杨挥
- 作品数:5 被引量:4H指数:1
- 供职机构:中国科学院生物物理研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国科学院知识创新工程更多>>
- 相关领域:生物学理学更多>>
- 猪心线粒体F_o的纯化、重建及其质子转运功能被引量:4
- 2001年
- 比较了猪心线粒体FoF1 ATPase膜部分Fo 的四种纯化方法 .结果表明 ,用NaBr从亚线粒体除去FoF1 ATPase的水溶性部分F1 ATPase后 ,再以CHAPS增溶 ,并经蔗糖梯度离心 ,可获得高纯度的Fo.SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表明 ,纯化的Fo 含有b、OSCP (寡霉素敏感授予蛋白 )、d、a、e、F6、IF1、A6L和c等 9种亚基 .用去污剂稀释法将纯化的Fo 在脂质体上重建后 ,重建Fo 表现较高的被动转运质子活性 .这为在体外深入研究Fo 的活性、构象与膜脂的关系 ,以及Fo 与F1 ATPase的组装等提供了很好的实验模型 .
- 杨挥张玲张旭家黄有国
- 关键词:亚线粒体纯化膜脂
- 磷脂对猪心线粒体F<,0>的构象和活性及其与F<,1>的重组的调节
- 线粒体ATP合酶(F<,0>F<,1>-ATPase)利用质子电化学梯度合成ATP时质子通过其膜上的质子通道F<,0>跨膜运送,并驱动F<,1>部分的γ亚基转动导致三个β亚基的构象发生轮换变化最后完成ATP的合成.纯化的...
- 杨挥
- 关键词:磷脂构象
- 猪心线粒体Fo的组成、构象及质子转运功能
- 高等动物线粒体ATP合成酶(FF-ATPase)的基本组成包括膜外可溶性部分F-ATPase、膜内疏水部分F以及连接二者的柄部。F-ATPase包括α(α)、β(β),γ、δ和ε等五种亚基。1994年,Walker实验室...
- 杨挥张旭家黄有国杨福愉
- 文献传递
- 部分纯化的猪心线粒体F_0的二维结晶及电子晶体学
- 2001年
- 用盐酸胍除去猪心亚线粒体F0F1-ATP合酶的亲水部分F1,经两性去污剂CHAPS从内膜增溶高度疏水性的跨膜部分,即质子通道F0,得到部分纯化的F0.用透析法将纯化的F0与大豆磷脂重组获得了二维晶体,衍射能力达2nm.负染F0晶体的二维投影结果表明,该晶体为p4212平面群,每个晶胞由4个F0分子组成,晶胞参数: a=b=14.4nm.
- 张旭家孙京川杨挥李慧林黄有国杨福愉
- 关键词:膜蛋白电子显微镜
- 心磷脂对重建F_o的质子转运高活性是必需的被引量:1
- 2001年
- 从猪心线粒体纯化了FoF1-ATPase的膜部分质子通道Fo, SDS-PAGE表明纯度约85%, 且不含F1-ATPase的各亚基. 将纯化的Fo在含不同纯磷脂组分的脂质体上重 建, 分别测定心磷脂(CL)、磷脂酸(PA)、磷脂酰肌醇(PI)和磷脂酰丝氨酸(PS)等酸性磷脂对重建Fo质子转运活性的影响, 结果表明, 它们促进重建Fo质子转运活性的强弱顺序是CL>PA>> PI, 而PS却完全抑制重建Fo的质子转运. 阿霉素(ADM)显著抑制含CL的重建Fo的质子转运活性, 提示CL明显促进Fo的质子转运可能与其具有强烈的形成非双层脂结构的倾向性相关. 测定磷脂酰乙醇胺(PE)及二顺油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、二反油酰磷脂酰乙醇胺(DEPE)对重建Fo质子转运活性的影响表明, 有形成非双层脂结构倾向性的PE, DOPE明显促进重建Fo的质子转运. 荧光猝灭剂HB对重建Fo的内源荧光猝灭及专一性标记蛋白质巯基的荧光探剂acrylodan的荧光光谱分析进一步表明, 适当浓度的CL可能使重建Fo具有适合的构象, 并表现高的质子转运活性.
- 杨挥黄有国张旭家杨福愉
- 关键词:CL构象心磷脂线粒体内膜