黄有国 作品数:85 被引量:118 H指数:6 供职机构: 中国科学院生物物理研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 “九五”国家科技攻关计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 理学 更多>>
MRP1活性与其NBDs结构域构象变化的相关性 被引量:1 2004年 用专一性标记蛋白分子中半胱氨酸(Cys)的荧光探针MIANS标记MRP1(multidrugresistanceprotein)的实验结果表明,MIANS与MRP1中的2个Cys结合,结合后不仅荧光强度增加,而且发射波长蓝移,表明所标记的位点处于相对疏水的环境.荧光共振能量转移实验进一步表明,MIANS标记的Cys与MRP1核苷酸结合结构域(NBDs)很接近,其中1分子MIANS标记在NBD1附近,另一分子标记在NBD2附近.ATP,ADP以及化疗药物能阻止MIANS对MRP1的标记.猝灭剂丙烯酰胺、Cs+和I-对MIANS-MRP1荧光猝灭实验又表明,MIANS标记的Cys位点处于一个带正点电荷的区域.同时,巯基结合试剂MIANS和NEM对MRP1ATP酶的活性具有明显的抑制,而化疗药物却有明显的激活作用.上述实验结果提示,核苷酸和化疗药物都能引起MRP1的NBDs的构象变化,核苷酸可直接与NBDs结合,而化疗药物可能通过改变MRP1的跨膜结构域(TMDs)的构象进而影响NBDs的构象,从而调控MRP1ATP酶的活性并影响对化疗药物的转运.结果对于深入揭示MRP1的ATP的结合和水解与其转运化疗药物之间的偶联提供了较直接的实验证据. 黄振华 黄有国关键词:MRP1 多药耐药 构象 化疗药物 结构域 大剂量地塞米松快速高效诱导巨噬细胞凋亡 被引量:4 2000年 运用透射电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、原位末端标记法 (TUNEL)染色等技术 ,检测了大剂量地塞米松处理小鼠腹腔巨噬细胞的各种变化 .结果显示 ,大剂量地塞米松处理的巨噬细胞发生胞体皱缩、染色质凝聚、胞质浓缩 ;TUNEL染色呈阳性 ;0 5h后DNA凝胶电泳即呈梯状条带 ;流式细胞术作周期分析出现凋亡峰等明显的凋亡特征 .并且随处理时间延长凋亡率升高 .结果表明 ,大剂量地塞米松快速。 黄行许 陈练波 鲍永耀 朴英杰 黄有国关键词:腹腔巨噬细胞 细胞凋亡 地塞米松 大剂量 部分纯化的猪心线粒体Fo的二维结晶及电镜三维重构 H-ATPase FF)由膜外的催化部分F和跨膜的质子通道F两部分组成,是一种多亚基的复合体,广泛分布于真核细胞的线粒体膜、叶绿体膜和原核细胞的质膜上。线粒体、叶绿体电子传递链释放的能量以跨膜质子梯差的形式储存起来,通过... 孙京川 扬挥 张旭家 黄有国 杨福愉文献传递 线粒体Ca^(2+)转运和通透转变孔道的开放与能量状态 被引量:4 2000年 对大鼠肝线粒体Ca~2+转运与通透转变孔道(PTP)开放之间的关系,以及线粒体能量状态对Ca~+2转运和PTP开放的影响进行研究.结果显示,Ca~2+诱导的线粒体Ca~2+释放(mCICR)能介导PTP开放,呼吸链电子传递抑制剂抑制mCICR和PTP的开放,使呼吸链的电子传递局部恢复,mCICR和PTP开放也可部分恢复.mCICR和PTP的开放也能被消除跨膜质子梯差的CCCP抑制,表明线粒体Ca~2+转运和PTP的开放都紧密依赖电子传递和能量偶联. 黄行许 翟大勇 黄有国 杨福愉关键词:电子传递 线粒体 GAP-43对G0α的激活及其构象变化的荧光研究 GAP-43(growth associated protein)是一种富含于神经生长锥的神经蛋白,它和神经的系统发生及损伤后再生密切相关。G是分布于质膜内侧的异三聚体GTP结合蛋白,激活或抑制G的活力都会引起轴突生长的... 张玲 黄有国文献传递 大鼠卵巢促黄体激素受体膜外微区(1-341)在昆虫细胞中的表达及其性质的初步研究 被引量:2 1995年 促黄体激素/人绒毛膜促性腺激素受体(LH/hCG receptor)N端膜外微区341个氨基酸残基(简称R341)与激素有很高的亲和力。