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王国芬: 作品数：89 被引量：300H指数：10; 供职机构：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所更多>>; 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项公益性行业(农业)科研专项国家木薯产业技术体系建设项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>

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海南省香蕉褐缘灰斑病菌的鉴定及ITS序列分析被引量：8: 2006年; 对能单独引起香蕉嫩叶的坏死反应的4个菌株的形态特征、致病性及其核糖体DNA-ITS序列进行分析。结果表明,测试菌株在PDA平板上的菌落生长缓慢、呈圆形白色突起、分生孢子到棍棒形,有隔膜和明显孢痕。进一步克隆并分析供试菌株的DNA-ITS序列,证实了目前引起海南省香蕉叶斑病的主要病原菌为斐济球腔菌Mycosphaerella.fijiensis。根据Genbank上的相关序列,设计了专门检测鉴定M.fijiensis的特异性引物PfijiF1:5′CCTTTGTGAACCACAACT3′;PfijiR1:5′TCCGAAGCGAATTGAAAA3′,可用于香蕉褐缘灰斑病M.fijiensis的分子鉴定及其辅助检测工作。; 王国芬代鹏彭军谢艺贤黄俊生; 关键词：分子鉴定 RDNA

农杆菌浸润瞬时表达分析番木瓜miR162a的研究(英文): 2011年; 农杆菌浸润瞬时表达方法不仅在蛋白互作、鉴定基因沉默抑制子及基因功能研究方面得到广泛应用,目前还应用在小RNA的研究中。在对植物microRNA的研究中,农杆菌浸润方法通过将将转基因导入农杆菌浸润本生烟瞬时表达,可以快速、稳定地对植物microRNA进行检测和鉴定,样品在几天内就可分析完成,比获得稳定遗传的转基因有优势。笔者借鉴国外拟南芥microRNA瞬时表达分析的方法,克隆了番木瓜的miR62a前体序列连接到双元表达载体pSuper1300上构建成35S::cpa-miR162a质粒,导入农杆菌GV3101后浸润本生烟,浸润后48 h提取本生烟叶片总RNA后通过miRNA northern blot检测到miR162a,而本生烟和番木瓜自身则无法检测到低丰度的miR162a。本文介绍的农杆菌浸润瞬时表达方法能够在体外加工产生成熟的miRNA,该技术有助于对microRNA的结构-功能的相关性及靶标验证进一步研究。; 彭军杨腊英王国芬郭立佳汪军黄俊生; 关键词：番木瓜瞬时表达分析 MICRORNA

3种测定香蕉枯萎病病菌致病力方法的比较: 2015年; 由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum fsp.cubense)引起的香蕉枯萎病严重阻碍着香蕉产业的可持续发展。为探索建立一种快捷的测定致病力的方法,以来自广东、海南的9株分离株的致病力测定为基础,8株香蕉枯萎病4号小种为研究对象,1株1号小种为对照,比较了水培苗直接浇菌法、盆栽苗伤根淋菌法、椰糠杯苗伤根浇菌法3种方法。研究发现各菌株在3种测定方法中表现的致病力强弱程度基本一致,其中以盆栽苗伤根淋菌法处理的9株病原菌间的致病力差异最大:水培苗直接浇菌法比其他2种方法操作简便且节省空间,致病周期与其他2种方法相当或更短。筛选出的水培苗直接浇菌法应更适用于分析大批量菌株间的致病力差异性,该方法操作简便,有助于病原菌致病相关基因功能分析和抗病香蕉品种选育等研究。; 杨腊英郭立佳毛超刘磊梁昌聪陈平亚王国芬黄俊生; 关键词：香蕉枯萎病尖孢镰刀菌古巴专化型水培盆栽椰糠

来源于帚枝霉属真菌的激发子蛋白在防治木薯细菌性萎蔫病中的应用: 本发明开了一种来源于帚枝霉属真菌的激发子蛋白在防治木薯细菌性萎蔫病的应用。所述应用是用来源于帚枝霉属真菌的激发子蛋白诱导木薯产生对细菌性萎蔫病的抗病性或者提木薯的抗病性中的应用。该激发子蛋白是具有下述氨基酸残基序列之一的...; 李超萍杨扬时涛王国芬蔡吉苗李博勋黄贵修; 文献传递

