林玲
- 作品数：7 被引量：31H指数：3
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市卫生局科技基金国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肠道环境与粪菌移植调控肠道菌群失调影响肝纤维化转归被引量：5
- 2020年
- 肝移植是治疗终末期肝病最有效的治疗方法之一,肝纤维化是进展为终末期肝病的必经阶段[1],为了阻止终末期肝病的发生,防治肝纤维化意义重大。肝纤维化本质上是慢性炎症反应诱导成纤维细胞的活化和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的积聚[2],而肝实质的血液供应大约有75%来自门静脉,门静脉系统将肠道直接连接到肝脏,当肠道菌群失调时,细菌及其产物通过门静脉系统到达肝脏,导致慢性炎症引发肝纤维化[3]。
- 林玲宋红丽
- 关键词：终末期肝病门静脉系统慢性炎症反应肝实质肝纤维化
- 常温机械灌注对大鼠心脏死亡器官捐献供肝微循环保护作用的研究被引量：8
- 2021年
- 目的探讨常温机械灌注(normothermic machine perfusion,NMP)对大鼠心脏死亡器官捐献(donation after circulatory death,DCD)供肝微循环发挥的作用。方法采用夹闭SD大鼠胸主动脉热缺血30 min获取DCD供肝;在体外建立大鼠NMP系统。根据不同的保存供肝方式,将实验分为:正常(Normal)组(n=6),留取血清及肝脏待用;NMP组(n=30),保存4、6和8 h后收集肝脏标本,灌注后0、2、4、6 h和8 h收集流入道、流出道灌注液待检;静态冷保存(SCS)组(n=6),肝脏以20 ml 4℃UW液冲出肝内血液,并于UW液中4℃SCS 6 h后收集肝脏标本。采用生物化学方法检测流出道灌注液的肝功能;HE染色观察肝组织病理学改变;透射电镜观察肝细胞超微结构;TUNEL检测肝脏细胞凋亡情况;Western blot检测肝脏组织内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)、细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和血管间黏附分子-1(intervascular adhesion molecule-1,VCAM-1)的表达情况。结果与SCS比较,NMP能显著改善DCD供肝组织学损伤,Suzuki评分NMP组(3.40±0.55)显著低于SCS组(7.00±0.71,F=229.75,P<0.05);减轻肝细胞凋亡,NMP组凋亡细胞数(9.80±1.48)显著低于SCS组(33.40±4.39,F=166.58,P<0.05);同时能修复肝细胞线粒体损伤,NMP组不可逆损伤线粒体数量(1.60±0.55)显著低于SCS组(2.80±0.45,F=36.29,P<0.05)。进一步发现,NMP可改善DCD肝脏微循环:①抑制细胞间黏附,改善内皮细胞损伤,与SCS比较,NMP显著抑制肝内ICAM-1(F=1728.45,P<0.05)、VCAM-1(F=254.72,P<0.05)和vWF(F=595.30,P<0.05)的表达;②改善肝脏ET-1/NOS平衡和微循环灌注,与SCS相比,NMP显著抑制肝内ET-1(F=1372.51,P<0.05)、iNOS(F=1102.20,P<0.05)的表达,促进eNOS(F=271.66,P<0.05)的表达。结论NMP能够改善大鼠DCD供肝质量,其机制可能通过抑制细胞间
- 杨柳曹欢孙东侯宾林玲宋红丽
- 关键词：心脏死亡器官捐献肝脏微循环内皮素-1一氧化氮合酶
- 他克莫司对肝移植急性排斥反应大鼠肠道菌群的影响
- 2023年
