杨永强 作品数:9 被引量:24 H指数:3 供职机构: 第三军医大学大坪医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
慢性荨麻疹患者血清中抗甲状腺蛋白的IgE抗体的检测 李朝阳 孙仁山 杨永强抑制肥大细胞钙通道的适配子及其制备方法 本发明提供了一组抑制肥大细胞钙通道的适配子,其具有如SEQ?ID?NO5-11所示的核苷酸序列。本发明还提供了该抑制肥大细胞钙通道的适配子的制备方法,具体包含以下步骤:1)构建随机ssDNA文库;2)设计引物制备次级ss... 孙仁山 陈晓红 杨永强 冉新泽文献传递 IgE介导肥大细胞脱颗粒模型的建立 本发明提供了一种建立人肥大细胞脱颗粒模型的方法,具体包含步骤:1)提供肥大细胞系细胞,检测细胞的生长曲线;2)建立1种或多种指标物检测的标准曲线;3)活化步骤1)所述的肥大细胞系细胞,将活化的肥大细胞系细胞在900rpm... 孙仁山 陈晓红 杨永强 冉新泽文献传递 肥大细胞系LAD2的培养及肥人细胞脱颗粒模型的建立 被引量:4 2014年 目的培养人肥大细胞系LAD2和建立IgE介导的肥大细胞脱颗粒模型,为研究Ⅰ型超敏反应提供体外实验模型。方法噻唑蓝(MTT)检测细胞生长曲线,细胞染色及电镜观察,Biotin-IgE致敏LAD2细胞,链霉亲和素(Streptavidin)攻击,测定组胺及β-氨基己糖苷酶的释放,判断LAD2细胞的激活效应。结果 MTT检测LAD2细胞的倍增时间为10d;细胞染色及电镜发现细胞内有致密颗粒,随着BiotinIgE致敏浓度的升高,组胺及β-氨基己糖苷酶释放量均逐渐升高。结论人肥大细胞系LAD2培养成功,建立了由IgE介导的脱颗粒模型,为进一步研究Ⅰ型超敏反应奠定基础。 杨永强 陈晓红 李怡然 冉新泽 孙仁山关键词:肥大细胞 组胺 脱颗粒 I型超敏反应 抑制肥大细胞钙通道的适配子及其制备方法 本发明提供了一组抑制肥大细胞钙通道的适配子,其具有如SEQ ID NO5-11所示的核苷酸序列。本发明还提供了该抑制肥大细胞钙通道的适配子的制备方法,具体包含以下步骤:1)构建随机ssDNA文库;2)设计引物制备次级ss... 孙仁山 陈晓红 杨永强 冉新泽加倍剂量左西替利嗪治疗慢性自发性荨麻疹的疗效观察及三磷酸肌醇血清含量的检测 被引量:7 2014年 目的:探讨加倍剂量的左西替利嗪治疗慢性自发性荨麻疹的疗效及三磷酸肌醇(IP3)在慢性自发性荨麻疹(CSU)发病中的作用。方法:选取对常规抗组胺药物效果不佳的CSU患者15例,给予3倍剂量左西替利嗪(15 mg、qd),通过治疗前和治疗7 d后荨麻疹活动性评分(UAS)观察其临床应用效果;采用酶联免疫吸附法检测治疗前和治疗7 d后血清中IP3的含量,并与15例正常人血清IP3含量作对照。结果:15例患者治疗7 d的有效率达100%,4例患者临床症状完全消失。慢性自发性荨麻疹患者治疗前、治疗7 d后及对照组血清中的IP3浓度分别为(43.54±41.97)、(18.40±17.53)、(1.31±0.92)pg/ml;3组血清IP3含量之间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:对于慢性自发性荨麻疹,3倍剂量左西替利嗪疗效显著,未见明显副作用。IP3与疾病的严重程度呈正相关,参与CSU的发病机制。 李朝阳 孙仁山 李菁 宋君 伍津津 杨涛 唐辉 唐书谦 李凤 杨永强关键词:左西替利嗪 三磷酸肌醇 SELEX技术筛选钙通道特异性核酸适配体及其抗肥大细胞活化的作用 被引量:2 2014年 目的筛选针对Orai1分子第1膜外区蛋白的核酸适配体,探讨适配体通过拮抗钙离子释放激活通道(Ca2+release activation channel,CRAC)抑制肥大细胞活化的效应。方法构建随机单链DNA文库,利用不对称PCR对单链DNA文库进行扩增。采用聚苯乙烯酶联板为介质的指数富集配体系统进化(systematic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX)技术筛选核酸适配体。利用酶联免疫吸附实验检测各轮筛选序列与靶蛋白的亲和力,验证适配体与靶蛋白的特异性结合;激光共聚焦显微镜观察适配体对细胞内钙离子浓度变化的影响;利用IgE介导的肥大细胞脱颗粒模型,观察适配体对β-氨基己糖苷酶释放的抑制效应。结果经过12轮SELEX筛选,获得了7条核酸适配体,其中AptamerY1解离常数(Kd值)为1.72×10-8mol/L。以终浓度2μg/mL的AptamerY1可抑制由IgE介导的人肥大细胞系LAD2钙离子内流,并对LAD2细胞的β-氨基己糖苷酶释放抑制率达95%。结论通过SELEX筛选,获得了7条针对Orai1分子第1膜外区的核酸适配体,所获得适配体可对肥大细胞LAD2钙内流有效抑制,进而抑制肥大细胞活化和β-氨基己糖苷酶的释放。 杨永强 陈晓红 李怡然 陈波 冉新泽 杨涛 孙仁山关键词:肥大细胞 IgE介导肥大细胞脱颗粒模型的建立 本发明提供了一种建立人肥大细胞脱颗粒模型的方法,具体包含步骤:1)提供肥大细胞系细胞,检测细胞的生长曲线;2)建立1种或多种指标物检测的标准曲线;3)活化步骤1)所述的肥大细胞系细胞,将活化的肥大细胞系细胞在900rpm... 孙仁山 陈晓红 杨永强 冉新泽文献传递 慢性荨麻疹血清中组胺释放因子(HRF)及HRF反应性IgE的检测 被引量:11 2014年 目的研究组胺释放因子(histamine-releasing factor,HRF)及HRF反应性IgE在慢性荨麻疹患者发病中的作用。方法对40例慢性荨麻疹患者进行活动性评分(the urticaria activity score,UAS),分为重症组和轻症组,采用Elisa酶联免疫吸附试验检测荨麻疹患者发病时血清中HRF及HRF反应性IgE含量,并与40例正常人的检测结果作对照。结果患者组和正常对照组血清中HRF平均值分别为8.81ng/mL和4.30ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。轻症组和重症组的血清HRF平均值分别为4.65 ng/mL和11.06ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。患者组和正常对照组血清HRF反应性IgE抗体平均值分别为1.67IU/mL和0.55IU/mL,差异有统计学意义(P<0.05),重症组和轻症组均数分别为1.30IU/mL和0.91IU/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。直线相关性分析结果显示HRF及同一患者HRF反应性IgE抗体的含量,存在明显正相关性(P=0.006)。结论慢性荨麻疹患者发病时血清中HRF含量及HRF反应性IgE与病情有着显著正相关,说明HRF及HRF反应性IgE在慢性荨麻疹发病中发挥重要作用。 李朝阳 孙仁山 李菁 宋君 伍津津 杨涛 唐辉 唐书谦 李凤 杨永强关键词:荨麻疹 慢性