温晋
- 作品数:10 被引量:20H指数:3
- 供职机构:暨南大学生命科学技术学院生物工程学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学自然科学总论更多>>
- 一种快速简单的质粒DNA纯化方法被引量:5
- 1993年
- 本文介绍一种快速获取高纯度质粒DNA的方法。本法对煮沸提取法进行改良后,快速提取质粒DNA粗制品,然后用国产滤纸从琼脂糖凝胶中回收纯化质粒DNA。同时对本法所提取的质粒DNA的回收率、浓度、纯度及可能的用途进行验证和讨论,证明此法简易,所得样品纯度高,可直接用于转化、酶切和基因克隆。
- 周天鸿李月琴刘飞鹏温晋
- 关键词:质粒DNA提纯
- 硅藻杂种质粒的改建和鉴定被引量:4
- 1991年
- 用XhoI内切酶切出在puc18中克隆的硅藻质粒pcf_1(4.3kb),用T_4 DNA连接酶自身连接环化,再以BclI酶切后插入BamHl酶切的pSV-CAT质粒(5kb),得到了插入方向不同的2种杂种质粒(DRP3和DRP4)。改建后的杂种质粒是一种可用於硅藻和其它真核细胞遗传工程研究用的自主复制型质粒。
- 周金鑫齐雨藻温晋Hildebrand M MVolcani B E
- 关键词:硅藻质粒
- 血清胸腺因子(STF)基因的合成被引量:1
- 1991年
- 利用381A型DNA合成仪,合成了用于编码血清胸腺因子(STF)基因的DNA片段。该片段两端带有两个不同限制性内切酶(Sal I,BamHI)识别位点的粘性末端,中部则为以起始密码子ATG开头并以终止密码子TAG及TAA结尾的多肽(STF)编码序列。将合成STF基因克隆到单链噬菌体M13作双脱氧法定序,定序结果表明合成基因与设计预期结果相符。
- 温晋陈亚民梁建宁周金鑫刘飞鹏周天鸿
- 关键词:基因DNA片段
- PCR专一性研究——PCR的二段扩增法被引量:1
- 1993年
- 多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术问世几年以来,已经广泛应用于分子生物学的各个领域。通过对此技术方法的改进及与其他技术配合,其应用范围更加扩大,方法更加简化。然而在进行分子生物学研究中,PCR扩增(的)产物的专一性特别重要。
- 余焱林刘飞鹏周天鸿温晋
- 关键词:聚合酶链反应生物工程
- 三种新的穿梭质粒pCC10、pCCT7和pST16的构建和性质研究被引量:1
- 1993年
- 利用大肠杆菌质粒pUC18、pTG206和金黄色葡萄球菌质粒pC194在体外构建3个嵌合质粒pCC10、pCCT7和pST16.3个新质粒均是大肠杆菌和枯草杆菌的穿梭质粒。它们在大肠杆菌中呈Ap^rCm^r型,在枯草杆菌中则为Cm^rAp^5型。其中pCCT7和pST16含有xylE基因,可作为启动子探测质粒。所有的新质粒都具有来自pUC18的多酶克隆位点,适合于在大肠杆菌和枯草杆菌中重组外源DNA以及比较它们的表达情况。
- 周天鸿李月琴刘飞鹏温晋
- 关键词:穿梭质粒DNA大肠杆菌
- 硅藻DNA片段在表达质粒pMZR中再克隆的研究
- 1990年
- 用部分酶切法切开表达质粒 pMZR 中一个 HindⅢ位点后,插入了一个带 HindⅢ粘性末端的1kb 硅藻 DNA 片段重组 DNA 分子转化 E.coli LE392,对转化子中的重组 DNA 分子用酶切分析后,鉴定了1kb DNA 片段插入 pMZR 的位置。
- 周金鑫温晋
- 关键词:表达质粒
- 合成血清胸腺因子基因在大肠杆菌中的克隆和表达
- 1996年
- 将合成血清胸腺因子(STF)基因插入表达型大肠杆菌质粒pWR590对大肠杆菌C600进行转化,用同位素探针杂交捡出阳性克隆,以合成STF多肽的抗体用ELISA方法及放射免疫分析证明克隆株能表达出STF多肽。
- 温晋朱建安周天鸿朱嘉明刘飞鹏周金鑫
- 关键词:基因克隆基因表达
- 棒状杆菌亮氨酸操縱子在大肠杆菌中的克隆和表达被引量:1
- 1989年
- 以质粒pTZ22为载体,用HindШ限制酶切割谷氨酸棒状杆菌染色体DNA进行克隆。分离到带有亮氨酸操纵子的4.5kb片段。用Southern切口移位分子杂交检测,证明在4.5kb的片段中既包含有leuB基因,而且对leuA基因也表现同源性。
- 温晋周天鸿郑兆鑫严维耀
- 关键词:基因克隆棒杆菌
- 不同种属细菌之间的质粒DNA电击转移
- 1994年
- 以电场强度12.5kv/cm,RC设定值为5ms为条件,将pBC11质粒DNA从枯草杆菌向大肠杆菌电击转移,一次可得220个转移子。大肠杆菌种内的质粒电击转移,一次可得4200个转移子。但质粒从大肠杆菌向枯草杆菌以及枯草杆菌种内的质粒电击转移效率都较低。实验表明,高电场脉冲可使质粒DNA突破细胞间的屏障实现直接转移。
- 李月琴周天鸿刘飞鹏温晋
- 关键词:质粒DNA细菌
- 枯草杆菌电击法转化被引量:8
- 1992年
- 高电压电击法转化枯草杆菌,以菌株BR151和pBC11质粒为材料,获得每微克DNA的1.6×10~3个转化子。此方法主要依赖于电流脉冲的两个性质:电场强度和脉冲时间RC(时间常数)。
- 周天鸿李月琴刘飞鹏温晋
- 关键词:电击转化枯草杆菌