- 目的探讨他克莫司对心脏死亡器官捐献(donation after cardiac death,DCD)供肝移植后急性排斥反应大鼠肠道菌群的影响。方法构建稳定运行的常温机械灌注(normothermic machine perfusion,NMP)系统。夹闭Lewis大鼠胸主动脉30 min获取DCD肝脏,以棕色挪威大鼠(BN)为受体,建立原位肝移植急性排斥反应模型。根据对肝脏的不同处理方法,将BN大鼠分为以下3组:假手术(Sham)组、单纯NMP(NMP)组及NMP联合术后他克莫司(FMP)组,每组6只,术后14 d收集血液、肝脏和肠道内容物样本。血液标本检测肝功能,HE染色观察肝脏组织学变化并计算排斥活动指数(rejection activity index,RAI),16 SrDNA检测肠道内容物,观察各组肠道菌群结构、多样性及功能变化。结果FMP组(中位生存期>60 d)大鼠存活时间较NMP组(中位生存期为16.5 d)延长,肝功能和肝组织病理较NMP组显著改善(P<0.05)。计算RAI结果显示,FMP组(2.00±1.23)显著低于NMP组(7.60±1.14)(P<0.05)。与NMP组相比,FMP组肠道菌群丰度下降,两组在物种之间有明显差异,FMP组富含厚壁菌门、阿克曼菌科和毛螺菌科,且富集其他聚糖降解和鞘脂代谢通路。结论他克莫司能够改善DCD供肝移植后急性排斥反应大鼠肝损伤,同时调节肠道菌群结构和代谢途径。
- 林玲袁梦淑田小荣王玉鑫曹欢吴龙龙田轩左怀文张新如宋红丽
- 关键词：肝移植他克莫司心脏死亡器官捐献急性排斥反应肠道菌群
- 肾移植受者CYP3A5＊3和CYP3A4＊18B对他克莫司药动学的影响被引量：15
- 2012年
- 目的探讨肾移植受者细胞色素P450酶（CYP）3A5＊3、CYP3A4＊18B和CYP3A5-CYP3A4单倍型对他克莫司（Tac）药动学的影响。方法采用DNA测序法检测61例肾移植受者CYP3A5＊3和CYP3A4＊18B基因型。酶联免疫吸附试验测定受者的血Tac浓度，比较术后14d和1、2、3个月时不同基因型受者之间血Tac浓度谷值（G0）、Tac剂量（D）及浓度／剂量（G0／D）的差异。结果61例中，CYP3A5＊3和CYP3A4＊18B等位基因突变频率分别为74．6%和26．2％。当CYP3A5表达（＊1／＊1＋＊1／＊3）者的D是CYP3A5未表达（＊3／＊3）者的1．3～1．6倍时，未表达者的G，却是表达者的1．1～1．5倍，G，／D是表达者的1．8～2．4倍。CYP3A4＊18B（＊1／＊18B及＊1813／＊18B）基因型者的D是CYP3A4＊1／＊1基因型者的1．2～1．5倍时，＊1／＊1基因型者的G，是＊18B基因型者的1．2～1．4倍，G0／D是＊18B基因型者的1．5～1．8倍。当CYP3A5-CYP3A4（A～AA）者的D是CYP3A5-CYP3A4（GpGG）者的1．3～1．7倍时，GG-GG的G，是AA-AA的1．5～2倍，G0／D是AA-AA的2．5～3倍。当受者G0／D分别位于中位数上下时，CYP3A5、CYP3A4不同基因型和CYP3A5-CYP3A4不同单倍型受者的分布差异较大。结论肾移植受者CYP3A5＊3和CYP3A4＊18B基因多态性对Tac的药动学有显著影响，对CYP3A5-CYP3A4单倍型的分析比单独考虑一种基因型影响更为显著。
- 林玲宋文利沈中阳张弋
- 关键词：肾移植他克莫司细胞色素P450CYP3A5细胞色素P450CYP3A4
- 铁死亡在大鼠骨髓间充质干细胞减轻肝硬化中的作用被引量：1
- 2022年