解淀粉芽胞杆菌的GFP标记及定殖能力被引量：3: 2017年; 采用改良的海藻糖电转化法获得GFP标记菌株X5-GFP、BQA2-GFP,显微镜观察标记菌株在土壤和水培中的番茄根际的定殖情况。结果表明:标记菌株单独或与青枯菌先后加入进行处理,番茄根际标记菌株的种群数量变化趋势都是一致的。在土壤番茄根际中,X5-GFP单独处理后当天的菌量为1.05×106CFU/g,随之菌量逐渐下降;处理30 d后,为1.50×10~3CFU/g;而BQA2-GFP单独处理后当天菌量为1.68×106 CFU/g,随之菌量也逐渐下降;处理30 d后,为2.50×10~3CFU/g;在水培番茄根际中,X5-GFP单独处理后当天的菌量为2.70×10~5CFU/g,随之菌量逐渐下降;处理30 d后,为1.00×10~3 CFU/g;而BQA2-GFP单独处理后当天菌量为3.60×10~5CFU/g,随之菌量同样逐渐下降;处理30 d后,为1.50×10~3 CFU/g。这表明解淀粉芽胞杆菌X5、BQA2均在番茄根际有较强的定殖能力。; 薛松汪军王国芬杨腊英丁兆建周游黄俊生; 关键词：绿色荧光蛋白定殖

中国木薯病害研究进展与展望: 2023年; 木薯是全球第六大粮食作物,也是中国华南地区重要的经济作物,相关产业在当地农业经济中占有重要地位。木薯种植中,田间各种频繁发生的病害常造成严重的经济损失,是生产中必须关注的重要问题。本文简要回顾了木薯病害研究在建国后至20世纪80年代缓慢发展阶段,20世纪90年代至21世纪10年代快速发展阶段,以及21世纪10年代后高速发展阶段的进展情况,同时着重介绍了最新研究进展。当前,为害中国木薯的病害有4类11种,细菌性萎蔫病为害最为严重,褐斑病发生面积最大,而国际木薯第一大病害——花叶病(类)已入侵中国内地地区,中国热带农业科学院等机构已开展了木薯病害数据库建设和智能监测技术研究。在危险性病害预警方面,国内开展了5种病害风险评估,主要针对花叶病和褐条病的抗性评价、致害机理、检测方法等方面的研究。在细菌性萎蔫病方面,相关机构开展了监测技术、病原菌基因组序列测序和致病(及抗铜)机理、病原种群遗传变异、抗病种质鉴选及抗性机理等方面的研究,也进行了有效药剂筛选和高效施药、生物防治及种茎消毒等防治技术的研发和推广工作。对于花叶病,国内已明确其发生范围、病毒种类、远距离扩散关键因子,并在病毒致害机理、田间传播机制方面取得重要进展。同时,本文还介绍了褐斑病等7种常见病害监控方面的研究进展。随着国民经济的发展,中国木薯产业出现食用化、规模化等趋势,以及在参与机构数量及科研进展速度、多学科融合的助推作用,并对研发新热点等方面进行了展望。本文有助于相关从业人员更好地了解中国木薯病害发生现状及当前研究进展,也为热区其他作物病害监控技术的研发与应用提供借鉴。; 时涛李超萍王国芬黄贵修; 关键词：木薯病害监测技术

香蕉两种主要病毒多重PCR检测方法的建立被引量：8: 2006年; 根据香蕉束顶病（Banana bunchy top virus，BBTV）和香蕉花叶心腐病（Cucumber mosaic virus，CMV）的复制酶基因、外壳蛋白基因序列分别设计特异性引物对，在BBTV单一PCR和CMV RT-PCR优化体系的基础上，建立了可同时检测BBTV、CMV的多重PCR检测方法。此方法可以特异地从感染BBTV和CMV的样品中扩增出2条带，BBTV（748bp）和CMV（557bp）。扩增产物序列测定结果表明，BBTV扩增产物与GenBank中其他分离物的核苷酸序列同源性为91％～99％，CMV扩增产物与GenBank中其他分离物的核苷酸序列同源性为93％～98％。; 彭军王国芬黄俊生代鹏谢玉萍李伟东; 关键词：香蕉香蕉束顶病毒黄瓜花叶病毒病毒检测

