李建辉
- 作品数:4 被引量:2H指数:1
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- H5亚型禽流感病毒样颗粒的构建及生物学活性鉴定被引量:2
- 2012年
- 为构建H5亚型禽流感病毒(AIV)病毒样颗粒(VLPs),并鉴定其生物学活性,本研究通过杆状病毒/昆虫细胞表达系统,分别单独表达H5亚型AIV血凝素(HA)及共表达HA和基质蛋白(M1),并采用免疫组织化学法、SDS-PAGE、western blot和血凝试验等对重组蛋白进行鉴定。实验结果表明:透射电子显微镜观察结果显示,共表达HA和M1的重组蛋白可以形成VLPs,而单独表达HA未观察到VLPs;表达的重组蛋白HA和HA-M1均能够凝集鸡红细胞,血凝效价分别为1∶27和1∶28。结果显示该方法获得的AIV结构蛋白具有良好的生物学活性和抗原活性,从而为禽流感VLPs疫苗的研究提供依据。
- 张超林刘春国王寿山石薇琳李建辉王伟王伟刘彦云
- 关键词:流感病毒血凝素基因杆状病毒表达系统
- H6N8亚型鸭流感病毒HA和NA基因的序列分析
- 分离到一株H6N8亚型鸭源禽流感病毒,HA蛋白裂解位点附近氨基酸残基为(-PQIETR↓GLF-),分子水平上表明这是一株低致病性禽流感病毒。序列分析表明流感病毒分离株HA基因核酸和氨基酸序列均与2005年分离于广西的H...
- 刘春国刘明李建辉石薇琳张超林王寿山
- 关键词:禽流感病毒HA和NA基因
- 文献传递
- 甲型H1N1流感病毒株的分离鉴定以及PR8株的相关基因对重组病毒增殖能力的影响
- 2011年
- 为分离流感病毒,本研究将疑似甲型流感患者的咽喉拭子接种SPF鸡胚尿囊腔,经检测收获的鸡胚尿囊液具有血凝活性。采用流感病毒通用引物进行PCR扩增出8个基因节段,经测序与GenBank中登录的序列比对后确定该病毒株为2009年爆发的甲型H1N1流感病毒,并命名为A/Harbin/LM/2009(H1N1),简称LM株。由于LM分离株在鸡胚中增殖能力比较弱,为提高其在鸡胚中的增殖能力,我们利用反向遗传技术将LM株的HA和NA基因与高增殖特性的人流感病毒细胞高产株PR8的另外6个节段进行"6+2"重配,获得拯救病毒,但该重配病毒血凝价并未显著提高。为进一步鉴定影响病毒增殖能力的基因,本研究将LM株所有节段以"7+1"的方式逐一与PR8的7个片段搭配构成完整的流感病毒基因组,分别得到8个重配病毒。结果显示分离株的PB1、PA、HA基因显著降低了重配病毒在鸡胚细胞中的增殖能力。
- 李建辉刘春国张云刘明
- 关键词:甲型H1N1流感病毒增殖能力
- H5亚型禽流感病毒样颗粒的构建及生物学活性鉴定
- 为研究禽流感病毒(AIV)结构蛋白在昆虫细胞中的表达及其生物活性,本研究通过杆状病毒/昆虫细胞表达系统,单独表达H5亚型AIV血凝素(HA)及共表达HA和基质蛋白(M1),并采用免疫组织化学法,SDS-PAGE,west...
- 张超林刘春国王寿山石薇琳李建辉王伟刘彦云刘明
- 关键词:流感病毒血凝素基因杆状病毒表达系统
- 文献传递