- 目的研究铁死亡是否参与大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)减轻肝硬化的过程。方法2021年6月至12月,选取10只SD大鼠(军事医学科学院动物实验中心提供)腹腔注射橄榄油12周作为对照组,另30只SD大鼠腹腔注射含40%四氯化碳(CCl4)的橄榄油混合液8周建立大鼠肝硬化模型,采用随机数表法分为模型组、BMMSCs组及小檗碱组(n=10),分别注射磷酸缓冲盐溶液(PBS)、BMMSCs及小檗碱灌胃处理4周,干预结束后检测肝脏功能,苏木精-伊红(HE)及天狼星红染色检测肝脏病理,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝脏组织Ⅳ型胶原蛋白基因α1(COL4a1)、透明质酸酶1(Hyal1)mRNA,RT-qPCR、蛋白质免疫印迹法(Western blot)及免疫组织化学检测长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA及蛋白表达,检测丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)及Fe^(2+)含量变化,两组间比较采用t检验。结果采用符合标准的BMMSCs,并成功建立大鼠肝硬化模型。BMMSCs组Ishak评分及分期均低于模型组[评分:(4.00±1.00)比(11.33±2.08)分、分期:(2.33±0.58)比(5.67±0.58),t=-5.500、-7.071,P<0.05],肝功能较模型组显著改善[ALT:(44.07±0.60)U/L比(897.47±14.25)U/L、AST:(65.83±1.39)U/L比(2158.73±36.85)U/L、ALB:(39.13±1.29)g/L比(29.47±1.62)g/L,t=-103.610、-98.309、8.096,P<0.05]。铁死亡相关结果显示,BMMSCs组较模型组ACSL4、FTH1蛋白表达均升高[ACSL4:(1.17±0.14)比(0.49±0.12)、FTH1:(0.94±0.07)比(0.38±0.07),t=6.458、9.667,P<0.05],但GPX4蛋白表达升高[(0.75±0.06)比(0.41±0.09),t=5.253,P<0.05],mRNA水平与蛋白表达呈现一致;BMMSCs组较模型组MDA及Fe^(2+)的生成均增加[MDA:(0.41±0.03)μmol/mg比(0.21±0.03)μmol/mg、Fe^(2+):(5.84±0.26)nmol/mg比(2.64±0.14)nmol/mg,t=8.464、18.700,P<0.05],GSH的生成减少[(102.08±1.30)μg/ml比(220.11±1.68)μg/ml,t=-96.163,P<0.05],差异均有统计学意义,铁死亡指标表达上小檗碱组与BMMSCs组相�
- 王玉鑫袁梦淑田小荣翟浩宇林玲吴龙龙左怀文宋红丽
- 关键词：骨髓间充质干细胞肝硬化小檗碱
- HO-1修饰的BMMSCs联合常温机械灌注对肝移植急性排斥反应Brown Norway大鼠肠道屏障功能的影响被引量：1
- 2022年
- 目的分析血红素加氧酶-1(HO-1)修饰的骨髓间充质干细胞(BMMSCs)联合常温机械灌注(NMP)对肝移植急性排斥反应大鼠肠道屏障功能的影响。方法无特定病原体4~5周龄、40~60 g雄性Brown Norway(BN)大鼠2只提取BMMSCs,通过腺病毒转导HO-1;24只7~8周龄、200~220 g雄性Lewis大鼠为供体,30只8~9周龄、220~240 g雄性BN大鼠为受体,"二袖套"法建立原位肝移植急性排斥反应模型。BN大鼠随机分为5组:Sham组仅开腹关腹;NMP组供肝NMP 4 h;BMP组供肝NMP 4 h+门静脉灌注BMMSCs;HBP组供肝同BMP组,但灌注HO-1/BMMSCs;FK506组供肝NMP 4 h,肝移植术后灌胃他克莫司,每组6只。术后第14天取材检测并计算排斥活动指数(RAI),HE染色及透射电镜分别观察肠道病理改变和超微结构,Western印迹检测肠道组织紧密连接蛋白表达,酶联免疫吸附法检测血清脂多糖、D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)。