芽胞杆菌对香蕉枯萎病的防效评价被引量：6: 2016年; 为有效评价生防菌对香蕉尖孢镰刀菌古巴转化型（Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC4）B2的防病能力,通过对收集的生防菌资源进行抗性筛选,对249个测试菌中筛选到的3株拮抗菌A5-6、D7-16和CL7进行了抑菌观察、抗病谱测定、土壤抑菌能力监测及盆栽苗拮抗能力测定,并对测试菌进行了形态观察和16S r DNA测序鉴定。显微观察显示：3个拮抗菌会导致病原菌B2的菌丝发育畸形、膨胀、胞壁增厚、部分形成泡状、内容物外渗生长以及抑制孢子的萌发。抑菌谱测试表明,菌株对包括FOC4以内的其他真菌性病害抑菌率在60%以上,但对尖孢镰刀菌其他专化型抑菌率较低,仅在40%~50%之间。土壤拮抗性能评价结果表明：拮抗菌单独处理对土壤中FOC数量的控制有限,只能降低1个数量级,但对处理盆栽苗中土壤FOC数量的控制能下降到2个数量级。盆栽实验表明,菌株A5-6以72.3%的防病效果较D7-16（45.4%）、CL7（50.0%）的防效之间差异达到了极显著。3个菌株经形态学和16S r DNA序列鉴定表明D7-16为短短芽胞杆菌（Brevibacillus brevis）,A5-6和CL7也属于芽胞杆菌,3个菌株都是香蕉镰刀菌枯萎病潜在的良好生防资源,可作为生防菌做进一步的开发性研究。; 王国芬汪军曹智淳杨腊英郭立佳丁兆建梁昌聪刘磊黄俊生; 关键词：芽胞杆菌

几种尖孢镰刀菌专化型中SIX1、SIX4、SIX6、SIX8同源基因分析被引量：4: 2015年; 尖孢镰刀菌在与寄主的相互作用中分泌几个特定的富含半胱氨酸的小分子量蛋白进入木质部中启动致病力,被称为SIX(secreted in xylem)蛋白,为明确其在不同寄主中的作用,本研究比较分析了几种尖孢镰刀菌专化型中SIX1、SIX4、SIX6、SIX8同源基因序列。根据已完成的尖孢镰刀菌古巴专化型1号(Foc1)与4号生理小种(Foc4)全基因组测序序列信息及相关SIX基因序列设计引物,应用PCR方法扩增分析56株尖孢镰刀菌古巴专化型与18株其它专化型及非致病型尖孢镰刀菌菌与其它种或属共21株菌株中的SIX1、SIX4、SIX6、SIX8基因。结果表明:设计的SIX1、SIX4、SIX6、SIX8基因引物均不能从非致病性尖孢镰刀菌与其它镰刀属种或其它属的菌株DNA中扩增出目的条带;SIX1基因的2个引物均能从供试的Foc菌株DNA中扩增出目的条带,同时可从部分其它专化型菌株DNA中扩增出目的条带;SIX4基因引物仅能从供试的尖孢镰刀菌番茄专化型与部分甘蓝专化型菌株DNA中扩增出目的条带;SIX6引物仅能从供试Foc1、Foc2、Foc4菌株DNA中扩增出目的条带;SIX8基因引物能从所有供试的致病尖孢镰刀菌中DNA扩增出目的条带。研究发现的SIX6基因序列提供了快速鉴定尖孢镰刀菌古巴专化型的检测方法,同时为深入研究尖孢镰刀菌各个专化型中SIX基因的功能奠定基础。; 杨腊英郭立佳刘磊梁昌聪汪军王国芬陈平亚黄俊生; 关键词：香蕉枯萎病菌分子鉴定

龙眼采后腐烂相关细菌与真菌的分离与鉴定被引量：10: 2013年; 采用稀释涂布平板法,从龙眼腐烂果实中分离细菌和真菌,并结合菌落形态观察以及16S rDNA和ITS序列分析对所分离的细菌和真菌进行鉴定。结果表明,采用稀释涂布平板法,从龙眼腐烂果实中分离得到11株细菌和7株真菌。菌落形态观察以及16S rDNA和ITS序列分析结果表明,所分离的细菌主要鉴定为奥斯陆莫拉菌、短小芽胞杆菌、柠檬明串珠菌、肠膜状明串珠菌和东方醋酸菌。所分离的真菌主要鉴定为淡色生赤壳菌、葡萄座腔菌科真菌、间座壳菌、疖葡萄座腔菌和木贼镰孢菌。从龙眼腐烂果实中分离到的细菌和真菌目前在龙眼采后病害中未见相关报道,对于其致病性检测还有待于进一步的回接验证,以明确导致采后龙眼果实腐烂的主导微生物。; 唐建阳车建美刘波王国芬; 关键词：龙眼采后细菌真菌

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