本文报道编码R341的cDNA在昆虫细胞中的表达及其产物性质的初步研究。SDS-PAGE银染和免疫印迹结果显示,表达产物呈两条带:分子量为38.5Kd的主带和分子量为40.0Kd的次带。配基结合免疫印迹和^(125)IhCG结合印迹分析表明,表达产物R341具有与配基专一性结合的生物活力。竞争性配基结合曲线和Scatchard分析结果显示,重组受体R341和配基hCG有较高的亲和力,与hCG反应的Kd为5.68×10^(-10)mol/L。 申庆祥 李昌麟 沈惠 刘海湖 黄有国 W.Chen Om P.Bahl关键词:促黄体激素 HCG CDNA 昆虫细胞 棕榈酰化可能通过调节G蛋白与膜的结合而介导其信号转导功能 <正>G蛋白在信号转导途径中起着偶联受体和效应器的分子开关的作用。配基与受体结合后促使G结合的GDP被置换成GTP从而启动了G蛋白信号转导通路;GTP被Gα的内源性GTPase水解成GDP则使信号转导通路关闭。G蛋白偶联... 杨胜于 黄有国文献传递 Gi和Go的同时纯化及其性质研究 被引量:1 1999年 经DEAE-Sephacel、UltrogelAcA 34、Heptylam ine-Sepharose 和Bio Scale Q2等四步层析从牛脑皮层膜中同时纯化出抑制型G 蛋白(inhibitory G protein, Gi)和O型G蛋白(other G pro-tein, Go).对Go 的选择性激活使Gi 和Go 的分离大为简化,并使二者的大量制备成为可能.纯化的G 蛋白的SDS-PAGE银染显示单一蛋白带,其结合[35S]GTPγS的活性分别提高68倍和124倍.用圆二色光谱法(CD)测量了纯化的G蛋白的二级结构. 杨胜于 黄有国关键词:G蛋白 GI GO 膜蛋白 化学性质 CD A549/DDP细胞的抗凋亡特性与其pH_i和[Ca^(2+)]_i变化相关 被引量:5 2001年 以临床用药剂量 (30 μmol/L)的顺铂处理敏感的人肺腺癌细胞A5 49和抗顺铂的A5 49/DDP细胞 ,在相同条件下培养 .对培养不同时间的两株细胞DNA琼脂糖凝胶电泳分析的结果表明 ,前者在培养 12h后即呈现DNA梯子 ,而后者在培养 48h后却未见凋亡特征 .用流式细胞计检测其凋亡峰也获得相似的结果 .当测定与凋亡相关的生物化学和生物物理变化时发现对顺铂敏感的A5 49细胞的线粒体膜电势显著降低 ,胞内更加酸化且胞内钙离子浓度升高 ;而抗顺铂药物的A5 49/DDP细胞的线粒体膜电势和pH值却维持在相对较高的水平 ,而其胞内钙离子浓度随培养时间的延长下降 .这些结果表明 ,抗顺铂的人肺腺癌A5 49/DDP细胞的抗凋亡特性与其胞内的相对碱化和较高的线粒体膜电势 ,以及胞内钙离子浓度的降低相关 .这些特性可能参与了A5 黄振华 黄有国关键词:肺腺癌A549细胞 PH [CA^2+]I 抗凋亡 Gαq介导的信号通路增强RGS4蛋白表达 2014年 RGS(regulators of G protein signaling)是G蛋白偶联信号通路中一类重要的调节蛋白,通过加速Gα结合的GTP水解,即GAP(GTPase activating protein)活性,来中止G蛋白信号通路。RGS4是RGS蛋白家族中的重要成员之一,它能有效中止Gαq介导的信号通路。作者研究了Gαq蛋白对RGS4蛋白的表达调控。当在HEK293细胞中共转染这两个蛋白时,持续性激活的Gαq能特异性地显著增加RGS4蛋白的表达。蛋白降解实验结果证明这种增强作用与RGS4的降解被抑制无关,而与RGS4 mRNA表达增强有关。进一步克隆RGS4蛋白的启动子区域并研究其与RGS4表达相互关系的实验结果又表明,持续性激活的Gαq能够显著增强RGS4启动子区的转录活性,且具有时间和浓度效应。同时,转录因子结合区突变体实验证明,ICE(inverted CCAAT box element)转录因子结合区的突变显著影响RGS4基因的转录活性。以上结果表明Gαq可能通过RGS4的启动子区调控其基因的表达,促进RGS4蛋白表达。 虞梅芳 王进城 卫涛涛 黄有国 屠亚平关键词:转录调控