结果HBP组、FK506组RAI为(2.80±0.84)分、(2.20±0.84)分,显著低于NMP组(7.60±1.14)分、BMP组(6.00±1.58)分,差异均有统计学意义(均P<0.05)。肠道HE染色NMP组肠绒毛明显稀疏、皱缩,排列杂乱,BMP组、HBP组、FK506组较NMP组肠道损伤程度减轻。电镜观察HBP组肠上皮细胞微绒毛丰富且排列整齐,细胞间紧密连接结构完整。Western印迹检测闭锁小带-1相对表达,HBP组(0.87±0.06),高于NMP组(0.41±0.12)和FK506组(0.52±0.15);闭合蛋白相对表达HBP组(1.28±0.26),高于NMP组(0.27±0.18)和FK506组(0.63±0.22),差异均有统计学意义(均P<0.05)。HBP组血清脂多糖、D-乳酸和DAO浓度均低于NMP组、FK506组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论HO-1/BMMSCs联合NMP可以保护肝移植术后急性排斥反应BN大鼠的肠道屏障功能。
- 林玲袁梦淑吴龙龙田轩郑卫萍曹欢宋红丽
- 关键词：肝移植急性排斥反应肠道屏障
- 骨髓间充质干细胞联合常温机械灌注对肝移植急性排斥反应大鼠肠道菌群的影响被引量：1
- 2022年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合常温机械灌注(NMP)对肝移植急性排斥反应大鼠肠道菌群的影响。方法2020年4月至10月,选取24只雄性Lewis大鼠为供体,24只雄性Brown Norway大鼠为受体,"二袖套"法建立大鼠肝移植急性排斥反应模型,根据以下处理肝脏方法将大鼠分为四组:假手术组(Sham组)、NMP组(NMP组)、NMP/BMSCs组(BMP组)和他克莫司组(FK506组),在术后第7天处死各组大鼠,苏木精-伊红(HE)染色观察肝脏病理学;生化分析仪检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)的含量;酶联免疫吸附测定(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分别检测血清和肠道组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的含量;对各组大鼠粪便标本进行高通量测序,获得16SrDNA数据。两组间数据比较采用独立样本t检验,多组数据比较采用单因素方差分析。结果BMP组肝窦内充血、炎性细胞浸润程度减轻;排斥活动指数(RAI)(4.17±0.75)低于NMP组(7.67±0.82,t=7.720,P<0.05),差异有统计学意义;血清ALT、AST和ALP[(254.02±35.55)U/L、(457.42±131.22)U/L、(169.60±65.61)U/L]水平低于NMP组[(362.22±57.73)U/L、(741.67±87.19)U/L、(269.93±43.51)U/L,t=3.909、4.419、3.196P<0.05],差异有统计学意义;肠道菌群丰度增加,变形菌门占比下降,阿克曼菌科占比上升,花生四烯酸代谢、上皮细胞的细菌侵袭通路丰度下降;血液中炎性因子TNF-α和IL-6[(66.01±12.46)pg/ml、(130.3±9.67)pg/ml]浓度低于NMP组[(127.1±17.85)pg/ml、(169.9±8.25)pg/ml,t=6.276、6.975,P<0.05],差异有统计学意义;肠组织中炎性因子TNF-α和IL-6[(1.85±0.17)、(3.47±0.22)]的mRNA水平低于NMP组[(2.71±0.34)、(9.45±1.34),t=3.955、7.604,P<0.05],差异有统计学意义。结论BMSCs联合NMP可以减轻大鼠肝移植术后急性排斥反应,同时对大鼠肠道菌群紊乱具有调节作用。
- 林玲袁梦淑吴龙龙田轩郑卫萍曹欢宋红丽
- 关键词：肝移植骨髓间充质干细胞急性排斥反应肠道菌群
