活化剂的情况下亦未检测到明显的细胞染色体畸变 ;昆明种雄性成熟小鼠经3个剂量(500、250、125mg/kg)的重组葡激酶尾静脉注射给药后 ,股骨骨髓微核检查结果为阴性。结论
- 刘永学王琼高沛永
- 关键词：重组葡激酶AMES试验染色体畸变微核
- CHO-hm_1R工程细胞株的建立及乙酰胆碱对其细胞内钙离子浓度的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 获得表达人毒蕈碱样乙酰胆碱Ⅰ型受体(hm1 R)的工程细胞株 (CHO hm1 R)并鉴定表达受体是否具有相应的功能活性。方法 以健康人基因组DNA为模板 ,PCR扩增hm1 R之cDNA ,并构建pcDNA3 .1 (+) hm1 R表达载体 ,转染CHO K1 细胞获得CHO hm1 R工程细胞株 ,将不同浓度的乙酰胆碱作用于细胞 ,以Fura 2为荧光探针检测细胞内钙离子浓度变化 ;同时 ,观察阿托品预处理对乙酰胆碱作用的影响。结果 成功得到CHO hm1 R工程细胞株 ;乙酰胆碱 1 0 ,1 0 0 μmol·L-1 均可增高细胞内钙离子浓度 ,此反应可被阿托品 50 0 μmol·L-1 完全阻断。结论 CHO hm1 R工程细胞株可以用于hm1 R配基的检测 。
- 余少平熊永炎王琼贺艳丽伍仕敏高月高沛永刘永学
- 关键词：乙酰胆碱钙离子浓度细胞
- 过氧化体增殖物激活型受体激活物对HepG-2细胞PAI-1表达的影响被引量：1
- 2003年
- 目的 :观察不同的过氧化体增殖物激活型受体 (peroxisomeproliferator activatedreceptors,PPARs)激活物对HepG 2细胞纤溶酶原激活物抑制剂 1 (plasminogenactivatorinhibitor 1 ,PAI 1 )mRNA表达及其活性的影响 ,探讨过氧化体增殖物激活型受体在PAI 1基因调控中的作用。方法 :分别利用硬脂酸、油酸、亚油酸、非诺贝特、吡格列酮作为诱导因素刺激HepG 2细胞 ,采用半定量RT PCR法检测PAI 1mRNA及PPARsmRNA的转录水平 ,比色法检测PAI 1活性变化 ,Westernblot法检测PPARs蛋白表达情况。结果 :与对照组比较 ,油酸、亚油酸组HepG 2细胞PAI 1mRNA表达及蛋白活性显著增加 ;非诺贝特组HepG 2细胞PAI 1mRNA表达及活性显著降低 ;硬脂酸、吡格列酮组HepG 2细胞PAI 1mRNA表达及蛋白活性均无显著变化 ;各组PPARs在mRNA及蛋白水平均无明显差异。结论 :PPARs激活物对HepG 2细胞PAI 1mRNA表达及其活性具有调节作用 ,PPARα可能是实现该调节作用的重要途径之一 ,同时不排除其他调控因素介入该调节过程。
- 贺艳丽周新叶平方红刘永学罗成华王琼
- 关键词：过氧化体增殖物激活型受体激活物HEPG-2细胞PAI-1凝血系统
- PPARγ激活物对体外肥大心肌细胞的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨PPARγ激活物吡格列酮和 15脱氧前列腺素J2 (15d PGJ2 )对体外肥大心肌细胞的影响。方法 :新生大鼠的原代培养心肌细胞 ,以血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激建立体外肥大心肌细胞模型 ,并用不同浓度的吡格列酮和 15d PGJ2 作用于上述细胞。采用RT PCR法检测肥大心肌细胞特征性基因心钠肽 (ANP)和脑钠肽 (BNP)的mRNA表达 ,以3 H 亮氨酸掺入实验检测心肌细胞蛋白合成速率 ,并分析心肌细胞表面积。结果 :所建立的肥大心肌细胞模型呈现心肌细胞表面积、ANP和BNP的mRNA表达以及蛋白合成速率均为增加 ;而吡格列酮和 15d PGJ2 可以逆转这些变化 ,并呈一定的剂量依赖性。结论 :PPARγ激活物吡格列酮和 15d PGJ2 对体外心肌细胞肥大有抑制作用 。
