李常海
- 作品数：24 被引量：126H指数：7
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目武汉市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HBx联合AFB1诱导肝卵圆细胞体内转化为肝癌的实验研究
- 第一部分转HBx基因大鼠卵圆细胞株的建立及鉴定
第一节真核表达质粒pEGF-HBx构建和鉴定
目的构建带增强型绿色荧光蛋白/(EGFP/)的真核表达质粒pEGF-HBx，以利于转染细胞的标记和观察，为...
- 李常海
- 关键词：HBX基因融合蛋白真核表达载体增强型绿色荧光蛋白HBX基因融合蛋白真核表达载体增强型绿色荧光蛋白卵圆细胞肝癌肝癌
- 文献传递
- ICG-R15、iMELD及CLD评分在预测肝细胞癌术后肝功能不全程度中的作用及相关性研究被引量：11
- 2014年
- 目的以术后肝功能不全程度为标准来研究术前吲哚氰绿15 min内滞留率(indocyanine green retention rate at 15 minute,ICG-R15)、综合的终末期肝病模型评分(the integrated model for end-stage liver disease scores,i MELD)和慢性肝功能不全评分(chronic liver dysfunction scores,CLD)三者之间的相关性。方法回顾性分析61例行手术切除的原发性肝细胞肝癌患者的临床资料,根据肝功能不全程度分为轻、中、重三组,利用脉冲式色素浓度分析法(pulse dyedensitonmetry,PDD)行吲哚氰绿(indocyanine green,ICG)排泄试验,同时计算患者的i MELD及CLD评分。结果随着术后肝功能不全程度的递增,ICG-R15及CLD评分逐渐升高,差异具有统计学意义(P<0.05);ICG-R15与CLD评分相关性明显强于ICG-R15与i MELD评分的相关性(r=0.65,r=0.49)。结论 ICG-R15与CLD评分正向相关性明显强于i MELD评分。
- 张贯启张志伟李常海董汉华涂振霄童兵吴俣陈孝平
- 关键词：肝功能不全
- HBx基因大鼠卵圆细胞株的建立及鉴定被引量：5
- 2008年
- 目的构建带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的真核表达质粒pEGF—HBx，建立稳定、高效表达乙型肝炎病毒X基因（HBx）的大鼠卵圆细胞株，以便进一步研究HBx基因和卵圆细胞在肝癌发生过程中的作用和机制。方法用PCR方法从质粒pcDNA3．1-HBx中扩增含KpnⅠ和HindⅢ酶切位点的HBx基因序列。对增强型绿色荧光蛋白质粒（pEGFP—N1）及扩增的HBx目的基因片段进行双酶切，纯化后用连接酶连接得到重组体pEGFP—HBx，将其转化大肠杆菌DH5α，抗生素筛选培养得到阳性克隆，提取质粒后用双酶切和基因测序进行鉴定。通过脂质体介导将质粒pEGFP-HBx转染到大鼠卵圆细胞株（LE／6）中，经G418筛选，无限传代后得到稳定表达EGFP—HBx融合蛋白的细胞株。分别采用RT—PCR和免疫细胞化学技术检测细胞株中HBx基因的表达情况。结果双酶切及基因测序结果均显示构建的pEGFP—HBx质粒中含有完整的HBx基因片段。将得到的抗性细胞株培养传代20次后仍表达强的荧光；RT—PCR及免疫细胞化学检测均发现HBx基因在抗性细胞（LE／6）中得到了稳定转录和翻译。结论已成功构建带HBx基因的真核表达质粒pEGFP—HBx，获得了稳定、高效表达EGFP—HBx融合蛋白的大鼠卵圆细胞株，为进一步研究HBx基因和卵圆细胞在肝癌发生过程中的作用和机制奠定了实验基础。
- 李常海陈孝平梁慧芳王恒毅王艳军董为
- 关键词：细胞系HBX基因
- 乙型肝炎病毒编码X蛋白降低大鼠肝脏卵圆细胞对β 型转化生长因子1增殖抑制效应敏感度的研究被引量：2
- 2011年
- 目的研究大鼠肝脏卵圆细胞中乙型肝炎病毒编码X蛋白（HBX）对B型转化生长因子（TGFl3）1增殖抑制效应的影响。方法转染HBX基因的大鼠肝脏卵圆细胞系HBX．EGFP．LE／6作为实验组，大鼠肝脏卵圆细胞系LE／6和转染绿色荧光标记空载体的大鼠肝脏卵圆细胞系EGFP．LE／6作为空白对照和阴性对照组。采用real—timePCR和Westernblot分别检测各组TGFl3受体2的mRNA及蛋白表达水平。各组细胞在体外培养中加入5μ/L外源性TGF[M，采用MTT增殖实验比较各组细胞对外源性TGFβ 1细胞增殖抑制效应的不同反应性。结果实验组TGFl3受体2的mRNA和蛋白表达水平较两个对照组均明显下调（P〈0．05）。MTT增殖实验结果表明HBX在体外影响TGFβ1对卵圆细胞的增殖抑制作用，稳定转染HBX的卵圆细胞株HBX—EGFP—LE／6对TGFβI的增殖抑制效应的反应性为18．1％±1．5％，低于其余两组的42．2％±2．8％和41．9％±5．0％（P〈0．05）。结论HBX在肝脏卵圆细胞中的表达影响TGFβ受体2在卵圆细胞中的转录活性和蛋白合成，并且降低肝脏卵圆细胞对TGFβ1增殖抑制效应的敏感度。