- 伍仕敏周新叶平王琼高月刘永学
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活型受体Γ心肌肥大过氧化物酶体增殖物
- 吡格列酮体外对大鼠心肌肥大的改善作用被引量：9
- 2004年
- 目的 探讨噻唑烷二酮 (TZD)类药物吡格列酮在体外对心肌肥大的影响。方法 新生大鼠的原代培养心肌细胞和非心肌细胞 ,以血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激建立体外心肌肥大模型 ,并用不同浓度的吡格列酮作用细胞。采用RT PCR法检测心肌肥大特征性基因心钠肽 (ANP)和脑钠肽(BNP)的mRNA表达 ,以MTT比色法和3 H TdR参入实验检测非心肌细胞增殖情况 ,以3 H 亮氨酸参入实验检测心肌细胞蛋白合成速率 ,并用软件分析心肌细胞表面积。结果 肥大模型出现后 ,心肌细胞表面积、ANP和BNP的mRNA表达以及蛋白合成速率增加 ;非心肌细胞增殖活跃 ,但ANP和BNP的mRNA表达没有变化。吡格列酮可以逆转这些变化 ,同时下调非心肌细胞的ANP和BNP的mRNA表达 ,并呈一定的剂量依赖性。结论 吡格列酮体外对大鼠心肌肥大有改善作用 。
- 伍仕敏叶平周新王琼罗成华刘永学
- 关键词：吡格列酮心肌肥大ANPBNP
- 过氧化物酶体增殖物激活型受体激活剂对新生大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α的影响被引量：15
- 2003年
- 目的 :探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体 (peroxisomeproliferator_activatedreceptors ,PPARs)激活剂对新生大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子_α(tumornecrosisfactor_α ,TNFα)和PPARs自身表达水平的影响。方法 :体外原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞 ,分别给予不同浓度的非诺贝特 (PPARα激活剂 )或吡格列酮 (PPARγ激活剂 )刺激 ,并辅加脂多糖诱导TNFα表达。采用半定量RT_PCR法检测TNFα ,PPARα及PPARγmRNA的表达 ,ELISA法检测TNFα的蛋白水平 ,Western印迹法检测PPARα和PPARγ蛋白表达。结果 :与对照组相比 ,非诺贝特组和吡格列酮组的TNFαmRNA及蛋白表达水平均明显降低 ,且呈剂量依赖性。而相应PPARα和PPARγ表达则无显著变化。结论 :PPARα和PPARγ激活剂可显著抑制新生大鼠心肌细胞中脂多糖诱导的TNFα表达 ,PPARα和PPARγ活化后发挥抗炎作用 。
- 方红周新叶平贺艳丽王琼高月刘永学
- 关键词：心肌细胞肿瘤坏死因子-Α抗炎药物
- 非诺贝特对脂多糖诱导的心肌细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响被引量：3
- 2003年
- 目的 探讨过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)激活剂对新生大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和PPARα自身表达水平的影响。方法 体外原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞,给予不同浓度的非诺贝特(PPARα激活剂)刺激,并辅加脂多糖诱导TNF-α表达。采用半定量逆转录-聚合酶链反应法检测TNF-α和PPARαmRNA的表达,酶联免疫吸附测定法检测TNF-α的蛋白水平,Westem印迹法检测PPARα蛋白表达。结果 与对照组相比,非诺贝特组的TNF-αmRNA及蛋白表达水平明显降低,且呈剂量依赖性。而相应的PPARα mR-NA及蛋白水平则无显著变化。结论 PPARα激活剂可显著抑制新生大鼠心肌细胞中脂多糖诱导的TNF-α表达,PPARα活化后发挥抗炎作用,但PPARα本身的表达水平可能并没有改变。
- 方红叶平周新贺艳丽伍仕敏王琼高月刘永学
- 关键词：非诺贝特脂多糖心肌细胞肿瘤坏死因子-Α高脂血症
- PPARα激活物影响HepG-2细胞PAI-1表达机制初探被引量：2
- 2004年
- 目的 探讨不同的过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)激活物对HepG 2细胞纤溶酶原激活物抑制剂 1(PAI 1)活性和mRNA表达的影响及其可能的机制。方法 分别以亚油酸和非诺贝特刺激HepG 2细胞 ,检测PAI 1活性和mRNA表达。基因瞬时转染含不同片段缺失的PAI 1启动子序列控制表达的报告基因质粒 ,测定亚油酸和非诺贝特诱导后的转录活性。结果 亚油酸使HepG 2细胞PAI 1mRNA表达及蛋白活性显著增加 ,而非诺贝特使其著降低。转染HepG 2细胞由PAI 1启动子全长控制的表达质粒 ,亚油酸诱导PAI 1转录活性显著增加 ,非诺贝特显著抑制其转录活性 ;转染PAI 1启动子序列核转录因子κB(NF κB)反应元件缺失的质粒时 ,亚油酸和非诺贝特仍显著增加PAI 1转录活性 ;而转染PAI 1启动子序列极低密度脂蛋白 (VLDL) /脂肪酸反应元件缺失的质粒时 ,亚油酸对PAI 1转录活性无诱导作用 ,非诺贝特可下调其转录活性。结论 PPARα可能是亚油酸增强PAI 1表达所涉及的转录因子之一 ;非诺贝特下调PAI 1表达可能涉及对NF κB信号转导途径的抑制作用。
- 叶平贺艳丽王琼刘永学
- 关键词：HEPG-2细胞PAI-1纤溶酶原激活物抑制剂-1
- hMIR表达载体转入CHO细胞系作为药物靶点的初步研究
- 作为新药发现和药理研究的最重要靶标,G蛋白偶联受体(G protein coupled receptor, GPCR)在创新药物研发中具有不可替代的地位。人毒蕈碱型胆碱能受体Ⅰ型(human muscarinic rec...
- 刘永学王琼赵精华路晓钦高月谭洪玲高沛永
- 关键词：CHO细胞孤儿G蛋白偶联受体靶点
- 文献传递
- 不饱和脂肪酸影响HepG-2细胞PAI-1表达的机制初探被引量：3
- 2005年
- 目的 :探讨不饱和脂肪酸对HepG - 2细胞纤溶酶原激活物抑制剂 - 1(PAI- 1)表达的影响及其机制。方法 :以发色底物法检测PAI- 1活性 ,RT -PCR法检测PAI- 1mRNA水平 ;构建两个含不同片段缺失的PAI- 1启动子序列控制表达的氯霉素转移乙酰酶 (CAT)报告基因质粒 ,转染HepG - 2细胞 ,ELISA法检测CAT表达量。结果 :油酸、亚油酸诱导下HepG - 2细胞PAI- 1mRNA表达及蛋白活性显著高于对照组 ;共转染过氧化体增殖物激活型受体表达质粒 (PPARα -pSG5 )PAI- 1转录活性显著增加 ;转染NF -κB样蛋白结合序列缺失的重组质粒 ,亚油酸诱导下PAI- 1转录活性显著增加 ,而转染VLDL/脂肪酸反应元件缺失的重组质粒则无显著变化。结论 :不饱和脂肪酸增强HepG - 2细胞PAI- 1mRNA表达及活性 ;PPARα可能是其上调PAI- 1表达所涉及的转录因子之一 ,且VLDL/脂肪酸反应元件在该调控中具有重要作用 ,但可能并不涉及NF -κB信号转导途径。
- 贺艳丽叶平周新方红王琼刘永学
- 关键词：纤溶酶原激活物抑制物1HEPG-2细胞