- 王恒毅梁慧芳陈孝平刘伟鹏张占国于宗平李常海
- 关键词：肝炎病毒生长抑制物
- Twist基因在肝细胞肝癌中的表达及意义被引量：8
- 2006年
- 目的探讨转录因子 Twist 在人肝细胞肝癌、癌旁和肝硬化组织中的表达及其意义。方法利用免疫组化方法检测26例肝细胞肝癌标本(癌和癌旁组织)和10例肝硬化标本中 Twist 的表达情况;利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和 Western 蛋白印迹方法检测其中10例标本中的Twist mRNA 和其蛋白的表达情况,分析其临床病理意义。结果免疫组化显示:Twist 蛋白在肝癌、癌旁和肝硬化组织中的阳性率分别为84.6%、19.2%和20.0%,Twist 在肝癌组织中的表达明显强于癌旁或肝硬化组织(P<0.05);大多数癌旁和肝硬化组织无 Twist 表达,癌旁与肝硬化组织相比阳性率无差别(P<0.05)。与癌旁组织相比,Twist mRNA 和其蛋白在肝癌组织中表达明显上调(P<0.05)。结论 Twist 在肝细胞肝癌组织中的过高表达与肝癌的发生发展相关。
- 李常海陈孝平徐宗全李高鹏关剑
- 关键词：TWIST基因肝细胞肝硬化转录因子
- Hes1在肝细胞癌中的表达及意义
- 2014年
- 目的：检测Hes1基因在人肝细胞癌、癌旁、肝硬化和正常肝组织中的表达情况，分析其与乙肝病毒（HBV）的关系和临床意义，探讨Hes1通路在HBV致癌过程中发挥的作用。方法通过免疫组化技术检测60例人肝细胞癌标本（癌、癌旁组织），20例肝硬化组织和20例正常肝组织标本中Hes1蛋白的表达情况；同时利用蛋白质印迹技术（Western-Blot）技术对组化结果进行验证（分别检测10例标本）。比较Hes1在四种组织中的表达差异，分析其与HBV的相关性和与分化程度的关系。结果免疫组化显示，Hes1蛋白在肝癌组织中呈强阳性表达，癌旁和肝硬化组织中呈中度阳性表达，而正常肝组织中呈阴性表达；Hes1在肝癌、癌旁、肝硬化和正常肝组织中的阳性率分别为65．12％、40．23％、32．23％和15．00％，差异有统计学意义（P＜0．05）。Hes1在癌旁和肝硬化组织中表达无差别（P＞0．05）。在HBsAg阳性和HBsAg阴性肝组织中，前者的阳性率显著高于后者（P＜0．05），Hes1的表达与HBV呈显著正相关（r＝0．787，P＝0．001）。低分化肝细胞癌中Hes1的表达明显强于高分化肝细胞癌（P＜0．05）。结论 Hes1在肝癌组织中表达升高与肝癌的发生发展有关，Hes1在HBV相关性肝癌的发病机制中可能起重要作用，Hes1高表达可能意味着预后较差。
- 李常海廖铂张尊义涂震宵童兵吴俣董可帅陈孝平
- 关键词：HES1乙肝病毒肝细胞癌
- 线粒体促凋亡因子Omi/HtrA2在肝癌组织中表达的研究被引量：8
- 2006年
- 目的探讨丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2在肝癌组织、癌旁组织与正常肝组织中的表达及意义。方法应用免疫组化SABC法检测43例肝癌、30例癌旁组织及10例正常肝组织中Omi/HtrA2的表达。结果29例(67·44%)肝癌中Omi/HtrA2蛋白表达阳性,30例癌旁组织和10正常肝组织没有或只有少量很弱的表达。肝癌高分化组中Omi/HtrA2蛋白的表达明显高于中、低分化组(P<0·01)。另外,Omi/HtrA2表达与肿瘤大小及临床分期相关,但Omi/HtrA2表达与肝硬化、有无癌栓、HBsAg和AFP无关。结论肝细胞癌可能需要Omi/HtrA2的表达来促进凋亡,Omi/HtrA2的表达对肝癌的发展有重要作用。
- 徐宗全陈孝平李常海李高鹏张志发
- 关键词：OMI/HTRA2丝氨酸蛋白酶肝癌凋亡
- 线粒体促凋亡因子Omi/HtrA2在肝癌中的表达及意义被引量：2
- 2007年
- 丝氨酸蛋白酶Omi／HtrA2是最近发现的线粒体促凋亡因子。近期研究发现其在肿瘤的发生发展中起到某种作用，在肝癌中的表达及其可能的作用尚无报道。我们研究Omi／HtrA2在肝癌细胞及肝癌组织中的表达情况，探讨Omi／HtrA2在肝癌发生发展中的作用。
- 徐宗全陈孝平李高鹏李常海张万广
- 关键词：OMI/HTRA2促凋亡因子肝癌组织丝氨酸蛋白酶肝癌细胞生发
- Twist在肝癌组织中的表达及意义
- 目的:肝细胞癌/(Hepatocellular Cancer,HCC/)的发生、发展和侵袭扩散机制尚未阐明。本文主要探讨Twist基因在人肝癌组织、癌旁组织和肝硬化组织中的表达情况及临床意义。
方法:1...
- 李常海
- 关键词：TWIST基因肝细胞癌转录因子
- 文献传递
- 肝移植治疗原发性肝癌的现状被引量：18
- 2005年
- 李常海陈孝平黄志勇何松青
- 关键词：原发性肝癌肝移植治疗主要死因手术切除切除术后肝癌手术
